張海寧，尹園，柳玉梅，張維文

（廣州醫(yī)科大學(xué) 藥理教研室，廣東 廣州 511436）

托珠單抗對心衰大鼠輔助性T細胞17介導(dǎo)的心肌炎癥反應(yīng)的影響*

張海寧，尹園，柳玉梅，張維文

（廣州醫(yī)科大學(xué) 藥理教研室，廣東 廣州 511436）

目的探討托珠單抗對心衰大鼠輔助性T細胞17（Th17）介導(dǎo)的心肌炎癥反應(yīng)的影響及對心功能的保護作用。方法利用冠狀動脈左前降支結(jié)扎法制備心衰模型，于術(shù)后第2天腹腔注射5 mg/kg托珠單抗，4周注射1次，連續(xù)注射3次。實驗結(jié)束后，左心室插管檢測大鼠左心室血流動力學(xué)變化；酶聯(lián)免疫吸附（ELISA）法測定心肌或脾臟組織中腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、白介素-17（IL-17）、白介素-1β（IL-1β）、白介素-6（IL-6）及白介素-23（IL-23）水平；流式細胞儀檢測脾臟Th17細胞比例；實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（RT-qPCR）檢測脾臟維A酸相關(guān)孤兒受體γ t（RORγ t）及維A酸相關(guān)孤兒受體α（RORα）mRNA的表達水平；Western blot檢測核轉(zhuǎn)錄因子-κB（NF-κB）p65核蛋白表達水平。結(jié)果托珠單抗治療降低心衰大鼠死亡率及心臟體重比（HW/BW）比值，改善心衰大鼠血流動力學(xué)參數(shù)，包括降低平均血壓（MBP）及左心室舒張末期壓（LVEDP），升高左心室舒張壓最大上升和下降速率（±dp/dt）及左心室收縮壓（LVSP）。模型組大鼠脾組織IL-23、IL-17蛋白表達水平、Th17細胞頻率、Th17細胞活化的特征性轉(zhuǎn)錄因子RORγ t及RORαmRNA表達水平較對照組明顯升高，并且心肌IL-1β、IL-6、TNF-α含量及NF-κB p65表達水平亦顯著高于對照組。與模型組比較，托珠單抗治療使上述指標明顯降低。結(jié)論托珠單抗可能通過抑制Th17細胞介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)發(fā)揮心肌保護作用。

心衰；炎癥；托珠單抗；NF-κB

慢性炎癥反應(yīng)是心衰發(fā)展過程中的主要病理特征，在心衰的發(fā)病機制中可能起關(guān)鍵作用[1-2]。新近研究表明，以分泌白介素 -17（Interleukin-17，IL-17）為主要特征的輔助性T細胞17（T helper cells 17，Th17）過度活化在促進炎癥反應(yīng)并介導(dǎo)炎癥損傷中發(fā)揮重要作用。研究顯示，IL-17在患者血清和靶組織中高表達，與慢性感染、自身免疫疾病、移植排斥反應(yīng)及腫瘤等疾病的發(fā)生、發(fā)展密切相關(guān)[3-4]。近年來對心衰的研究顯示，慢性心力衰竭患者存在Th17細胞功能亢進及IL-17高表達[5-7]，提示Th17細胞可能介導(dǎo)心衰發(fā)展過程中的慢性炎癥反應(yīng)。

托珠單抗（Tocilizumab）是近年美國食品藥品管理局批準的首個治療中至重度活動性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎（rheumatoid arthritis，RA）的人源化白介素 -6（Interleukin-6，IL-6）受體的單克隆抗體類藥物。其臨床及動物實驗研究表明，托珠單抗參與下調(diào)IL-17介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)，對緩解RA患者的全身炎癥狀態(tài)表現(xiàn)出良好的療效[8-12]。目前，托珠單抗是否可以改善心衰患者的體內(nèi)炎癥狀態(tài)，延緩心衰的發(fā)展未見報道。本文利用冠狀動脈左前降支（left anterior descending,LAD）結(jié)扎法建立慢性心衰大鼠模型，觀察長期接受托珠單抗治療對大鼠心衰發(fā)展過程中炎癥反應(yīng)及心功能的改善作用，并初步探討其可能的機制。

1 材料與方法

1.1 實驗動物和主要試劑

無特定病原體（specefic pathogen free，SPF）級Sprague-Dawley（SD）大鼠，體重 250g 左右，雄性，由廣東省實驗動物中心提供，批號：SCXK（粵）2014-0005，200 mg/10 ml托珠單抗購自美國羅氏制藥公司，Trizol試劑、First Strand cDNA Synthesis Kit購自日本TaKaRa公司，異硫氰酸熒光素（fluorescein isothiocyanate，F(xiàn)ITC）標記的抗鼠CD4單克隆抗體、藻膽素（Phycoerythrin，PE）標記的IL-17單克隆抗體、同型對照大鼠IgG1κ抗體、破膜劑由美國BD Bioscience公司提供。二喹啉甲酸（bicinchoninic acid，BCA）蛋白定量試劑盒購自美國Pierce公司。腫瘤壞死因子 -α（tumor necrosis factor-a，TNF-α）試劑盒購自美國 R&D公司。IL-17、IL-6、IL-23、IL-1β試劑盒購自美國eBioScience公司。Lamin B1、P65抗體購自美國Cell Signaling Technology公司，聚合酶鏈反應(yīng)（polymerase chain reaction，PCR）引物由美國Invitrogen公司合成。

1.2 方法

1.2.1 LAD冠狀動脈結(jié)扎制備慢性心衰動物模型及藥物干預(yù) SD大鼠戊巴比妥鈉麻醉后，仰臥固定于手術(shù)臺上，經(jīng)左前胸廓旁第4、5肋間開胸，暴露心臟，在冠脈下穿6號絲線結(jié)扎LAD近端，關(guān)胸并擠出胸腔空氣，心電圖檢查出現(xiàn)ST段明顯弓背狀抬高或壓低，即初步認為心梗模型已建立。實驗時設(shè)立假手術(shù)組作為對照組，假手術(shù)組大鼠行開胸，但不結(jié)扎冠狀動脈左前降支。給藥組于術(shù)后第2天腹腔注射5 mg/kg托珠單抗，4周注射1次，連續(xù)注射3次。給藥期間，觀察大鼠的一般情況，記錄各組大鼠死亡數(shù)。于最后一次給藥的第2天，處死大鼠，摘取心臟，稱心臟重量（heart weight，HW），計算心臟體重比（HW/BW），并提取心肌組織蛋白。摘取脾臟，部分用于提取蛋白及總RNA，其余用于分離脾細胞進行流式檢測。

1.2.2 大鼠左心室血流動力學(xué)測定 大鼠戊巴比妥麻醉后，仰臥固定，經(jīng)右頸總動脈切口插入注滿0.1%肝素并連接壓力換能器的PE50導(dǎo)管，導(dǎo)管與PowerLab相連，邊插入邊觀察屏幕上的波形，當(dāng)波幅明顯增大且導(dǎo)管劇烈抖動時，表明導(dǎo)管已進入左心室。左心室血流動力學(xué)參數(shù)由PowerLab 8通道電生理記錄儀自動采集，分析獲得。

1.2.3 酶聯(lián)免疫吸附（enzyme-linked immunosorbent assay，ELISA）法測定細胞因子濃度 冰浴下制備心肌及脾臟組織勻漿，按照ELISA試劑盒說明書測定 TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-17 及 IL-23 水平，結(jié)果以pg/mg表示。

1.2.4 流式細胞儀檢測Th17細胞頻率 藥物干預(yù)結(jié)束的第2天殺死大鼠，取出脾臟，制備脾細胞懸液，置于紅細胞裂解液（0.83%NH4Cl；0.01 mmol Tris-HCl，pH=7.2），清洗重懸細胞，進行 APC-anti-CD3，F(xiàn)ITC-anti-CD4免疫染色；破膜，進行PE-anti-IL-17（1∶50）細胞內(nèi)染色，同型對照管加PE-anti-IgG1κ作為同型陰性對照，用流式細胞儀（FACSDIVA；Becton Dickinson Biosciences，San Jose，CA）檢測 CD4+T細胞中Th17細胞頻率。

1.2.5 實時熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（real timequantitative polymerase chain reaction，RT-qPCR）利用Trizol試劑提取大鼠脾臟總RNA，用逆轉(zhuǎn)錄試劑盒合成cDNA。取逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物進行PCR擴增，反應(yīng)條件：94℃預(yù)變性 3 min，94℃變性 45 s，55℃退火30 s，72℃延伸60 s，共35個循環(huán)。溶解曲線分析表明，PCR反應(yīng)產(chǎn)物為單獨的雙鏈DNA。用ΔΔCt值法，以β-actin表達為內(nèi)參定量維A酸相關(guān)孤兒受體γt（retinoid-related or-phan nuclear receptorγt，RORγt）及維A酸相關(guān)孤兒受體α（retinoid-related or-phan nuclear receptor α，ROR α）mRNA 的表達水平。

1.2.6 蛋白電泳 用放射免疫沉淀（radio-immunoprecipitation assay，RIPA）裂解液提取心肌組織總蛋白，經(jīng)BCA蛋白定量后，取等量蛋白質(zhì)樣品進行十二烷基硫酸鈉-聚丙烯酰胺（sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gelelectrophoresis，SDS-PAGE）凝膠電泳，將電泳分離的蛋白轉(zhuǎn)移到聚偏二氟乙烯（polyvinylidene fluoride，PVDF）膜上，室溫下用含5%脫脂奶粉的三羥甲基氨基甲烷緩沖鹽溶液（tris buffered saline and tween 20，TBST） 封閉 PVDF 膜1 h，加入一抗（1∶1 000）4℃孵育過夜。TBST洗膜，加入相應(yīng)的二抗室溫孵育1 h，TBST洗膜后用化學(xué)發(fā)光法檢測蛋白水平，用凝膠成像系統(tǒng)掃描分析結(jié)果。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SSPS 18.0統(tǒng)計軟件進行數(shù)據(jù)分析，計量資料用均數(shù)±標準差（±s）表示，兩組比較用t檢驗，多組比較用方差分析（one-way，ANVOA），方差齊時，兩兩比較用LSD-t法，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 托珠單抗對心衰大鼠一般情況、死亡率及HW/BW的影響

直至實驗結(jié)束，對照組大鼠精神狀態(tài)、飲食、活動正常。與對照組比較，模型組大鼠從8周開始陸續(xù)出現(xiàn)少動、松毛、進食減少、端坐呼吸及四肢皮下水腫等癥狀，托珠單抗組大鼠上述癥狀明顯減輕。實驗過程中，對照組大鼠無死亡。托珠單抗組死亡率、HW/BW較模型組明顯降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.021和0.038）。見表1。

2.2 托珠單抗對心衰大鼠心功能的影響

與對照組比較，模型組大鼠心率改變不明顯（P=0.987），而 MBP、LVEDP 升高（P=0.007和 0.002），±dp/dt、LVSP降低（P=0.023、0.037 和 0.025）。托珠單抗組與模型組比較，MBP、LVEDP降低（P=0.038和 0.006），LVSP、±dp/dt升高（P=0.041、0.033 和0.043）。見表 2。

2.3 托珠單抗對心衰大鼠脾臟IL-17、IL-6、IL-23水平及Th17細胞比率的影響

表2 各組左室血流動力學(xué)參數(shù)比較 （±s）

表2 各組左室血流動力學(xué)參數(shù)比較 （±s）

注：1）與對照組比較，P＜0.01；2）與對照組比較，P＜0.05；3）與模型組比較，P＜0.05；4）與模型組比較，P＜0.01

組別心率/（次/min）MBP/（mmHg）LVSP/（mmHg）LVEDP/（mmHg）+dp/dt/（mmHg/s）-dp/dt/（mmHg/s）對照組 372.0±25.1 118.2±5.7 132.1±6.2 2.8±5.4 5908.0±854.6 -5362.1±998.7模型組 392.0±32.3 154.7±7.21） 78.4±3.82） 17.7±3.91） 3769.4±823.52） -3173.7±856.92）托珠單抗組 381.0±28.4 128.5±4.73） 126.6±3.93） 5.9±4.54） 4802.6±711.23） -4687.5±423.13）

為觀察心衰過程中是否存在Th17細胞的免疫激活，本實驗首先檢測體內(nèi)最主要的免疫器官脾臟中Th17細胞激活相關(guān)細胞因子及轉(zhuǎn)錄因子的表達。模型組大鼠脾臟IL-17、IL-6、IL-23水平及Th17細胞頻率較對照組明顯增加，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.005、0.006、0.017 和 0.035）（見圖 1 和表 3），脾臟RORγ t和RORα mRNA表達水平也明顯上調(diào)，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.032和0.003）（見圖2），提示心衰發(fā)展過程中存在Th17細胞活化。托珠單抗組與模型組比較，可顯著降低IL-17、IL-6、IL-23蛋白水平，減少脾臟Th17細胞頻率及下調(diào)ROR γ t和 RORα mRNA 表達 （P=0.017、0.013、0.021、0.042、0.038 和 0.022）（見圖 2 和表 3）。

圖1 各組脾臟Th17細胞比例

2.4 托珠單抗對心衰大鼠心肌炎癥細胞因子表達的影響

表3 各組脾臟IL-23、IL-6、IL-17水平及Th17細胞頻率比較 （±s）

表3 各組脾臟IL-23、IL-6、IL-17水平及Th17細胞頻率比較 （±s）

注：1）與對照組比較，P＜0.05；2）與對照組比較，P＜0.01；3）與模型組比較，P＜0.05

組別例數(shù)IL-23/（pg/mg）IL-17/（pg/mg）IL-6/（pg/mg）Th17細胞頻率/%對照組 12 27.33±0.39 32.89±8.31 40.01±9.35 0.90±0.18模型組 7 63.52±1.081) 87.90±11.342） 337.23±24.542） 3.89±0.211)托珠單抗組 10 47.65±2.353） 61.22±8.233） 135.78±25.113） 1.96±0.253）

圖2 各組脾臟ROR γ t和RORα mRNA表達

表4 各組心肌IL-1β、IL-6、IL-17、TNF-α含量比較 （±s）

表4 各組心肌IL-1β、IL-6、IL-17、TNF-α含量比較 （±s）

注：1）與對照組比較，P＜0.01；2）與對照組比較，P＜0.05；3）與模型組比較，P＜0.01；4）與模型組比較，P＜0.05

組別例數(shù)IL-6/（pg/mg）IL-1β/（pg/mg）IL-17/（pg/mg）TNF-α/（pg/mg）對照組 12 37.33±1.37 21.14±3.54 22.45±2.98 18.23±1.56模型組 7 263.52±35.661） 167.54±10.391） 52.07±9.872） 67.32±10.411）托珠單抗組 10 107.44±11.353） 98.64±10.454） 29.43±4.634） 38.23±8.574）

ELISA檢測心肌組織炎癥因子水平。模型組大鼠心肌組織 IL-17、TNF-α、IL-1β、IL-6水平明顯高于對照組大鼠，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.023、0.004、0.002和0.002）。而給予托珠單抗治療后心肌組織IL-17、TNF-α、IL-1β、IL-6 水平較模型組降低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.031、0.019、0.022 和0.007）。見表4。

2.5 托珠單抗抑制心衰過程中核轉(zhuǎn)錄因子-κB的活化

Western blot檢測結(jié)果顯示，模型組大鼠心肌組織核轉(zhuǎn)錄因子-κB（nuclear transcription factor-κB，NF-κB）p65核蛋白表達水平明顯增加（P=0.028）。而給予托珠單抗治療后，心肌組織NF-κB p65核蛋白表達水平顯著下調(diào)（P=0.033）。見圖3。

圖3 各組心肌細胞NF-κB p65核蛋白表達

3 討論

1990年LEVINE等[13]發(fā)現(xiàn)慢性心衰患者循環(huán)中TNF-α水平明顯升高。隨后人們注意到包括TNF-α、IL-6、IL-1β等在內(nèi)的大量前炎癥細胞因子在外周血及心肌局部大量活化介導(dǎo)的慢性炎癥反應(yīng)是心衰發(fā)病進程中的主要病理學(xué)特征，并在心衰的發(fā)病機制中起關(guān)鍵作用[1-2]，因此提出抗炎和免疫調(diào)節(jié)治療有望成為延緩心衰的新策略。托珠單抗是首個被美國食品藥品管理局批準的IL-6受體的單克隆抗體。目前，其主要用于中至重度活動性類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎的藥物治療，通過緩解RA患者全身炎癥狀態(tài)，可改善患者疲乏、疼痛及晨僵癥狀，延緩關(guān)節(jié)損傷，進而改善軀體功能。本實驗觀察托珠單抗對冠狀動脈結(jié)扎誘導(dǎo)的心衰的治療作用，結(jié)果顯示，托珠單抗組大鼠死亡率、HW/BW較模型組明顯降低，左室血流動力學(xué)參數(shù)如LVEDP，±dp/dt等有顯著改善，表明托珠單抗對心衰大鼠產(chǎn)生良好的保護作用。

免疫系統(tǒng)激活是多種前炎癥細胞因子產(chǎn)生的主要機制。既往研究認為，過度活化Th1細胞通過分泌 TNF-α、干擾素 γ（interferonγ，IFNγ）、IL-2等致炎因子與介導(dǎo)炎癥反應(yīng)有關(guān)。近年來研究發(fā)現(xiàn)，Th17細胞在防御胞外細菌感染、介導(dǎo)慢性炎癥以及自身免疫疾病中發(fā)揮更加重要的作用[3-4]。Th17細胞主要產(chǎn)生 IL-17A、IL-17F、IL-21和 IL-22，其中IL-17是主要的炎癥介導(dǎo)因子，通過與其受體IL-17R結(jié)合，促進炎癥反應(yīng)，參與多種疾病的病理過程。新近LI等[6]報道，心衰患者循環(huán)血中IL-17表達量及Th17細胞頻率明顯增加，并與心肌損害程度密切相關(guān)，提示Th17細胞參與心衰的發(fā)生、發(fā)展。本研究結(jié)果顯示，心衰組大鼠體內(nèi)最主要的免疫器官脾臟中IL-17表達水平以及Th17細胞頻率顯著增高，Th17細胞活化的特征性轉(zhuǎn)錄因子RORγ t和RORα mRNA表達水平也明顯上調(diào)。同時本研究發(fā)現(xiàn)，維持Th17細胞擴增及功能的最主要的正調(diào)控因子IL-23在脾臟的分泌亦明顯增加，表明心衰發(fā)展中存在Th17細胞的免疫激活，也進一步證實心衰的發(fā)生、發(fā)展與Th17細胞過度活化密切相關(guān)。

IL-6是活化的T細胞和成纖維細胞產(chǎn)生的前炎癥細胞因子，參與廣泛的生物學(xué)功能，包括急性期炎癥反應(yīng)、干擾鐵的重吸收和再利用、誘導(dǎo)血管內(nèi)皮生長因子表達等[14]。新近研究表明，通過作用于其受體，IL-6還參與調(diào)控Th17細胞的活化過程。有研究顯示，IL-6在介導(dǎo)類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎患者體內(nèi)Th17細胞活化過程中起關(guān)鍵作用，而給予抗IL-6受體的抗體明顯抑制由6-磷酸葡萄糖異構(gòu)酶及膠原誘導(dǎo)的關(guān)節(jié)炎動物體內(nèi)Th17細胞及IL-17的產(chǎn)生[10-11]。本研究發(fā)現(xiàn)，心衰組大鼠脾臟中IL-6水平顯著升高，Th17細胞明顯活化，給予IL-6受體的抗體托珠單抗干預(yù)處理后，Th17細胞活化相關(guān)指標較模型組明顯降低。以上結(jié)果提示，抑制Th17細胞活化亦可能是托珠單抗抑制心衰發(fā)生、發(fā)展的重要機制之一。

研究顯示，Th17細胞介導(dǎo)的炎癥反應(yīng)與活化前炎癥轉(zhuǎn)錄因子誘導(dǎo)多種炎癥介質(zhì)釋放密切相關(guān)。NF-κB是普遍存在于細胞漿中的一種快反應(yīng)轉(zhuǎn)錄因子，在介導(dǎo)細胞增殖與分化、腫瘤、炎癥和免疫反應(yīng)等多種病理生理過程中發(fā)揮重要作用。NF-κB由p50和RelA（p65）組成，非活性狀態(tài)時與抑制性蛋白IκB結(jié)合存在于胞漿中，而當(dāng)NF-κB激活時，IκB被降解，使NF-κB p65亞單位釋放，轉(zhuǎn)入核內(nèi)與靶基因的κB基序結(jié)合，從而啟動靶基因的表達。眾多研究表明，NF-κB介導(dǎo)的細胞因子、趨化因子、黏附分子等多種炎性蛋白的表達是引起哮喘、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、腸炎等許多慢性炎癥性疾病的關(guān)鍵因素[15-16]。本研究結(jié)果顯示，心衰模型組大鼠心肌組織IL-17表達水平明顯升高，核NF-κB明顯活化，同時心肌組織炎癥因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平亦明顯高于對照組，而經(jīng)托珠單抗干預(yù)治療后，胞核NF-κB p65表達水平及心肌勻漿液中IL-17、IL-1β、IL-6、TNF-α含量較模型組降低，提示托珠單抗可能通過拮抗IL-17的產(chǎn)生阻礙NF-κB活化及NF-κB活化介導(dǎo)的IL-1β、IL-6、TNF-α釋放，從而抑制由Th17細胞過度活化導(dǎo)致的炎癥反應(yīng)及炎癥損傷，最終延緩心衰的發(fā)展，然而其具體機制尚需在后續(xù)的研究中深入探討。

綜上所述，本研究表明，托珠單抗作為一個新型的抗炎藥物，長期應(yīng)用可緩解心衰大鼠心肌炎癥反應(yīng)，改善心功能并延緩心衰的發(fā)展，其機制可能與抑制Th17細胞過度活化介導(dǎo)的NF-κB轉(zhuǎn)錄活性的下調(diào)有關(guān)。本研究結(jié)果將為托珠單抗在心血管相關(guān)疾病及心衰中的應(yīng)用提供實驗依據(jù)。

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（申海菊 編輯）

Effects of Tocilizumab on myocardial inflammation mediated by Th17 cells in rats with chronic heart failure*

Hai-ning ZHANG,Yuan YIN,Yu-mei LIU,Wei-wen ZHANG
(Department of Pharmacology,Guangzhou Medical University,Guangzhou,Guangdong 511436,P.R.China)

【Objectives】To observe the effect of Tocilizumab on the myocardial inflammation mediated by T helper cells 17 (Th17)in rats with chronic heart failure,and to explore the possible protective action of Tocilizumab on heart function.【Methods】Male Sprague-Dawley (SD)rats were subjected to the permanent ligation of the left anterior descending coronary artery (LAD)to induce chronic heart failure.One day later,the rats in the Tocilizumab group

an intraperitoneal injection of 5 mg/kg of Tocilizumab once every four weeks for 12 weeks.Cardiac function parameters of the rats were measured by left ventricular catheterization at the end of experiments.The levels of proinflammatory cytokines such as tumor necrosis factor α(TNF-α),interleukin 1β (IL-1β),interleukin 6(IL-6),interleukin 17(IL-17)and interleukin 23(IL-23)in the heart and the spleen were measured by ELISA.The mRNA expressions of retinoid related orphan receptor t(ROR t)and retinoid related orphan receptor α (ROR α)were detected by real-time quantitative PCR.Th17 cell frequency was analyzed by flow cytometry and the expression level of nuclear factor-κB (NF-κB)p65 in the cardiomyocyte nuclei was examined using Western blot.【Results】Tocilizumab treatment significantly decreased the rat mortality and the heart-to-body weight ratio(HW/BW),and ameliorated rat cardiac function,as evidenced by decreasing mean blood pressure(MBP)and left ventricular end-diastolic pressure(LVEDP)and increasing the maximum ascending and descending rates of left ventricular diastolic pressure(±dp/dt)and left ventricular systolic pressure(LVSP).Moreover,the rats in the model group exhibited significantly increased IL-23 and IL-17 expressions,Th17 cell frequency,mRNA levels of RORt and RORα in the rat spleen,as well as increased cardiomyocyte NF-κB p65 expression and myocardial content of IL-1β,IL-6 and TNF-α as compared with those in the control group;but all of them were reduced by Tocilizumab treatment.【Conclusions】Tocilizumab may exert a myocardial protective effect by inhibiting the inflammation mediated by Th17 cells.

chronic heart failure;inflammation;Tocilizumab;nuclear factor-κB

R541.6

A

1005-8982（2015）35-0007-06

2015-02-11

廣州市教育局基金（No：10A179）