肖道安

摘要：優(yōu)選肉蓯蓉多糖的脫蛋白工藝，為肉蓯蓉多糖純化提供試驗(yàn)依據(jù)。以脫蛋白率為指標(biāo)，比較 Sevag法、酶法及酶-Sevag聯(lián)合法對肉蓯蓉粗多糖的脫蛋白效果，采用正交試驗(yàn)優(yōu)選最佳工藝。結(jié)果表明，Sevag法優(yōu)于酶法和酶-Sevag聯(lián)合法，Sevag法脫蛋白的最佳工藝為：三氯甲烷與正丁醇的體積配合比4 ∶1，料液體積比1 ∶3，攪拌40 min，脫蛋白4次。在該工藝下平均脫蛋白率為87.11%，RSD為1.34%；平均多糖保留率為83.05%，RSD為154%。試驗(yàn)證明該工藝穩(wěn)定可靠，適用于肉蓯蓉多糖的純化。

關(guān)鍵詞：肉蓯蓉多糖；脫蛋白；Sevag法；酶法；酶-Sevag聯(lián)合法；正交試驗(yàn)

中圖分類號：R284.2 文獻(xiàn)標(biāo)志碼： A 文章編號：1002-1302（2015）07-0314-02

A：V三氯甲烷 ∶V正丁醇B：料液體積比C：攪拌時間（min）D：脫蛋白次數(shù)

13 ∶11 ∶3202

24 ∶11 ∶4303

35 ∶11 ∶5404

2 結(jié)果與分析

2.1 3種脫蛋白方法試驗(yàn)結(jié)果

從表2可知，Sevag法和酶-Sevag聯(lián)合法脫蛋白的效率相對較高，而酶法多糖的保留率相對較高。這可能是因?yàn)槿馍惾囟嗵侵械牡鞍踪|(zhì)以游離型居多，結(jié)合型較少，Sevag法能更加有效地除去游離型蛋白質(zhì)，而酶法主要酶解結(jié)合型蛋白質(zhì)。2個因素綜合考慮，Sevag法更適合于肉蓯蓉多糖的脫蛋白工藝。

2.2 Sevag法正交試驗(yàn)結(jié)果

由表3的極差分析可知，Sevag法各因素對肉蓯蓉多糖脫蛋白的影響順序依次為A>C>D>B，即三氯甲烷與正丁醇的體積比影響最大，其次為攪拌時間、脫蛋白次數(shù)、料液比。Sevag法脫蛋白的最佳工藝為A2B1C3D3，即三氯甲烷與正丁醇的體積比為4 ∶1，料液體積比為1 ∶3，攪拌時間40 min，脫蛋白次數(shù)4次。這主要是因?yàn)殡S著攪拌時間的增加，Sevag試劑與蛋白質(zhì)結(jié)合增多，脫蛋白率提高；脫蛋白次數(shù)的增加固然能提高脫蛋白率，但是多糖損失得也會更多，可能會造成綜合效果不佳。對上述最佳工藝進(jìn)行驗(yàn)證，重復(fù)操作3次，得出該工藝下平均脫蛋白率為87.11%，RSD為1.34%；平均多糖保留率為83.05%，RSD為1.54%。結(jié)果表明該工藝脫蛋白率高，綜合效果良好。

3 結(jié)論

Sevag法適用于肉蓯蓉多糖脫蛋白工藝，通過正交試驗(yàn)優(yōu)選出肉蓯蓉脫蛋白的最佳工藝為：三氯甲烷與正丁醇的體積配合比4 ∶1，料液體積比1 ∶3，攪拌40 min，脫蛋白4次。在該工藝水平下平均脫蛋白率為87.11%，RSD為1.34%；平均多糖保留率為83.05%，RSD為1.54%。試驗(yàn)證明該工藝穩(wěn)定可靠，適用于肉蓯蓉多糖的純化。

參考文獻(xiàn)：

[1]國家藥典委員會. 中華人民共和國藥典[M]. 北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2010：126.

[2]Schepetkin I A，Quinn M T. Botanical polysaccharides：macrophage immunomodulation and therapeutic potential[J]. International Immunopharmacology，2006，6（3）：317-333.

[3]盧艷花. 中藥有效成分提取分離技術(shù)[M]. 北京：化學(xué)工業(yè)出版社，2005：298.

[4]殷洪梅，尚 強(qiáng)，蕭 偉. 金銀花多糖脫蛋白方法的研究[J]. 中草藥，2010，41（4）：584-586.

[5]龔力民，劉 偉，張楚晗，等. 五倍子多糖脫蛋白方法的研究[J]. 湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2013，33（3）：44-46.

[6]蔡彬新，吳成業(yè)，劉淑集. 海地瓜多糖提取條件的優(yōu)化和脫蛋白的研究[J]. 食品工業(yè)科技，2009，30（10）：194-196，199.

[7]麻景梅，宋新波，張麗娟，等. 肉蓯蓉多糖含量測定[J]. 遼寧中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2012，14（8）：100-101.

[8]喬茜茜，祁 英，孫建忠，等. 啤酒花多糖的提取及脫蛋白工藝研究[J]. 食品工業(yè)科技，2012，33（16）：251-256.