阿力木·依合亞
摘 要 對農(nóng)產(chǎn)品進(jìn)行殘留藥物的檢測,不僅是保證農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全的重要手段,更是維護(hù)人民身體健康的必要措施。在對農(nóng)產(chǎn)品殘存農(nóng)藥的檢測上,較為常用的有酶抑制率法,其顯著的特點(diǎn)為:操作易、成本低、效率高,速度快,而且對檢測人員技術(shù)水平?jīng)]有太大要求?;诖?,介紹農(nóng)藥殘留速測技術(shù)原理,并分析了農(nóng)藥殘留速測技術(shù)中常見的影響因素,并提出相應(yīng)的解決措施,以供參考。
關(guān)鍵詞 農(nóng)藥殘留;速測技術(shù);影響因素
中圖分類號:S481.8 文獻(xiàn)標(biāo)志碼:B 文章編號:1673-890X(2015)18--02
農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全是重大民生問題,事關(guān)人民群眾的切身利益。要想有效抑制違規(guī)農(nóng)藥的使用、避免農(nóng)藥殘留中毒事件的發(fā)生、以及加強(qiáng)對上市蔬菜、水果等農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量的監(jiān)控,就要有一套科學(xué)、快速的農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測方式。而酶抑制法便是農(nóng)藥殘留速測技術(shù)中最為有效的一種,所以近年來被廣泛應(yīng)用于農(nóng)產(chǎn)品檢測領(lǐng)域中,而且效益明顯[1]。筆者基于實(shí)踐,對影響農(nóng)藥殘留速測結(jié)果的常見因素做了簡要分析,并給出相應(yīng)建議,以供廣大的農(nóng)檢人員參考。
1 農(nóng)藥殘留速測方法原理
酶抑制法,作為最有效的農(nóng)藥殘留速測技術(shù)之一,其原理源于昆蟲毒學(xué)原理,具體為:倘若在農(nóng)產(chǎn)品的提取液中不存在或殘存很少有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥,那么酶的活性就得以完全釋放,就會對試驗(yàn)中加入的基質(zhì)進(jìn)行水解,產(chǎn)生水解物,而在化學(xué)反應(yīng)下,其與加入的顯色劑會發(fā)生反應(yīng),呈現(xiàn)色彩;反之,酶的活性就無法全然釋放,甚至?xí)灰种啤_@時,可以利用分光光度計(jì)測定吸光值,根據(jù)顯色劑隨時間的變化情況來對抑制率做出計(jì)算,進(jìn)而對農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥的殘留情況做出精準(zhǔn)判斷[2]。也就是說,如果將樣本化提取液與乙酰膽堿酯酶、顯色劑相融合,酶的活性未被抑制,那么吸光值自然不會有變化,就此可以得知該樣本中不存在機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留。而倘若吸光值有很明顯的變化的話,就可以推測出該樣本中含有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥。
在實(shí)際的農(nóng)藥殘留檢測過程中,當(dāng)提取液對酶的抑制率≥50%,即可確定被檢測的農(nóng)產(chǎn)品其所包含的有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥已然超標(biāo)。但一次檢測并不足以完全肯定,所以對于抑制率≥50%的樣品要多做幾回以保證檢測的有效性。當(dāng)然,其他的檢測方法也可被用來對具體農(nóng)藥品種和含量做進(jìn)一步確定。
2 影響農(nóng)藥速測的因素
酶抑制法具有檢測時間短、處理簡單、非常適合現(xiàn)場測定等多個優(yōu)點(diǎn),可快速兒靈敏地對抑制膽堿酶活性的農(nóng)藥品種進(jìn)行檢測[3]。但由于酶、樣品、環(huán)境條件、顯色劑等這些被用于該檢測方法的事物存在一定的差異性,所以導(dǎo)致在對農(nóng)產(chǎn)品的農(nóng)藥殘留檢測過程中存在假陽性或假陰性時常出現(xiàn)的特殊情形,影響了檢測結(jié)果的判定。
2.1 酶活性
酶,即酰膽堿酯酶,其活性對于農(nóng)藥殘留的快速檢測至為重要。檢測的穩(wěn)定度、可靠性、以及靈敏度完全決定于它的質(zhì)量水平高低。因此在檢測開始之前,要首先核查酶的活性,確保其活性仍處于可被使用范圍之內(nèi);倘若空白樣△Ac<0.3時,則說明酶的活性已低于最低活性要求,不能再被用來做農(nóng)藥殘留檢測,否則可造成檢測結(jié)果的偏差。因此要加入適當(dāng)?shù)拿?,以保證其活性適于做檢測之用。溶解后的酶液可分裝在3~5個小瓶內(nèi),應(yīng)將暫時不用的儲存在冷凍室內(nèi),用時在做解凍處理。粉狀酶也應(yīng)儲存在冷凍室內(nèi)。酶液的解凍次數(shù)最多為兩次,不然,酶的活性會受到干擾。
2.2 樣品處理
存在于部分農(nóng)產(chǎn)品中的葉綠素或其他色素會對顯色造成嚴(yán)重干擾,處理不當(dāng),會對檢測結(jié)果造成直接影響。因此,在采樣時,應(yīng)首先擦去表面泥土等雜物,然后進(jìn)行取樣,切忌用水沖洗樣品。取樣時,應(yīng)將樣品切成1 cm大小,不宜切得太碎,否則色素會釋放出來。在對葉菜取樣時,應(yīng)取來自不同植株葉片的葉尖部樣本。在對西紅柿這樣的果實(shí)類蔬菜取樣時,需在表皮處取樣,而且要采集不同個體的表皮。最好不要使樣品中參入汁水,引發(fā)試樣混濁,有害于檢測結(jié)果的精準(zhǔn)測定。不僅如此,檢測成功與否還與提取時間控制是否嚴(yán)格有關(guān)。因?yàn)椴蓸訒r間過長的話,蔬菜中色素會逐漸浸出,對顯色造成干擾。而倘若時間太短的話,不能對蔬菜表面的農(nóng)藥殘留做有效提取。所以,當(dāng)樣品出現(xiàn)混濁現(xiàn)象時,要么通過定性濾紙過濾,要么加長靜置時間,以此來規(guī)避不利因素對于檢測結(jié)果的干預(yù)。
2.3 溫度和時間
酶與被測農(nóng)藥殘留的反應(yīng)結(jié)果也受檢測時間,檢測溫度的影響。當(dāng)溫度在40 ℃以上時,或者反應(yīng)的時間過長時,酶試劑的活性就會大幅失去,降低對于殘留農(nóng)藥的靈敏度;而當(dāng)溫度條件在20 ℃以下時,又會減慢酶的反應(yīng)速度。因此,需適當(dāng)延長酶液和緩沖劑后放置反應(yīng)的時間,要保證對照溶液的條件與每批樣品的控制時間、溫度條件的一致性。
2.4 農(nóng)產(chǎn)品成分
酶抑制法也并非萬能檢測法,它在某些農(nóng)產(chǎn)品上并不適用,如蔥、蒜、辣椒、芹菜、蘑菇等。因?yàn)檫@些農(nóng)產(chǎn)品其本身會對酶的活性造成破壞,而且有的還會造成顯色產(chǎn)物褪色。同時,在取樣時,也盡量不要剪切太碎的飽含葉綠素的蔬菜。可采用縮短浸提時間、增加樣品切塊、增加平行檢測次數(shù)、或?qū)⒄晔卟私岬姆椒ǎ瑏韺κ卟顺煞肿鲇行Э刂?,以減少其對檢測造成的干擾。
2.5 試劑
要確保試劑的保質(zhì)期至少為1 a,酶試劑可直接使用,試劑開封前后均應(yīng)在4 ℃的溫度下冷藏處理,最好在開瓶后30 d內(nèi)用完。顯色劑無需冷藏,但其與底物都有催化作用,因此要避免陽光直射,在室溫的條件下即可保存,其使用效果最佳的時間是6個月內(nèi)。底物的存儲條件為-5~0 ℃,因此溶解后要使之冷藏。使用完了,要用膠塞蓋好瓶口,并在30 d內(nèi)使用完。在器具上,要做到專器專用,不可隨意使用,以免交叉污染。酶試劑對于污染非常敏感,即便受到輕度污染,其活性也會降低。所以在進(jìn)行農(nóng)藥殘留測試之前,應(yīng)先吸取酶試劑。而且不管酶試劑有無被使用,都禁止再倒回去。
3 結(jié)語
酶在不同農(nóng)藥上其敏感性也會不同,因此應(yīng)規(guī)避各類影響檢測結(jié)果的不利因素,提高酶的活性和靈敏度,保證殘留農(nóng)藥檢測的準(zhǔn)確性,提高農(nóng)產(chǎn)品的食用安全。
參考文獻(xiàn)
[1]王富華.蔬菜農(nóng)藥殘留速測技術(shù)的應(yīng)用與發(fā)展[J].農(nóng)業(yè)環(huán)境與發(fā)展,2008(2).
[2]錢勇輝.農(nóng)藥殘留速測技術(shù)方法與進(jìn)展[J].中國測試技術(shù),2008(4).
[3]趙麗麗.果菜中常用有機(jī)磷農(nóng)藥快速測方法的研究[J].食用科學(xué),2001(7).
(責(zé)任編輯:劉昀)