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        中藥復(fù)方理囊散對奶牛子宮復(fù)舊期間生殖激素的影響

        2015-08-20 15:47:47王銀龍谷新利木爾扎提·阿勒騰別克吳學(xué)林伍輝賽務(wù)加甫
        江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué) 2015年7期
        關(guān)鍵詞:奶牛

        王銀龍 谷新利 木爾扎提·阿勒騰別克 吳學(xué)林 伍輝 賽務(wù)加甫

        摘要:為探討中藥理囊散對產(chǎn)后奶牛生殖激素的影響,使20頭荷斯坦奶牛于產(chǎn)后0、15 d口服中藥理囊散,統(tǒng)計(jì)受胎率,通過酶聯(lián)免疫法(ELISA)分析理囊散對產(chǎn)后奶牛血清中促黃體素(LH)、促卵泡素(FSH)、孕酮(P4)、雌二醇(E2)含量的影響。結(jié)果顯示,試驗(yàn)組(A組)45 d內(nèi)的受胎率為70%,顯著高于對照組(B組)。血清中FSH含量于產(chǎn)后15、30 d達(dá)到最大值,LH含量于產(chǎn)后20 d達(dá)到最大值,E2含量于產(chǎn)后20、30 d達(dá)到最大值,均極顯著高于對照組同時(shí)期FSH、LH、E2的含量(P<0.01)。P4含量從產(chǎn)后15 d開始上升,于產(chǎn)后20 d達(dá)到最大值,極顯著高于對照組(P<001),并于產(chǎn)后30 d下降,極顯著低于對照組(P>0.05)。理囊散能刺激卵巢活動(dòng),提高產(chǎn)后奶牛血清中FSH、LH、P4、E2分泌水平,提升早期受胎率,縮短產(chǎn)犢間隔,對產(chǎn)后奶牛子宮機(jī)能的恢復(fù)具有顯著作用。

        關(guān)鍵詞:理囊散;子宮復(fù)舊;奶牛;生殖激素

        中圖分類號: S858.237.2+3 文獻(xiàn)標(biāo)志碼: A 文章編號:1002-1302(2015)07-0203-03

        奶牛子宮復(fù)舊是指產(chǎn)后子宮恢復(fù)到未孕時(shí)形態(tài)和功能的生理過程[1],子宮復(fù)舊的過程和狀態(tài)決定著奶牛產(chǎn)后首次發(fā)情的受胎率,若產(chǎn)后發(fā)情時(shí)間推遲,產(chǎn)犢間隔就會(huì)延長。我國僅有小部分中、小型奶牛場的產(chǎn)犢間隔天數(shù)可達(dá)365~380 d,90%的母牛產(chǎn)犢間隔在400 d以上,有的甚至達(dá)到455 d,有半數(shù)產(chǎn)后母牛的空懷時(shí)間在90~120 d,嚴(yán)重影響奶牛場的經(jīng)濟(jì)效益,制約著我國奶牛業(yè)的健康發(fā)展[2,5]。為縮短奶牛的產(chǎn)犢間隔,不僅要對產(chǎn)后母牛進(jìn)行科學(xué)的飼養(yǎng)管理,還應(yīng)進(jìn)行產(chǎn)后早期的相應(yīng)處理。中藥具有療效確切、無殘留、毒副作用小等優(yōu)點(diǎn),因此開發(fā)利用中草藥促進(jìn)產(chǎn)后奶牛子宮恢復(fù)具有重要意義。本試驗(yàn)通過理囊散對產(chǎn)后奶牛的處理,加快子宮恢復(fù)時(shí)間,提高早期受胎率,縮短產(chǎn)犢間隔,檢測理囊散對產(chǎn)后奶牛子宮復(fù)舊期間生殖激素的影響,為中獸藥治療產(chǎn)后疾病提供一定理論基礎(chǔ)。

        1 材料與方法

        1.1 材料

        1.1.1 試驗(yàn)動(dòng)物 于2013年4—11月在新疆志翔牧業(yè)奶牛場、西部牧業(yè)奶牛場進(jìn)行臨床試驗(yàn)。在排除傳染病、寄生蟲病、肉眼可見的生殖道疾病、先天性因素的基礎(chǔ)上,選擇產(chǎn)犢胎次不同的荷斯坦奶牛40頭并分為2組,每組各20頭。A組為試驗(yàn)組,即灌服理囊散治療組;B組為對照組,即自然恢復(fù)健康組。

        1.1.2 儀器與設(shè)備 PowerWave XS2 BioTek型酶標(biāo)儀;-80 ℃ 超低溫冰箱;Eppendorf Research型移液器(艾本德中國有限公司)。

        1.1.3 主要藥品與試劑 LH、FSH、E2、P4 ELISA試劑盒購于上海藍(lán)基生物科技有限公司,其中LH、FSH、P4的靈敏度為0.1 ng/mL,E2的靈敏度為1 pg/mL。理囊散由女貞子、熟地黃、附子、三棱、藿香、香附子、甘草、青皮等12味中藥組成。

        1.2 方法

        1.2.1 投藥及采血時(shí)間 試驗(yàn)組每頭奶牛于分娩完成4 h后灌服理囊散400 g,每天1次,連續(xù)1個(gè)療程(5 d),觀察 10 d 后繼續(xù)灌服1個(gè)療程。灌服理囊散前第1次采血,第1個(gè)療程結(jié)束后第2次采血,每隔5 d采血1次,共采血10次,采血時(shí)間為09:00—10:00。奶??崭箷r(shí)于尾靜脈采取血液10 mL,并于室溫下靜置,血清自然析出后分裝于1.5 mL離心管中,置于-80 ℃冰箱保存待檢。對照組每次灌服無菌生理鹽水400 g,灌服天數(shù)、采血時(shí)間均與試驗(yàn)組相同。

        1.2.2 激素含量的測定 上述所采集血清中的LH、FSH、E2、P4含量均采用酶聯(lián)免疫法測定,按試劑盒使用說明書操作。

        1.2.3 療效判定 經(jīng)直腸檢查,子宮基本恢復(fù)正常大小且沒有惡露排出,可判定為有效。經(jīng)直腸檢查,子宮龐大或子宮壁腫脹,仍有惡露或膿性分泌物排出,子宮復(fù)原差且弛緩,含有大量液體,按摩子宮體、子宮頸、陰道前部會(huì)促使惡臭分泌物流出陰門,則判定為無效。用藥療程結(jié)束后,產(chǎn)后0~45 d內(nèi)未發(fā)情則判定為無效;產(chǎn)后0~60 d進(jìn)行人工授精,未受孕者則判定為無效。

        1.2.4 統(tǒng)計(jì)分析 采用SPSS 17.0軟件對數(shù)據(jù)進(jìn)行單因素方差分析。試驗(yàn)數(shù)據(jù)均以平均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示。

        2 結(jié)果與分析

        2.1 理囊散對產(chǎn)后奶牛子宮復(fù)舊的治療效果

        A組奶牛30、45 d內(nèi)的發(fā)情率高于B組奶牛,且45 d內(nèi)的受胎率、有效比均高于B組奶牛(表1)。經(jīng)產(chǎn)奶牛的產(chǎn)后恢復(fù)時(shí)間短于第1、2胎奶牛。

        2.2 理囊散對產(chǎn)后奶牛血清中生殖激素的影響

        根據(jù)表2、表3中數(shù)據(jù)繪制各激素的變化曲線(圖1至圖4)。A組中經(jīng)理囊散2個(gè)療程處理的產(chǎn)后奶牛,在產(chǎn)后15、30 d,血清中FSH、E2含量均出現(xiàn)2個(gè)高峰期,極顯著高于B組同時(shí)期FSH、E2的含量(P<0.01),B組奶牛血清中FSH含量在產(chǎn)后20、30 d出現(xiàn)2個(gè)高峰期,而E2含量在子宮復(fù)舊期間僅出現(xiàn)1個(gè)高峰期。A組奶牛血清中LH含量在產(chǎn)后 10 d 開始上升,并于產(chǎn)后20 d達(dá)到最大值,極顯著高于B組同時(shí)期LH的含量(P<0.01)。A組奶牛血清中P4含量在產(chǎn)后15 d開始升高,并于產(chǎn)后20 d達(dá)到最大值,產(chǎn)后35 d后持續(xù)高含量水平,極顯著高于B組同時(shí)期P4的含量(P<001)??梢?,A組奶牛血清中FSH、LH、P4、E2的含量比B組提前5 d達(dá)到最大值,總體變化規(guī)律基本與魏學(xué)良[6]、高樹等[7]的研究結(jié)論相符。

        3 討論

        3.1 理囊散對產(chǎn)后奶牛血清中FSH、LH水平的影響

        試驗(yàn)結(jié)果表明,A、B組奶牛子宮復(fù)舊期間血清中FSH、LH均處于較低水平。魏學(xué)良、高樹等研究發(fā)現(xiàn),奶牛產(chǎn)后2周內(nèi)血清中LH濃度水平較低,于3周后上升,呈劇烈的活動(dòng)變化,而FSH在產(chǎn)后12 d內(nèi)均處于較低水平[6-7],本試驗(yàn)結(jié)論與之基本一致??赡艿脑?yàn)楫a(chǎn)后2周內(nèi)促性腺激素釋放激素(GnRH)的釋放脈沖頻率尚未恢復(fù),致使FSH、LH的水平較低,并由于FSH、LH對GnRH的分泌反應(yīng)不同所致。低頻率的GnRH可引起FSH的釋放,而僅當(dāng)GnRH脈沖頻率高達(dá)1次/h才可釋放LH[8]。經(jīng)理囊散處理后,A組奶牛產(chǎn)后15、30 d發(fā)情頭數(shù)明顯多于B組,直腸檢查發(fā)現(xiàn)卵巢上卵泡活動(dòng)頻繁,檢測結(jié)果顯示血清中FSH含量在產(chǎn)后15、30 d達(dá)到最大值。血清中LH的含量在產(chǎn)后15 d開始逐漸上升,并于產(chǎn)后20 d達(dá)到最大值,表明卵巢上的卵泡退化后形成正常黃體。現(xiàn)代中獸醫(yī)理論認(rèn)為,理囊散可使產(chǎn)后奶牛卵巢提前活動(dòng),并提高奶牛機(jī)體內(nèi)FSH、LH的分泌水平,是由于母畜的性周期變化受下丘腦-垂體-卵巢軸的調(diào)節(jié)[9]。據(jù)報(bào)道,補(bǔ)腎中藥可降低促乳素分泌水平[10-11],而理囊散中的熟地黃、女貞子、附子、甘草均屬于補(bǔ)腎、益精、填髓的藥物,可使產(chǎn)后奶牛的促乳素水平下降,解除高水平促乳素對下丘腦-垂體-卵巢軸的抑制作用,從而刺激卵巢活動(dòng)。

        3.2 理囊散對產(chǎn)后奶牛血清中P4、E2水平的影響

        P4在產(chǎn)后15 d內(nèi)處于較低水平,從產(chǎn)后20 d開始逐漸上升,于產(chǎn)后25 d達(dá)到最大值,并于產(chǎn)后30 d達(dá)到最小值,產(chǎn)后35 d后趨于平穩(wěn)上升(圖3)。P4由黃體與胎盤產(chǎn)生,P4含量隨分娩后妊娠黃體的退化而急劇下降,產(chǎn)后0 d左右降到基礎(chǔ)水平,并維持在較低水平直至產(chǎn)后第1次排卵,從產(chǎn)后15 d開始明顯上升,并于產(chǎn)后25 d達(dá)到峰值,其原因是第1次排卵結(jié)束后形成黃體并出現(xiàn)短暫的周期,產(chǎn)后35 d后A組明顯趨于平穩(wěn)上升,經(jīng)直腸檢查部分奶牛已受孕,卵巢上形成妊娠黃體,分泌P4水平增加,促使整體水平提高。經(jīng)理囊散處理后,A組奶牛血清中E2含量不僅顯著高于同時(shí)期B組,且分泌時(shí)間提前5 d(圖4)。據(jù)報(bào)道,切除卵巢的動(dòng)物,其子宮對催產(chǎn)素的敏感性很低,而經(jīng)E2處理的子宮敏感性則很高,微量催產(chǎn)素即可引起子宮肌的有力收縮,從而加強(qiáng)子宮的早期恢復(fù)[12]。E2可增強(qiáng)子宮的收縮能力,有促進(jìn)子宮復(fù)舊的作用,E2還可刺激子宮黏膜產(chǎn)生大量催產(chǎn)素受體,利于催產(chǎn)素對子宮的收縮作用,加快產(chǎn)后奶牛子宮內(nèi)惡露的排放,減少子宮炎癥等疾病的發(fā)生,為人工授精提供良好的子宮環(huán)境。影響產(chǎn)后奶牛子宮機(jī)能恢復(fù)的因素較為復(fù)雜,其中卵巢是影響E2分泌水平最主要的因素之一。母畜性周期變化受下丘腦-垂體-卵巢軸的調(diào)節(jié),E2是此調(diào)節(jié)系統(tǒng)中的關(guān)鍵激素[13],而理囊散中的熟地黃可上調(diào)雌性小鼠老化進(jìn)程中E2的含量[14],且理囊散中的醇溶性成分可促進(jìn)小鼠子宮發(fā)育,具有明顯的促孕活性[15]。

        4 結(jié)論

        理囊散具有添加小劑量外源E2的作用,通過下丘腦-垂體-卵巢軸的調(diào)節(jié)促進(jìn)和提高產(chǎn)后奶牛血清中FSH、LH、P4、E2的分泌水平,進(jìn)而加快產(chǎn)后奶牛惡露的排放、發(fā)情時(shí)間及子宮形態(tài)的恢復(fù),從而提高受胎率,縮短產(chǎn)犢間隔期。理囊散具有奶牛產(chǎn)后保健作用,可加快產(chǎn)后奶牛生殖機(jī)能的恢復(fù)。

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