魏恒慧　劉冬梅山東省蒙陰縣畜牧獸醫(yī)局，山東蒙陰276200

藍(lán)耳陰性豬轉(zhuǎn)陽性疫苗免疫試驗(yàn)

魏恒慧劉冬梅
山東省蒙陰縣畜牧獸醫(yī)局，山東蒙陰276200

本研究探索了藍(lán)耳陰性種豬分別免疫VR-2332經(jīng)典株和JXA1高致病毒株藍(lán)耳疫苗后的抗體水平變化（S/P值）。結(jié)果表明，兩者差異不明顯。同時(shí)了解了兩者在統(tǒng)一更換免疫TJM-F92株疫苗后的抗體水平變化。結(jié)果顯示，之前免疫VR-2332毒株的，抗體快速上升；而之前免疫JXA1毒株的，無免疫效果體現(xiàn)。

陰性轉(zhuǎn)陽性；VR-2332株；JXA1株；TJM-F92株

雖然藍(lán)耳ELISA抗體檢測(cè)的S/P值不能反映疫苗保護(hù)力，但對(duì)于藍(lán)耳疫苗免疫以及疫病檢測(cè)仍有一定參考及指導(dǎo)價(jià)值。2013年5月筆者所在豬場(chǎng)引入部分藍(lán)耳陰性原種后備豬，考慮當(dāng)前國(guó)內(nèi)豬場(chǎng)普遍存在藍(lán)耳病的大環(huán)境，同時(shí)也為了掌握藍(lán)耳疫苗免疫后抗體水平變化情況，設(shè)計(jì)了藍(lán)耳陰性轉(zhuǎn)陽性疫苗免疫試驗(yàn)，為確定豬場(chǎng)藍(lán)耳疫苗的免疫效果，尤其是疫苗毒株的選擇提供參考建議。

1　材料與方法

1.1材料

1）試驗(yàn)動(dòng)物。山東泰安某規(guī)?；i場(chǎng)2013年5月10日從威海賽博迪原種豬場(chǎng)引進(jìn)12頭藍(lán)耳陰性后備豬，平均體重90 kg，其中包括2頭公豬。進(jìn)豬前提前派人駐場(chǎng)選豬，并于4月5日、4月27日及5月3日分別采血化驗(yàn)，采用愛德士藍(lán)耳抗體檢測(cè)試劑盒進(jìn)行檢測(cè)，檢測(cè)結(jié)果S/P均為0。

2）疫苗選用。本研究所用疫苗由豬場(chǎng)提供，采用以VR-2332株作為疫苗毒株的某進(jìn)口疫苗和以JXA1株為疫苗毒株的某國(guó)產(chǎn)疫苗，分組進(jìn)行免疫。

3）檢測(cè)試劑與儀器。藍(lán)耳病毒抗體檢測(cè)試劑盒購自北京愛德士元亨生物科技有限公司，美國(guó)IDEXX公司生產(chǎn)。酶標(biāo)儀采用Thermo MK3。

1.2方法

1）藍(lán)耳陰性轉(zhuǎn)陽性試驗(yàn)。進(jìn)場(chǎng)后從5月16日開始（當(dāng)天采完血后進(jìn)行藍(lán)耳疫苗免疫試驗(yàn)），每隔1周采血做抗體檢測(cè)，持續(xù)跟蹤藍(lán)耳抗體水平變化（表1）。

2）更換不同毒株疫苗試驗(yàn)。二免過后，隨著抗體呈緩慢下降趨勢(shì)，在10月11日時(shí)，對(duì)2個(gè)試驗(yàn)組均采用以TJM-F92株為疫苗毒株的國(guó)產(chǎn)疫苗進(jìn)行藍(lán)耳免疫。每隔1周采血做抗體檢測(cè)，持續(xù)跟蹤藍(lán)耳抗體水平變化。

3）試驗(yàn)后備豬臨床觀察。每天觀察試驗(yàn)后備豬的精神狀態(tài)、食欲、糞便等有無異常。

4）樣品陽性或陰性判斷標(biāo)準(zhǔn)。當(dāng)S/P≤0.4，藍(lán)耳抗體陰性（Neg）；S/P＞0.4，抗體陽性（Pos）。

表1　藍(lán)耳陰性豬轉(zhuǎn)陽性試驗(yàn)方案

2　結(jié)果與分析

2.1藍(lán)耳陰性轉(zhuǎn)陽性試驗(yàn)

經(jīng)過抗體檢測(cè)、數(shù)據(jù)整理，試驗(yàn)豬組內(nèi)及組外藍(lán)耳抗體水平對(duì)比結(jié)果如圖1～3（個(gè)別豬某段時(shí)間S/P值有缺失），取組內(nèi)豬的S/P平均值來代表當(dāng)時(shí)整組的抗體水平。

2個(gè)試驗(yàn)組均在5月16日、6月25日進(jìn)行藍(lán)耳疫苗免疫，從圖1、圖2兩試驗(yàn)組抗體檢測(cè)曲線圖上看，首次免疫后抗體爬升速度較慢，4周后才達(dá)到相對(duì)統(tǒng)一、穩(wěn)定水平。其次，二次免疫并沒有起到很好的提升抗體水平的作用，S/P值依舊在1.5上下浮動(dòng)。隨后呈緩慢下降趨勢(shì)，在10月10日時(shí)臨近陰陽性臨界值。

同時(shí)，2個(gè)試驗(yàn)組抗體水平差異不大。雖然圖3中在7月25日-8月22日這段時(shí)間免疫B組抗體水平要低于A組，這和B組1663、2064后備豬抗體水平持續(xù)偏低有直接關(guān)系。

2.2更換不同毒株疫苗試驗(yàn)

通過圖4發(fā)現(xiàn)，之前防疫VR-2332毒株的1周后抗體上升，而之前防疫JXA1毒株疫苗的抗體依然持續(xù)下降，只是在10月31日時(shí)出現(xiàn)1次不正常的突升。

圖1　試驗(yàn)A組各豬只藍(lán)耳抗體變化曲線圖

圖2　試驗(yàn)B組藍(lán)耳抗體水平變化曲線圖

圖3　試驗(yàn)A、B組藍(lán)耳抗體水平對(duì)比曲線圖

圖4　更換T JM-F 9 2株疫苗后試驗(yàn)豬藍(lán)耳抗體水平曲線圖

2.3試驗(yàn)豬臨床健康狀況

在整個(gè)試驗(yàn)過程中，包括中間有免疫細(xì)小病毒、乙腦、豬瘟等其他疫苗，后備豬的精神狀態(tài)、食欲、糞便等都無異常。而且意外的是，1878、1646、1258、2064、1663在8月初、1663在9月初產(chǎn)仔。按日期推算，這幾頭后備豬在進(jìn)場(chǎng)時(shí)就已配種懷孕（在原場(chǎng)種豬群采用生態(tài)圈飼養(yǎng)，且公母混養(yǎng)）。雖然經(jīng)受長(zhǎng)途運(yùn)輸、定期采血、疫苗免疫等各種應(yīng)激，從產(chǎn)仔及仔豬生長(zhǎng)情況來看，還比較正常。

3　結(jié)果與討論

1）在陰性轉(zhuǎn)陽性試驗(yàn)中，首次免疫后抗體爬升速度很慢，3～4周才有體現(xiàn)。二次免疫沒有體現(xiàn)出抗體提升的效果。當(dāng)然，也可能沒有二次免疫的話，免疫效果更差。

2）在陰性轉(zhuǎn)陽性二次免疫過程中，2個(gè)實(shí)驗(yàn)組整體抗體水平差異不大。有一段時(shí)間有差異，也是和個(gè)別試驗(yàn)豬“不合群”的抗體表現(xiàn)有直接原因。

3）在兩試驗(yàn)組同時(shí)更換TJM-F92株疫苗進(jìn)行免疫時(shí)，差異非常明顯。理論上JXA1株和TJM-F92株都屬于高致病性藍(lán)耳毒株，核苷酸序列同源性很高，但在試驗(yàn)中并沒有很好的體現(xiàn)，沒有起到免疫記憶效果。而之前免疫VR-2332毒株的，在更換TJM-F92株疫苗免疫后抗體快速上升，確實(shí)很意外。

4）就試驗(yàn)結(jié)果而言，結(jié)合藍(lán)耳疫苗免疫安全性的問題（高致病性毒株疫苗安全性差），是否可以考慮采用經(jīng)典毒株VR-2332株代替TJM-F92株的疫苗進(jìn)行藍(lán)耳免疫。至于其他經(jīng)典毒株能否代替TJM-F92株以及VR-2332株能否代替其他高致病性藍(lán)耳毒株，本文試驗(yàn)未涉及，不得而知。

2015-06-05

魏恒慧，女，1978年生，助理獸醫(yī)師。