李波　陳雪梅　于海龍等

摘要： 以14個(gè)苜蓿品種的種子為試驗(yàn)材料，研究不同濃度混合鹽堿脅迫對苜蓿種子萌發(fā)的影響。結(jié)果表明，各苜蓿種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢、發(fā)芽指數(shù)、活力指數(shù)、胚根長度、胚芽長度、干質(zhì)量、鮮質(zhì)量均隨著復(fù)合鹽堿濃度的增大而呈 下降趨勢，其中E組的鹽堿濃度對種子萌發(fā)的影響最大。利用隸屬函數(shù)和權(quán)重系數(shù)方法綜合評價(jià)14個(gè)苜蓿品種的種子抗鹽堿能力為：農(nóng)菁1號>和平>龍牧801>龍牧806>龍牧81>圖牧2號>德寶>龍牧100>草原1號>敖漢>龍牧803>賽特>公農(nóng)1號>FD2。

關(guān)鍵詞： 苜蓿；鹽堿脅迫；種子萌發(fā)；抗鹽堿性；隸屬函數(shù)；相關(guān)性

中圖分類號： S551+ 701 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A

文章編號：1002-1302（2015）08-0221-05

苜蓿（Medicago sativa L ）是豆科多年生草本植物，是世界栽培面積最大的豆科牧草之一，具有改良土壤、耐瘠薄、抗逆性強(qiáng)等特點(diǎn)。大面積鹽堿地限制了我國畜牧業(yè)的發(fā)展，苜蓿產(chǎn)業(yè)不僅能夠促進(jìn)畜牧業(yè)的發(fā)展，還能改善生態(tài)環(huán)境，但苜蓿品種間的耐鹽堿性差異較大 [1-3]。種子萌發(fā)期往往是對鹽堿脅迫十分敏感的時(shí)期，這一時(shí)期的特性決定了該植物在某一地區(qū)能否成功建苗 [4]。本研究通過對不同品種的苜蓿進(jìn)行混合鹽堿脅迫，旨在對苜蓿品種進(jìn)行耐鹽堿性早期鑒定，為篩選具有較高耐鹽堿性的苜蓿品種提供試驗(yàn)依據(jù)。

1 材料與方法

1 1 試驗(yàn)材料

14個(gè)苜蓿品種的種子由黑龍江省畜牧研究所提供，苜蓿品種相應(yīng)的品種編號見表1。

1 2 試驗(yàn)方法

1 2 1 鹽堿濃度梯度的設(shè)置 根據(jù)黑龍江省松嫩平原一些地區(qū)鹽堿地的鹽堿組成，選擇氯化鈉、硫酸鈉、碳酸鈉、碳酸氫鈉4種鹽按照一定比例復(fù)合，設(shè)置A、B、C、D、E隨鹽堿濃度遞增的5組不同復(fù)合鹽堿組別。鹽堿梯度的配比見表2。

1 2 2 鹽堿脅迫方法 選擇籽粒飽滿且均勻的14個(gè)苜蓿品種的種子，用0 1% 氯化汞溶液滅菌2 min，然后均勻置于鋪有2層濾紙的培養(yǎng)皿中，每皿50粒種子，加入 10 mL 不同濃度的復(fù)合鹽堿溶液，以蒸餾水培養(yǎng)的種子為對照，重復(fù)3次。將培養(yǎng)皿放入光照培養(yǎng)箱內(nèi)，設(shè)置培養(yǎng)溫度為25 ℃。每天08：00稱質(zhì)量并補(bǔ)充蒸發(fā)水分，以維持鹽堿濃度的穩(wěn)定。

1 2 3 耐鹽堿性測定 種子活力測定：以胚根長度達(dá)到種子長度的1/2時(shí)為發(fā)芽，苜蓿種子發(fā)芽時(shí)間為10 d，發(fā)芽勢為 4 d 內(nèi)發(fā)芽種子數(shù)。

測定指標(biāo) [5-6]：種子發(fā)芽率（%）；發(fā)芽勢（%）；發(fā)芽指數(shù)（GI）=∑（Gt/t）（Gt為t d種子發(fā)芽數(shù)，t為對應(yīng)種子發(fā)芽時(shí)間，t=1，2，…，7）；活力指數(shù)=GI×S（S為胚根的平均根質(zhì)量）。

胚根和胚芽長度測定：種子萌發(fā)10 d后，把芽苗分成地上部和地下部，用刻度尺分別測量它們的胚根長、胚芽長。

芽苗鮮質(zhì)量、干質(zhì)量的測定：從每個(gè)培養(yǎng)皿中分別挑選5株具代表性的芽苗，用吸水紙吸干水分后迅速稱質(zhì)量。將測量過鮮質(zhì)量的芽苗放入80 ℃烘箱中，24 h后烘干至恒質(zhì)量。

1 3 耐鹽性評價(jià)與分析

耐鹽系數(shù)的計(jì)算公式為：

耐鹽系數(shù)=（不同鹽堿濃度處理下平均測定值/對照測定值）×100%。

相關(guān)分析法：采用SPSS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行相關(guān)性分析。

綜合分析法 [7]：采用隸屬函數(shù)法對不同品種的苜蓿在試驗(yàn)中測得的隸屬值進(jìn)行累加，求得平均數(shù)并進(jìn)行分析比較，以評定出復(fù)合鹽堿對苜蓿種子萌發(fā)特性的影響。

隸屬函數(shù)計(jì)算方法：

X1（u）=（X-Xmin）/（Xmax-Xmin）。

式中：X1（u）為隸屬函數(shù)值；X為經(jīng)過復(fù)合鹽堿脅迫條件下某指標(biāo)的測定值；Xmax為所有品種中此指標(biāo)的最大值；Xmin為所有品種中此指標(biāo)的最小值。

權(quán)重系數(shù)=某復(fù)合鹽堿濃度下各指標(biāo)的綜合耐鹽系數(shù)/各濃度各指標(biāo)的耐鹽系數(shù)之和；

綜合評價(jià)值=隸屬函數(shù)×權(quán)重系數(shù)。

2 結(jié)果與分析

2 1 復(fù)合鹽堿脅迫對苜蓿種子發(fā)芽率和發(fā)芽勢的影響

14個(gè)苜蓿品種的發(fā)芽率、發(fā)芽勢變化分別見圖1、圖2。低濃度的復(fù)合鹽堿對苜蓿發(fā)芽率和發(fā)芽勢的影響不明顯，隨著復(fù)合鹽堿濃度的提高，發(fā)芽率和發(fā)芽勢呈現(xiàn)顯著下降趨勢。E組復(fù)合鹽堿濃度脅迫下，苜蓿的發(fā)芽率、發(fā)芽勢均最低。14個(gè)苜蓿品種種子的發(fā)芽率、發(fā)芽勢的綜合耐鹽系數(shù)見表3，耐鹽系數(shù)體現(xiàn)了品種的耐鹽堿性強(qiáng)弱。從發(fā)芽率角度看，和平耐鹽性最強(qiáng)，草原1號最弱；從發(fā)芽勢角度看，龍牧806耐鹽性最強(qiáng)，龍牧81最弱。對復(fù)合鹽堿脅迫下的苜蓿發(fā)芽率、發(fā)芽勢進(jìn)行方差分析表明，品種間發(fā)芽率、發(fā)芽勢的差異極顯著（P<0 01），不同復(fù)合鹽堿濃度梯度間發(fā)芽率和發(fā)芽勢差異極顯著（P<0 01）。

2 2 復(fù)合鹽堿脅迫對苜蓿芽苗干質(zhì)量、鮮質(zhì)量的影響

14個(gè)苜蓿品種芽苗的鮮質(zhì)量、干質(zhì)量的變化分別見圖3、圖4。低濃度的復(fù)合鹽堿對苜蓿鮮質(zhì)量、干質(zhì)量的影響不明顯[CM（25]，隨著復(fù)合鹽堿濃度的提高， 鮮質(zhì)量、干質(zhì)量呈現(xiàn)顯著下降

趨勢。E組復(fù)合鹽堿濃度脅迫下，苜蓿芽苗的鮮質(zhì)量和干質(zhì)量普遍較低。從鮮質(zhì)量角度看，公農(nóng)1號耐鹽性最強(qiáng)，賽特最弱；從干質(zhì)量角度看，龍牧100耐鹽性最強(qiáng)，公農(nóng)1號最弱（表3）。對復(fù)合鹽堿脅迫下的苜蓿鮮質(zhì)量、干質(zhì)量進(jìn)行方差分析表明，品種間鮮質(zhì)量和干質(zhì)量差異極顯著（P<0 01），不同復(fù)合鹽堿濃度梯度間鮮質(zhì)量、干質(zhì)量差異極顯著（P<0 01）。

2 3 復(fù)合鹽堿脅迫對苜蓿胚根、胚芽長度的影響

14個(gè)苜蓿品種的胚根、胚芽長度變化分別見圖5、圖6。低濃度的復(fù)合鹽堿對苜蓿胚根、胚芽長度的影響不明顯，隨著復(fù)合鹽堿濃度的提高，胚根、胚芽長度呈現(xiàn)下降趨勢。E組復(fù)合鹽堿濃度脅迫下，苜蓿的胚根和胚芽長度普遍較低。從胚根長度看，草原1號耐鹽性最強(qiáng)，公農(nóng)1號最弱；從胚芽長度看，農(nóng)菁1號耐鹽性最強(qiáng)，賽特最弱（表3）。對復(fù)合鹽堿脅迫下的苜蓿胚根和胚芽長度進(jìn)行方差分析表明，品種間胚根、胚芽長度差異極顯著（P<0 01），不同復(fù)合鹽堿濃度梯度間胚根、胚芽長度差異極顯著（P<0 01）。