陳 婕，林文庭

(福建醫(yī)科大學(xué) 公共衛(wèi)生學(xué)院，福建 福州 350108)

復(fù)方滸苔多糖降血脂及抗脂質(zhì)過氧化作用研究

陳 婕，林文庭

(福建醫(yī)科大學(xué) 公共衛(wèi)生學(xué)院，福建 福州 350108)

目的 研究復(fù)方滸苔多糖(滸苔多糖、山楂提取物、荷葉提取物及茶多酚各25%配制而成)的降血脂及抗脂質(zhì)過氧化作用。 方法 根據(jù)TC水平將42只大鼠隨機(jī)分為空白組，高脂模型組，滸苔多糖組，復(fù)方滸苔多糖低、中、高劑量組。滸苔多糖組及復(fù)方滸苔多糖組分別給予滸苔多糖及不同劑量的復(fù)方滸苔多糖灌胃干預(yù)45 d，測(cè)定各組大鼠血清中的總膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)的含量及超氧化物歧化酶 (SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的活性。 結(jié)果 與高脂模型組比較，各劑量復(fù)方滸苔多糖的TC水平下降、GSH-Px活性提高；復(fù)方中、高劑量組的TG水平降低、SOD活性提高，復(fù)方高劑量組的HDL-C水平提高，復(fù)方低、中劑量組的LDL-C水平降低(P<0.05)。各劑量復(fù)方滸苔多糖的TC、TG、HDL-C水平、GSH-Px活性及高劑量復(fù)方滸苔多糖的SOD活性與單一滸苔多糖比較差異無顯著性意義(P>0.05)。 結(jié)論 復(fù)方滸苔多糖與單一滸苔多糖具有相似的降血脂及抗脂質(zhì)過氧化作用效果。

復(fù)方滸苔多糖；降血脂；抗脂質(zhì)過氧化

滸苔(Enteromorpha，EP)為綠藻門石莼目石莼科滸苔屬的藻類植物，其作為潮間帶灘涂中的天然野生綠藻，自然繁殖能力強(qiáng)且產(chǎn)量巨大，具備很高的開發(fā)和利用價(jià)值。多糖為滸苔的主要活性成分，目前已有研究表明滸苔多糖具有降血脂、抗脂質(zhì)過氧化等功效[1-2]，但均僅限于單一滸苔多糖的研究，還未見滸苔多糖聯(lián)合其他降血脂物質(zhì)發(fā)揮降血脂及抗脂質(zhì)過氧化作用的相關(guān)報(bào)道。

另有研究表明，山楂[3-5]、荷葉[6-7]、茶葉[8-11]等均含有降血脂及抗氧化作用的活性成分，將這些原料與滸苔多糖配制成復(fù)方滸苔多糖，有望能減少滸苔多糖用量、降低原料成本，同時(shí)有可能在降血脂及抗脂質(zhì)過氧化方面發(fā)揮多靶點(diǎn)、多成分協(xié)同的作用。本文擬研究復(fù)方滸苔多糖(滸苔多糖配合山楂提取物、荷葉提取物和茶多酚)的降血脂及抗脂質(zhì)過氧化作用，為開發(fā)滸苔多糖保健品提供參考。

1 材料和方法

1.1 材 料

42只雄性清潔級(jí)成年SD大鼠，體重230～300 g(上海斯萊克動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心)，衛(wèi)生許可證號(hào)：SCXK(2003-0003)；基礎(chǔ)飼料(參照GB149243-2001配制)；高脂飼料：79%基礎(chǔ)飼料，10%豬油，10%蛋黃粉，1%膽固醇[12]。

復(fù)方滸苔多糖溶液由25%滸苔多糖、25%山楂提取物、25%荷葉提取物及25%茶多酚配制而成。

滸苔多糖：研究室采用水提醇沉法提取制備，將滸苔粉與蒸餾水按1∶60的料液比于80 ℃下提取6 h得到滸苔提取液，以5 000 r/min離心10 min，棄去不溶物，取上清液濃縮至固形物為6%，再按料液比1∶4加無水乙醇靜置過夜后取沉淀冷凍干燥，得到滸苔多糖粗品，其中多糖含量為56.12%。山楂提取物、荷葉提取物、茶多酚(西安斯諾特生物技術(shù)有限公司)、膽固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白膽固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白膽固醇(LDL-C)、超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的測(cè)定試劑盒(南京建成生物工程研究所)。

1.2 儀 器

UV-7220分光光度計(jì)(上海分析儀器總廠)；日立全自動(dòng)生化分析儀；MP200A電子天平(上海精密科學(xué)儀器有限公司)；JY92-II型超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)(寧波新芝科器研究所)；TDL-5-A系列離心機(jī)；DK-RD型電熱恒溫水槽；Z232K型離心機(jī)；FD-2A冷凍干燥機(jī)(北京博醫(yī)康實(shí)驗(yàn)儀器有限公司)；RE-2000旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)器(北京辰泰克儀器技術(shù)有限公司)；16號(hào)灌胃針。

1.3 方 法

1.3.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組：清潔級(jí)成年SD大鼠，以基礎(chǔ)飼料適應(yīng)性喂養(yǎng)1周后，剪尾采血,測(cè)定大鼠血清TC、TG、HDL-C、LDL-C水平，根據(jù)TC水平將42只大鼠隨機(jī)分為6組：空白組、高脂模型組、滸苔多糖組、復(fù)方滸苔多糖低劑量組(復(fù)方低劑量組)、復(fù)方滸苔多糖中劑量組(復(fù)方中劑量組)和復(fù)方滸苔多糖高劑量組(復(fù)方高劑量組)，每組7只，并經(jīng)檢驗(yàn)各組間大鼠的體重、TG、HDL-C、LDL-C水平差異均沒有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。

1.3.2 造模：分組后，空白組喂食基礎(chǔ)飼料，高脂模型組、滸苔多糖組、復(fù)方低劑量組、復(fù)方中劑量組、復(fù)方高劑量組喂食高脂飼料?？瞻捉M不做灌胃處理；高脂模型組給予蒸餾水灌胃；滸苔多糖組給予滸苔多糖 0.15 g/kg·bw灌胃；復(fù)方低、中、高劑量組分別給予復(fù)方滸苔多糖溶液0.10 g/kg·bw(含滸苔多糖0.025 g)、0.20 g/kg·bw(含滸苔多糖0.05 g)、0.60 g/kg·bw(含滸苔多糖0.15 g)灌胃；每天灌胃1次，連續(xù)45 d，灌胃期間各組大鼠均自由攝食和飲水。

1.3.3 觀察指標(biāo)及測(cè)定：末次灌胃后，各組大鼠空腹16 h，眼球取血。血液標(biāo)本經(jīng)離心機(jī)3 000 r/min離心20 min，制備成血清，放置于4 ℃冰箱保存。測(cè)定血清中TC、TG、HDL-C、LDL-C含量及SOD、GSH-Px活性。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行相關(guān)分析，計(jì)量資料先經(jīng)正態(tài)分布和方差齊性檢驗(yàn)，方差齊且服從正態(tài)分布的組間差異采用LSD-t檢驗(yàn)，方差不齊采用非參數(shù)檢查。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 復(fù)方滸苔多糖對(duì)大鼠血脂水平的影響

本實(shí)驗(yàn)利用高脂飼料喂養(yǎng)大鼠建立高脂血癥大鼠模型，由表1可知，喂養(yǎng)45天后，與空白對(duì)照組相比，高脂模型組的TC、TG、LDL-C水平均有明顯升高，HDL-C水平降低，差異均有顯著性意義(P<0.05)。與高脂模型組比較，復(fù)方各劑量組的TC水平下降，復(fù)方中、高劑量組的TG水平降低，復(fù)方高劑量組的HDL-C水平提高，復(fù)方低、中劑量組的LDL-C水平降低，差異均有顯著性意義(P<0.05)；滸苔多糖組的TC、TG、LDL-C水平較低，差異均有顯著性意義(P<0.05)。與滸苔多糖組比較，除LDL-C水平外，復(fù)方各劑量組的TC、TG、HDL-C水平差異均無顯著性意義(P>0.05)。見表1。

表1 各組實(shí)驗(yàn)大鼠血清TC、TG、HDL-C和LDL-C水平比較Tab 1 The contrast of TC,TG,HDL-C and LDL-C content in the serum of experimental rats in each group

表1 各組實(shí)驗(yàn)大鼠血清TC、TG、HDL-C和LDL-C水平比較Tab 1 The contrast of TC,TG,HDL-C and LDL-C content in the serum of experimental rats in each group

1)與高脂模型組相比，P<0.05；2)與滸苔多糖組比較，P<0.05

組別TCTGHDL-CLDL-C空白組1.97±0.281)0.48±0.111)1.72±0.221)0.17±0.031)2)高脂模型組2.77±0.432)0.82±0.162)1.22±0.180.51±0.092)滸苔多糖組2.02±0.261)0.57±0.191)1.38±0.170.39±0.081)復(fù)方低劑量組2.01±0.261)0.74±0.231.32±0.100.40±0.091)復(fù)方中劑量組1.82±0.261)0.62±0.151)1.37±0.210.29±0.051)2)復(fù)方高劑量組2.32±0.321)0.53±0.171)1.48±0.181)0.43±0.11

2.2 復(fù)方滸苔多糖對(duì)大鼠血清抗脂質(zhì)過氧化作用的影響

與空白對(duì)照組相比，高脂模型組的SOD、GSH-Px活性較低，差異有顯著性意義(P<0.05)。與高脂模型組比較，復(fù)方中、高劑量組及滸苔多糖組的SOD活性較高，復(fù)方各劑量組及滸苔多糖組的GSH-Px活性較高，差異均有顯著性意義(P<0.05)。復(fù)方高劑量組的SOD活性與滸苔多糖組比較，差異無顯著性意義(P>0.05)。見表2。

表2 各組實(shí)驗(yàn)大鼠血清SOD、GSH-Px活性比較Tab 2 The contrast of SOD、GSH-Px activity in the serum of experimental rats in each group

3 討 論

血清TC、TG、LDL-C水平升高，HDL-C水平降低是高脂血癥的主要特征。此外，高脂血癥會(huì)導(dǎo)致機(jī)體氧自由基產(chǎn)生增加，細(xì)胞自由基清除酶活力下降，機(jī)體的脂質(zhì)過氧化增加，而高水平的脂質(zhì)過氧化與動(dòng)脈粥樣硬化等心腦血管疾病的發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)[13-14]。GSH-Px和SOD是體內(nèi)重要的抗脂質(zhì)過氧化酶，二者活力的高低均間接反映了機(jī)體清除自由基、抗脂質(zhì)過氧化的能力[15]。本實(shí)驗(yàn)高脂模型組大鼠的TC、TG、LDL-C水平與空白對(duì)照組相比均有明顯升高，SOD、GSH-Px活性均較低，表明高脂模型建立成功，且經(jīng)過45 d的高脂飼料喂食可促使實(shí)驗(yàn)大鼠發(fā)生脂質(zhì)過氧化。

本實(shí)驗(yàn)研究的復(fù)方滸苔多糖是以一定量滸苔多糖配合山楂提取物、荷葉提取物及茶多酚組成，這幾種成分均有調(diào)節(jié)血脂的作用[16-21]。復(fù)方滸苔多糖對(duì)大鼠血脂水平的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，復(fù)方滸苔多糖能降低高脂血癥大鼠血清的TC、TG、LDL-C水平，提高HDL-C水平；根據(jù)輔助降血脂功能結(jié)果的判定，在血清TC、TG、HDL-C三項(xiàng)指標(biāo)檢測(cè)中，血清的TC、TG兩項(xiàng)指標(biāo)陽性，可判定受試物輔助降血脂功能動(dòng)物試驗(yàn)結(jié)果陽性，因此復(fù)方滸苔多糖具有降血脂的作用。復(fù)方滸苔多糖對(duì)大鼠血清抗脂質(zhì)過氧化作用的影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，復(fù)方滸苔多糖能提高脂質(zhì)過氧化大鼠血清的SOD和GSH-Px活性，證明復(fù)方滸苔多糖具有抗脂質(zhì)過氧化的作用。

本研究結(jié)果提示，復(fù)方滸苔多糖與單一滸苔多糖的降血脂及抗脂質(zhì)過氧化作用無明顯差異。然而從保健品開發(fā)角度考慮，滸苔多糖價(jià)格較昂貴，是山楂提取物、荷葉提取物及茶多酚的數(shù)十倍，若開發(fā)復(fù)方滸苔多糖產(chǎn)品，可降低滸苔多糖用量而達(dá)到相當(dāng)?shù)慕笛翱怪|(zhì)過氧化作用。因此，選用復(fù)方滸苔多糖作為天然降血脂保健品來研發(fā)，可降低保健品的原料成本，提高天然降血脂保健品的經(jīng)濟(jì)效益。另一方面，本實(shí)驗(yàn)的復(fù)方滸苔多糖具有降血脂和抗脂質(zhì)過氧化作用,但作用效果的劑量效應(yīng)并不明顯。因此，在實(shí)際應(yīng)用中要注意劑量選擇。

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2015年《大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》征訂啟事

《大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)》(ISSN 1671-7295 CN 21-1369/R )是大連醫(yī)科大學(xué)主辦的反映多學(xué)科科研及醫(yī)療的理論性學(xué)術(shù)期刊，為“中國(guó)科技論文統(tǒng)計(jì)源期刊”(中國(guó)科技核心期刊)。截止2013年，本刊已被八種國(guó)際重要數(shù)據(jù)庫收錄。包括：(1)美國(guó)《 化學(xué)文摘 》(CA, Chemical Abstracts)；(2)荷蘭《醫(yī)學(xué)文摘》(EM，Excepta Media)；(3)波蘭《哥白尼索引》(IC, Index of Copurnicus)；(4)美國(guó)《劍橋科學(xué)文摘(自然科學(xué)版)》(CSA Natural Science)；(5)美國(guó)《烏利希期刊指南》(Ulrich PD，Ulrich's Periodicals Directory)；(6)荷蘭《文摘與引文數(shù)據(jù)庫》(Scopus)；(7)英國(guó)《農(nóng)業(yè)與生物科學(xué)研究文摘》(CAB Abstracts，Centre for Agriculture and Bioscience Abstracts)；(8)英國(guó)《公共健康》(Global Health，Centre for Agriculture and Bioscience Abstracts)。

本刊為雙月刊，104頁，逢雙月20日出版。主要刊載專家述評(píng)、基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)、臨床醫(yī)學(xué)、綜述、病例報(bào)告、醫(yī)學(xué)教育等方面的文章，對(duì)省、市級(jí)以上科研基金項(xiàng)目論文予以優(yōu)先發(fā)表。本刊特點(diǎn)是能集中報(bào)道科研新進(jìn)展和新成果，探討目前醫(yī)學(xué)新技術(shù)和新方法，為醫(yī)學(xué)高校教師及臨床醫(yī)生進(jìn)行醫(yī)學(xué)研究提供參考和拓寬思路。文章資料翔實(shí)，切合實(shí)際，可讀性強(qiáng)，彩色印刷，裝幀美觀。

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Effects of compound Enteromorpha's polysaccharide on lowering blood lipid and anti-lipid peroxidation

CHEN Jie, LIN Wen-ting

(CollegeofPublicHealth,FujianMedicalUniversity,Fujian350108,China)

Objective To study the effect of compound Enteromorpha's polysaccharide on lowering blood lipid and anti-lipid peroxidation. Methods According to Tc content,42 rats were randomly divided into control, hyperlipemia model,Enteromorpha's polysaccharide,compound Enteromorpha's polysaccharide(low,middle and high doses) groups.Intervening in rats of Enteromorpha's polysaccharide group or compound Enteromorpha's polysaccharide groups through intragastric administration of Enteromorpha's polysaccharide or all doses of compound Enteromorpha's polysaccharide for forty-five days, TC, TG, HDL-C,LDL-C content and SOD, GSH-Px activity in the serum were measured. Results In contrast to the hyperlipemia model，TC content of all doses of compound Enteromorpha's polysaccharide decreased but GSH-Px activity improved; TG of middle and high doses decreased while SOD activity improved; HDL-C content of high dose improved and LDL-C content of low and middle doses decreased (P<0.05). TC,TG,HDL-C content and GSH-Px activity of all doses of compound Enteromorpha's polysaccharide in rats' serum had no statistical differences in contrast to single Enteromorpha's polysaccharide, also was SOD activity of high dose (P>0.05). Conclusion Compound Enteromorpha's polysaccharide shows the similar effect of lowering blood lipid and anti-lipid peroxidation to single Enteromorpha's polysaccharide.

compound Enteromorpha's polysaccharide；lowering blood lipid；anti-lipid peroxidation

論 著

10.11724/jdmu.2015.01.02

國(guó)家海洋局海洋公益性行業(yè)科研專項(xiàng)(201205022-5)

陳 婕(1987-)，女，福建福州人，助教，碩士。E-mail:jie312399828@163.com

林文庭，教授。E-mail:lwt201@163.com

R285.5

A

1671-7295(2015)01-0009-04

陳婕，林文庭. 復(fù)方滸苔多糖降血脂及抗脂質(zhì)過氧化作用研究[J].大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2015,37(1)：9-12.

2014-09-03；

2014-10-30)