尹利方，胡 昳 ，李志兵 ，趙曉紅，張曉瓊，胡靖祥 ，蔣淑萍 ，趙明方 ，羅清秀

（1.昆明學(xué)院農(nóng)學(xué)院，云南 昆明 650214；2.云南省都市特色農(nóng)業(yè)工程技術(shù)研究中心，云南 昆明 650214）

煙草漂浮育苗需要實(shí)施3～5次剪葉，剪葉又是病毒傳播蔓延的主要途徑。以TMV為代表的煙草病毒對(duì)煙草生產(chǎn)危害嚴(yán)重，為控制病毒對(duì)煙草生產(chǎn)造成的損失，培養(yǎng)健康煙苗在生產(chǎn)中意義重大。篩選安全、環(huán)保、有效的消毒劑對(duì)控制漂浮育苗中病毒病的傳播蔓延是一項(xiàng)重要工作。目前，云南省全面推廣烤煙漂浮育苗技術(shù)，至2004年推廣面積已達(dá)27.67萬(wàn)hm2，占移栽大田面積的82.6%。影響烤煙漂浮育苗推廣最大的病害是病毒病，因病毒病在大田發(fā)生后，沒(méi)有較好的防治方法。煙草病毒病有“植物癌癥”之稱(chēng)，該病的發(fā)生危害已成為烤煙生產(chǎn)向優(yōu)質(zhì)、適產(chǎn)、高效目標(biāo)邁進(jìn)的一個(gè)主要障礙。煙草普通花葉病在烤煙漂浮育苗過(guò)程中的發(fā)生危害具有“一株發(fā)病，危及全棚”的特點(diǎn)，已成為漂浮育苗技術(shù)推廣的主要風(fēng)險(xiǎn)之一。為有效控制烤煙漂浮育苗階段煙草普通花葉病的發(fā)生危害，必須對(duì)最容易傳播該病的剪葉途徑進(jìn)行研究。剪葉是漂浮育苗工作中一項(xiàng)必不可少的程序，是達(dá)到培育整齊一致壯苗的重要手段，但同時(shí)他又是造成TMV傳播污染的重要途徑之一，所以在剪葉時(shí)應(yīng)十分注意對(duì)工具的消毒。而當(dāng)前生產(chǎn)中主要應(yīng)用10%漂白粉和2%福爾馬林等藥劑進(jìn)行消毒，很難達(dá)到預(yù)期效果，因此試用目前生產(chǎn)上應(yīng)用的幾種消毒藥劑進(jìn)行對(duì)比試驗(yàn)，從而篩選出符合生產(chǎn)實(shí)際的消毒藥劑，為漂浮育苗用具消毒提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 供試材料

供試煙苗：按照烤煙漂浮育苗實(shí)用技術(shù)方法，選擇云南農(nóng)業(yè)大學(xué)后山試驗(yàn)基地溫室大棚培育的健康試驗(yàn)用煙苗，品種為云煙85包衣種，試驗(yàn)時(shí)將162穴漂盤(pán)連同煙苗一起處理。

TMV毒源：TMV病株，紗網(wǎng)隔離盆栽作為試驗(yàn)用TMV毒源，接種時(shí)選擇有明顯花葉發(fā)病癥狀的葉片。

TMV接種毒液：取TMV接種發(fā)病明顯的嫩葉，加入0.005 mol/L磷酸緩沖液（配方為磷氫二鉀7.6 g、磷酸二氫鉀 2.25 g、亞硫酸鈉 1.26 g，pH 7.5）研磨后制成毒液，供試驗(yàn)用。

剪葉工具：普通剪刀。

1.2 試驗(yàn)設(shè)計(jì)

1.2.1 消毒藥劑及配制方法

毒消：北京市東旺農(nóng)藥廠(chǎng)提供，24%混脂酸銅水乳劑。中國(guó)煙葉生產(chǎn)購(gòu)銷(xiāo)公司推薦農(nóng)藥，科技部國(guó)家級(jí)星火計(jì)劃項(xiàng)目，農(nóng)業(yè)部無(wú)公害農(nóng)產(chǎn)品生產(chǎn)推薦農(nóng)藥，北京市高新技術(shù)成果轉(zhuǎn)化項(xiàng)目。本產(chǎn)品煙草專(zhuān)用，防治病毒病。取毒消0.83 mL，加入500 mL自來(lái)水中，充分拌勻，為600倍液。

育寶：育寶為育苗專(zhuān)用消毒劑，由昆明育寶科技公司提供。主要成分三丹油，是一種高效低毒的水溶性殺菌劑，能殺死或抑制微生物的繁殖，是廣譜型抗菌劑。取育寶2.5 mL，加入500 mL自來(lái)水中，充分拌勻，為200倍液。

博邦牌二氧化氯：由北京博邦食品配料公司提供。穩(wěn)定性二氧化氯（簡(jiǎn)稱(chēng)二氧化氯）是繼漂白粉、次氯酸鈉、氯氣等氯化消毒劑之后的第四代殺滅微生物的消毒產(chǎn)品，與傳統(tǒng)的氯化消毒劑相比，該產(chǎn)品不產(chǎn)生致癌氯代烴（如三氯甲烷等），不受水質(zhì)條件的制約，具有高效、廣譜、性能穩(wěn)定且無(wú)毒等特點(diǎn)，被世界衛(wèi)生組織（WHO）確認(rèn)為A1級(jí)環(huán)保殺菌消毒產(chǎn)品。廣泛用于水產(chǎn)、食品保鮮、加工、飲用水的消毒、殺菌和除臭。其作用機(jī)理是活化后的ClO2在H+的作用下產(chǎn)生具有強(qiáng)氧化作用的新生態(tài)氧，能迅速附著在微生物細(xì)胞表面，滲入微生物的細(xì)胞膜，與微生物蛋白質(zhì)中的氨基酸產(chǎn)生氧化分解反應(yīng)，從而使氨基酸斷裂、蛋白質(zhì)失去活力而達(dá)到殺滅微生物的目的。取博邦牌二氧化氯0.62 g加入500 mL自來(lái)水中，充分拌勻，為800倍液。

1.2.2 試驗(yàn)處理

處理1：剪刀蘸取病毒液后用清水沖洗然后剪葉。

處理2：剪刀蘸取病毒液后放入博邦牌二氧化氯800倍液中消毒5 min，用清水沖洗后剪葉。

處理3：剪刀蘸取病毒液后放入育寶200倍液中消毒5 min，用清水沖洗后剪葉。

表1 不同剪葉處理TMV傳染發(fā)病

表2 各處理藥劑對(duì)煙草花葉病的預(yù)防效果

處理4：剪刀蘸取病毒液后放入毒消600倍液中消毒5 min，用清水沖洗后剪葉。

1.2.3 剪葉方法

待煙苗生長(zhǎng)至貓耳期時(shí)，用剪刀蘸取TMV毒液，將染毒剪刀浸泡在各消毒劑中5 min，用清水沖洗后剪葉。按從左到右，從下到上的順序，每苗剪3葉。 用0.1%三元烤煙專(zhuān)用復(fù)合肥 （10∶12∶24）為營(yíng)養(yǎng)液。置于溫室大棚內(nèi)培養(yǎng)。剪葉后20 d調(diào)查計(jì)算各小區(qū)煙苗發(fā)病率。

1.2.4 試驗(yàn)設(shè)置

用每盤(pán)6～7葉期的漂浮育苗煙苗，剪葉后培養(yǎng)，每盤(pán)一個(gè)處理3次重復(fù)，共12個(gè)小區(qū)，隨機(jī)區(qū)組排列。剪葉后的煙苗做好標(biāo)記，中間做好防蟲(chóng)等管理工作。

1.3 TMV發(fā)病率調(diào)查

以出現(xiàn)典型花葉癥狀為標(biāo)準(zhǔn)，觀(guān)察記錄發(fā)病株數(shù)和健康株數(shù)。發(fā)病率（%）=發(fā)病總株數(shù)/調(diào)查總株數(shù)×100%，相對(duì)防效（%）＝（對(duì)照發(fā)病率－處理發(fā)病率）/對(duì)照發(fā)病率×100%

2 結(jié)果與分析

從表1可以看出，用不進(jìn)行任何消毒處理的剪刀剪葉，花葉病發(fā)病率為50.41%。而用經(jīng)過(guò)博邦牌二氧化氯800倍液、育寶200倍液、毒消600倍液消毒劑消毒的剪刀剪葉，花葉病發(fā)病率明顯降低。相對(duì)防效分別為93.87%、67.03%、27.32%（表2）。結(jié)果表明，本試驗(yàn)所有供試消毒劑均能在短時(shí)間內(nèi)殺死或鈍化剪刀上的TMV，具有對(duì)TMV進(jìn)行消毒的效果。

試驗(yàn)結(jié)果還表明，經(jīng)博邦牌二氧化氯800倍液、育寶200倍液5 min浸泡消毒后，能高效抑制TMV在剪葉中的傳播，各煙草漂浮育苗生產(chǎn)基地可結(jié)合本地實(shí)際，盡量采用博邦牌二氧化氯、育寶消毒劑，并對(duì)濃度和消毒時(shí)間進(jìn)行搭配，達(dá)到有效控制TMV在剪葉過(guò)程中的傳播。

3 討論

烤煙漂浮育苗是當(dāng)今世界上比較先進(jìn)的一種育苗技術(shù)，近年來(lái)，我國(guó)大部分產(chǎn)煙區(qū)已經(jīng)由過(guò)去的苗袋育苗轉(zhuǎn)為漂浮育苗。采用漂浮育苗可以培育出無(wú)病、莖高、均勻一致的壯苗。其中，苗床剪葉則是達(dá)到這一目的的一項(xiàng)重要措施。苗床剪葉處理可以極顯著增加煙苗莖粗，葉綠素含量也有增加的趨勢(shì)，同時(shí)促進(jìn)根系發(fā)育，提高煙苗的壯實(shí)和生產(chǎn)效率，還可預(yù)防早花。但烤煙漂浮育苗中病毒病傳播、蔓延的最主要途徑也是剪葉，所以應(yīng)高度重視對(duì)剪葉工具的消毒。目前使用的10%漂白粉和2%福爾馬林等藥劑不能達(dá)到理想的效果。本試驗(yàn)結(jié)果表明使用博邦牌二氧化氯、育寶等可以達(dá)到殺滅病毒、阻斷病毒通過(guò)剪葉刀片傳播的目的。值得在生產(chǎn)中推廣使用。為避免抗性的產(chǎn)生，建議交替使用。

[1]曾嶸,滕永忠.烤煙漂浮育苗中TMV的發(fā)生及預(yù)防研究[J].云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2005,20(1):36-139.

[2]劉國(guó)順,習(xí)向銀.剪葉處理對(duì)烤煙漂浮育苗中煙苗生長(zhǎng)及生理特性的影響[J].中國(guó)煙草科學(xué)，2003(1):25-27.

[3]雷永和,施永超.優(yōu)質(zhì)烤煙栽培技術(shù)模式[M].昆明:云南科技出版社,1999.

[4]裘維番.植物病毒學(xué)[M].北京:科學(xué)出版社,1985，254-256.

[5]彭宏梅,李月秋.應(yīng)用電鏡技術(shù)研究大理州煙草苗期病毒病的發(fā)生狀況[J].云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2000,15(1):70-71.

[6]楊德廉,王鳳龍.我國(guó)煙草病毒病的防治研究策略[J].中國(guó)煙草科學(xué),2001(1):46-48.

[7]方敦煌,何云川.煙草漂浮育苗新技術(shù)[J].農(nóng)業(yè)科技通訊,1998(7):10.

[8]王紹坤,滕永忠.煙草栽培實(shí)用技術(shù)[M].昆明:云南科技出版社,2001.

[9]況琪軍,畢永紅.穩(wěn)定性二氫化氯的殺藻效果研究[J].水生生物學(xué)報(bào),2003,27(5):554-556.

[10]任凱,解猛.常用化學(xué)消毒劑的作用機(jī)理[J].中國(guó)衛(wèi)生工程學(xué),2004,3(1).

[11]賀啟環(huán),潘慧云.有機(jī)穩(wěn)定性二氧化氯初步研究[J].工業(yè)水處理，2004,24(2):49-52.

[12]楊怡艷,劉蘅川.二氧化氯發(fā)生器殺菌及消毒效果觀(guān)察[J].現(xiàn)代預(yù)防醫(yī)學(xué),2001,28(4):454-456.

[13]邱真武.烤煙漂浮育苗技術(shù)研究[A].河南煙草產(chǎn)業(yè)可持續(xù)發(fā)展論壇曁2004年學(xué)術(shù)年會(huì)論文集,2004.