馮燕翀 孫文霞

長治醫(yī)學院附屬和平醫(yī)院婦產(chǎn)科，山西長治046000

子宮內(nèi)膜炎是婦科常見病，發(fā)病率逐年上升。子宮內(nèi)膜炎具有臨床表現(xiàn)無特異性、診斷較困難、病情易反復、為導致不孕和流產(chǎn)的重要原因等特點。因其診斷較困難，漏診和誤診在臨床工作中時有發(fā)生，嚴重時將導致不可估計的后果。因此找到切實有效的診斷方法是婦產(chǎn)科醫(yī)生的迫切愿望。

該病診斷的必備條件是在大量梭形的子宮內(nèi)膜間質細胞中辨認出可能含有的漿細胞[1]，但此法對漿細胞的分辨仍較困難。國外有研究表明，CD38、CD138特異的表達在漿細胞胞膜或胞質內(nèi)。為此本研究通過比較HE染色法與免疫組織化學染色聯(lián)合檢測CD38、CD138方法診斷子宮內(nèi)膜炎的差異性，以期找到更有效的診斷方法。

1 資料與方法

1.1 一般資料

200例患者為2013年1月～2013年9月間因子宮異常出血、月經(jīng)失調、不孕癥、反復流產(chǎn)、陰道異常排液等情況在山西長治醫(yī)學院附屬和平醫(yī)院婦科門診就診的患者，考慮可能患有慢性子宮內(nèi)膜炎而需行診斷性刮宮術明確診斷。研究方案經(jīng)長治醫(yī)學院附屬和平醫(yī)院倫理委員會批準。患者已完善必要的輔助檢查，并簽署知情同意書，清醒狀態(tài)下在門診行診斷性刮宮術。

1.2 標本滿意標準及取材結果

組織病理學標本滿意標準為：術者判定組織獲取量可做出組織病理學診斷。200例患者中168例取材滿意。168例患者年齡24～76歲，平均（43.3±4.2）歲，患者年齡及癥狀等差異無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），具有可比性。

1.3 實驗分組

將168名患者的子宮內(nèi)膜組織均分別制成三份標本并分為兩組，一組為采用HE染色法組，另一組為采用免疫組織化學染色組分別兩份標本檢測CD38、CD138。

1.4 診斷標準

（1）臨床表現(xiàn)下腹墜脹，子宮不規(guī)則出血，白帶多，檢查子宮稍大有觸痛，約20%無癥狀。（2）輔助檢查診斷性刮宮：先刮宮頸管，再進宮腔刮取組織送病理檢查。內(nèi)膜中有大量漿細胞及淋巴細胞，即可明確診斷。

1.5 實驗方法

1.5.1 CD38、CD138采用免疫組化兩步法檢測步驟 洗載玻片備用、石蠟切片、脫蠟、抗原修復、加一抗、加二抗、加SABC試劑、加顯色劑（DAB顯色試劑）、蘇木精復染、脫水、封片、顯微鏡下觀察。

1.5.2 HE染色法步驟 將切片脫蠟、依次于蘇木素染液、稀鹽酸酒精、氨水、伊紅染液、75%酒精、90%乙醇、無水酒精、二甲苯中浸入并清洗，再使用中性樹膠封片，鏡下觀察。

1.6 統(tǒng)計學方法

資料采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件分析，采用配對四格表資料的x2檢驗，P＜0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 實驗結果判定標準

CD38、CD138表達陽性鏡下顯示漿細胞的細胞膜出現(xiàn)黃色或棕黃色顆粒視為CD38表達陽性。CD138以細胞膜/胞質出現(xiàn)棕黃色為陽性。圖1～2分別顯示CD38、CD138陽性表達。兩者均陽性方可診斷慢性子宮內(nèi)膜炎。

HE染色在鏡下以子宮內(nèi)膜間質細胞中見到典型的漿細胞視為慢性子宮內(nèi)膜炎確診。見圖3。

圖1 CD38（+）免疫組化染色（×40）

圖2 CD138（+）免疫組化染色（×40）

圖3 HE染色圖（×40）

2.2 兩種方法診斷慢性子宮內(nèi)膜炎陽性率比較

168名患者的子宮內(nèi)膜細胞取材器組所獲標本分兩份。免疫組織化學染色法聯(lián)合檢測CD38、CD138組診斷陽性率（26.19%）與HE染色組診斷陽性率（3.57%）比較，差異有統(tǒng)計學意義（x2=36，P＜0.05），HE組診斷陽性率低于CD38、CD138聯(lián)合組?？梢哉J為CD38、CD138聯(lián)合檢測診斷較HE染色方法更正確率更高。見表1。

表1 兩種方法診斷慢性子宮內(nèi)膜炎陽性率比較

3 討論

子宮內(nèi)膜炎是婦科常見疾病，發(fā)病率國內(nèi)外報道不一，國內(nèi)鄭益紅等[2]報道的子宮內(nèi)膜活檢標本中，慢性子宮內(nèi)膜炎發(fā)病率占3%～11%，國外Ekanem等[3]對140例子宮內(nèi)膜活檢病例進行分析，結果顯示慢性子宮內(nèi)膜炎占16.4%。

子宮內(nèi)膜炎分為急性子宮內(nèi)膜炎和慢性子宮內(nèi)膜炎兩種。急性子宮內(nèi)膜炎通常癥狀比較明顯，進展較快，可蔓延至周圍組織和臟器，甚至可發(fā)展為敗血癥、感染性休克、中毒性休克綜合征等，危及生命。慢性子宮內(nèi)膜炎大多癥狀輕微，全身癥狀不明顯，但病程較長，治療不徹底容易復發(fā)，影響女性生活質量。無論是急性子宮內(nèi)膜炎，還是慢性子宮內(nèi)膜炎，如果治療不及時、不徹底，嚴重時影響子宮肌層，同時還可出現(xiàn)盆腔痛及反復發(fā)作。該病還可導致女性生殖疾病和影響產(chǎn)后子宮恢復。同時一旦形成慢性子宮內(nèi)膜炎對身體危害較大且治療較為困難。

慢性子宮內(nèi)膜炎還與女性生殖疾病密切相關。有研究表明，行體外授精-胚胎移植術反復胚胎著床后失敗、不明原因的不孕不育及不明原因反復流產(chǎn)等均與慢性子宮內(nèi)膜炎有關[4-7]。Sukhikh等[8]發(fā)現(xiàn)存在慢性子宮內(nèi)膜炎時內(nèi)膜發(fā)生的變化將會影響妊娠早期胚胎的發(fā)育。

慢性子宮內(nèi)膜炎發(fā)病率較高，對女性生殖健康的影響較大、范圍較廣，因此，慢性子宮內(nèi)膜炎的診斷及早期發(fā)現(xiàn)和早期治療對防治女性疾病進展和提高女性生活質量有著極其重要的意義，具有一定的臨床研究價值。

慢性子宮內(nèi)膜炎臨床表現(xiàn)為：不規(guī)則陰道出血或月經(jīng)不規(guī)則，有時有輕微下腹痛及白帶增多，不孕癥。其癥狀不具有特異性。該疾病常因宮腔內(nèi)的分泌物通過子宮頸口流出體外，而癥狀不明顯。且本病約有20%無癥狀，易忽略診斷，多數(shù)是由婦科其他疾病如做診斷性刮子宮術時發(fā)現(xiàn)的 。即使有癥狀的CE也可能會被忽略，因為受子宮內(nèi)膜取樣滿意度和病理組織學檢測方法所限。

慢性子宮內(nèi)膜炎確定診斷的可靠方法落腳在診斷性刮宮術聯(lián)合組織內(nèi)膜病理檢查。趙健[9]在子宮內(nèi)膜細胞學診斷系統(tǒng)中指出：慢性子宮內(nèi)膜炎病理改變：在子宮內(nèi)膜細胞之間，有散在淋巴細胞及漿細胞、吞噬細胞、細胞碎片等，子宮內(nèi)膜細胞少見。漿細胞并不是正常子宮內(nèi)膜的組成細胞，因而，漿細胞的出現(xiàn)是慢性子宮內(nèi)膜炎的重要診斷指標[10]，但是，人們對識別子宮內(nèi)膜中的漿細胞還存有一定的難度[11]。而且，常規(guī)的組織染色技術很難檢測子宮內(nèi)膜間質中的漿細胞[12]。

傳統(tǒng)HE法存在對漿細胞分辨困難的情況，如月經(jīng)后期、早期增生的內(nèi)膜、大量有絲分裂的基質細胞、以及呈漿細胞樣的基質細胞。研究表明辨認漿細胞可通過切片的免疫染色法檢測CD38、CD138、免疫球蛋白、VS38。而在1997年，Anthony等[13]用VS38單克隆抗體檢測子宮內(nèi)膜的漿細胞，結果發(fā)現(xiàn)VS38不僅使?jié){細胞著色，而且上皮和基質細胞也呈顆粒狀著色，故而降低了VS38檢測漿細胞的特異性。

目前國內(nèi)外的研究表明，正常漿細胞的主要免疫表型為：CD38、CD138等[14]。有研究顯示漿細胞最特異的指標是CD138[15-16]。CD138的免疫組化適合用于檢測石蠟包埋標本中的子宮內(nèi)膜間質漿細胞，并改善了慢性子宮內(nèi)膜炎的診斷率[17-19]。Kitaya等[17-20]也證實了CD138對子宮內(nèi)膜炎中漿細胞的檢測率較其他方法高，而且準確率也高，在慢性子宮內(nèi)膜炎的診斷中發(fā)揮著必不可少的作用。Bhan[21]在實驗中，對B細胞各個發(fā)育階段進行了分析，發(fā)現(xiàn)漿細胞表面的CD38分子著色很強。1997年，Anthony等[13]使用CD38對慢性子宮內(nèi)膜炎的組織中漿細胞的檢測達100%。綜上所述，可見CD38、CD138均對漿細胞的檢測具有較高特異性。

但鑒于CD38、CD138均在人體內(nèi)表達、分布廣泛，而各自對子宮內(nèi)膜中漿細胞的檢測所具有的高敏感性、特異性無定論，且目前國內(nèi)外對于CD38、CD138均為單項檢測的研究，故本實驗將免疫組織化學染色法聯(lián)合檢測CD38、CD138，并與傳統(tǒng)HE染色法用于辨別漿細胞是否存在的病理結果比較，旨在提高兩者聯(lián)合檢測對慢性子宮內(nèi)膜炎中診斷的特異性，并得出結論：采用免疫組織化學方法聯(lián)合檢測CD38、CD138較傳統(tǒng)HE染色法診斷慢性子宮內(nèi)膜炎價值更高。

本實驗研究對象選擇范圍界定為因癥需行診斷性刮宮術并考慮病因為慢性子宮內(nèi)膜炎，故范圍有限，其結論仍需要大宗臨床資料的研究論證。也為本實驗的不足之處。

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