李文杰

(河南省濟(jì)源市動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，459000)

在上世紀(jì)九十年代，首次提出了基因治療技術(shù)，且在美國實(shí)施人體臨床研究；1993年，美國FDA指出：該治療技術(shù)是建立在修飾活細(xì)胞遺傳物質(zhì)基礎(chǔ)之上的一種醫(yī)學(xué)干預(yù)措施，可對(duì)細(xì)胞進(jìn)行體外修飾，之后導(dǎo)入病患身體中；又或是在病患體內(nèi)導(dǎo)入基因治療產(chǎn)品，繼而改變細(xì)胞遺傳學(xué)特性。通過該治療能夠在人類疾病診斷、防治等方面發(fā)揮正面作用。但是，在獸醫(yī)方面，基因治療的研究還處在一個(gè)研究時(shí)期，然也獲得了一定的成就，且促進(jìn)了部分學(xué)科的發(fā)展。

1 基因治療在獸醫(yī)中的應(yīng)用

在動(dòng)物醫(yī)學(xué)中，基因一般用在動(dòng)物疾病的預(yù)防與治療方面，尤其是血液疾病的治療，其治療的方案為：將部分和血管生成相關(guān)的因子（HGF、VEGF、Ang1等）經(jīng)由適合的傳遞系統(tǒng)，轉(zhuǎn)送至靶細(xì)胞內(nèi)，繼而促使其在靶細(xì)胞中表達(dá)，最終實(shí)現(xiàn)對(duì)由于缺乏相關(guān)因子而導(dǎo)致的疾病的治療[1]。比如在有關(guān)研究中指出:在兔缺血心肌中，Ang1基因可有效表達(dá)，且可促使新生血管的形成，優(yōu)化心臟功能。此外，在其他疾病的治療上，如內(nèi)科疾病，也可發(fā)揮一定的作用。

2 基因治療的有效性與安全性

在進(jìn)行基因治療的過程中，為確保治療的有效性與安全性，需保證兩大點(diǎn)，即定向運(yùn)送基因、表達(dá)調(diào)控系統(tǒng)。

2.1 基因運(yùn)送的有效性與安全性

在進(jìn)行基因治療時(shí)，最初需依據(jù)所選病例，選取適合的目的基因，之后經(jīng)由基因運(yùn)送系統(tǒng)，把目的基因送至組織或靶細(xì)胞內(nèi)，且充分發(fā)揮其功能，最終實(shí)現(xiàn)治療疾病的目標(biāo)。在目的基因定向運(yùn)送期間，確保運(yùn)送載體的安全性與準(zhǔn)確性，是當(dāng)前一項(xiàng)急需解決的問題。首先，就運(yùn)送載體的安全性而言，目前所采用的載體有三種，即分子結(jié)合載體、病毒載體以及非病毒載體。其中，使用最為廣泛的就是病毒載體，特別是以RV（逆轉(zhuǎn)錄病毒）作為載體進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移，有較強(qiáng)的成功率[2]。RV分兩大部分，其一為復(fù)制缺陷病毒，其二為病毒包裝細(xì)胞系。這兩者結(jié)合在一起之后，方可形成可攜帶基因，且僅有一次感染能力的重組逆轉(zhuǎn)錄病毒載體。

RV內(nèi)的兩大部分存在一定的風(fēng)險(xiǎn)性，即在靶細(xì)胞基因組插入位點(diǎn)的選擇上，采取隨機(jī)選擇的方式，而這種方式極易造成靶細(xì)胞的生長(zhǎng)出現(xiàn)異常狀況，比如：有可能會(huì)造成靶細(xì)胞內(nèi)在正常狀況下不表達(dá)的癌基因或者是原癌基因，被激活，繼而引發(fā)癌變。此外，RV載體可和機(jī)體基因組內(nèi)的內(nèi)源性逆轉(zhuǎn)錄病毒序列發(fā)生作用，繼而出現(xiàn)基因重組，從而喪失復(fù)制缺陷性，導(dǎo)致機(jī)體受到侵害。再者RV內(nèi)的病毒包裝細(xì)胞系，和復(fù)制缺陷病毒之間，擁有同源重組序列，在重組期間有重新獲取psi序列，繼而轉(zhuǎn)變?yōu)橐吧筒《镜目赡苄?，從而?duì)機(jī)體帶來影響[3]。

2.2 基因表達(dá)的有效性與安全性

2.2.1 目的基因表達(dá)的有效性：基因表達(dá)調(diào)節(jié)系統(tǒng)控制的好與壞，決定著目的基因的表達(dá)情況。通常情況下，要想獲得最好的基因表達(dá)調(diào)節(jié)系統(tǒng)，一般需把握三個(gè)方面，其一，區(qū)間方面，對(duì)目的基因進(jìn)行有效的控制，使其僅在靶細(xì)胞內(nèi)方可表達(dá)；其二，表達(dá)水平方面，通常情況下是期望能夠達(dá)到最高的表達(dá)水平，然而當(dāng)前對(duì)目的基因的表達(dá)，尚無較好的控制方法，也尚不知曉怎樣的表達(dá)標(biāo)準(zhǔn)對(duì)動(dòng)物最適合，以及目的基因的表達(dá)是否會(huì)影響到動(dòng)物的其它功能，等等。

2.2.2 目的基因表達(dá)的安全性:在基因治療過程中，人們還十分關(guān)注一個(gè)問題，即下一代是否會(huì)遺傳到目的基因，且該基因是否會(huì)對(duì)下一代產(chǎn)生影響。一般情況下，伴隨著生殖細(xì)胞的轉(zhuǎn)移，種系細(xì)胞操作所轉(zhuǎn)移的遺傳物質(zhì)也將遺傳給下一代。站在生物學(xué)角度而言，該種操作的實(shí)施，可能會(huì)致使動(dòng)物固有的遺傳信息系統(tǒng)被破壞，繼而帶來無法想象的后果；此外，因?yàn)槿祟悓?duì)動(dòng)物生理活動(dòng)的認(rèn)識(shí)并不全面，因而難以對(duì)基因治療的生理效應(yīng)進(jìn)行預(yù)測(cè)，繼而對(duì)下一代產(chǎn)生長(zhǎng)久影響。有關(guān)組織指出：即使通過將優(yōu)良的基因?qū)肷臣?xì)胞內(nèi)，可避免患病動(dòng)物的后代患上相同的疾病，也不準(zhǔn)許將正常的基因?qū)нM(jìn)患病動(dòng)物的精子/卵子內(nèi)。隨后，又出現(xiàn)另一個(gè)疑問，即在非生殖細(xì)胞內(nèi)，可否導(dǎo)入目的基因？且安全與否？這些問題都有待進(jìn)一步思考。

3 結(jié)語

現(xiàn)今，基因治療已經(jīng)在體外（動(dòng)物）實(shí)驗(yàn)中得到了驗(yàn)證，其中有一些實(shí)驗(yàn)還獲得了較為滿意的成果。作為一種全新的臨床治療方法，該種治療已由基礎(chǔ)理論逐漸邁向臨床實(shí)踐，然依舊有一些問題如有效性與安全性等急需解決，因而，需對(duì)基因治療進(jìn)行更為深入的研究與探討。

[1]胡春奎.慢性疼痛基因治療非病毒遞送系統(tǒng)研究進(jìn)展[J].實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志,2012,28(1):157-159.

[2]李鑫,丁壯.慢病毒載體與基因治療[C].中國畜牧獸醫(yī)學(xué)會(huì)2011學(xué)術(shù)年會(huì)論文集.2011:783.

[3]陳艷.基因治療在水生動(dòng)物疾病防治中的應(yīng)用與展望[J].中國水產(chǎn),2011,(12):57-58.