孫彩華 何佳奇 余朝輝

浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院藥劑科，浙江 杭州 310004

納米銀是一種新型材料，其殺菌能力強(qiáng)、殺菌廣譜、應(yīng)用安全，在殺菌領(lǐng)域有很大的應(yīng)用價值。納米銀的形態(tài)有多種，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)的有球形、立方體、銀納米線、八面體、三角片等，其形態(tài)不同，則制備方法各異。傳統(tǒng)的物理法不易控制條件，且費(fèi)用較高，化學(xué)法操作簡單且條件易控制[1-2]。其中微波法以操作簡單、制備速率快等優(yōu)點(diǎn)受到大量重視，本文以微波法制備不同形態(tài)納米銀，并對其殺菌性能進(jìn)行研究。

1 納米銀的制備

1.1 材料

微波爐（Galanz G80F23CN1L-SD）、掃描電子顯微鏡（NOVANANOSEM 430）、透射電子顯微鏡（JEOL JEM-2100HR）、紫外-可見光分光光度儀（HACH DR 5000）、X 射線衍射儀（Bruker D8 ADVANCE）、電子天平（奧豪斯 AR2140）、高速離心機(jī)（中佳 HC-3017）。

1.2 儀器

硝酸銀（AgNO3）（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）、聚乙烯吡咯烷酮 （PVPK30）（上海生物科技有限公司）、乙二醇（EG）（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）、氯化鈉（NaCl）（廣州化學(xué)試劑廠）、乙醇（廣州化學(xué)試劑廠）、丙酮（國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）、去離子水與超純水為實(shí)驗(yàn)室（浙江中醫(yī)藥大學(xué)附屬第一醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室）自制。

1.3 制備方法

利用微波合成法制備納米銀的步驟如下：在50 mL聚四氟乙烯反應(yīng)容器中加入經(jīng)準(zhǔn)確稱取的AgNO3、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）、EG以及NaCl，可見在加入NaCl后溶液由澄清透明狀逐漸變渾濁，溶液泛白、透光性變低，表示反應(yīng)中產(chǎn)生了不溶于水的AgCl；充分?jǐn)嚢枞芤汉螳@得納米銀溶膠；溶液經(jīng)分離、洗滌后得到目標(biāo)產(chǎn)物納米銀[3]。制備過程中設(shè)定的變量分別為NaCl的投入量（NaCl加入量設(shè)置為 0、0.05、0.1、1、5 mg）、反應(yīng)條件（微波爐320 W加熱，加熱時間為30 min）、反應(yīng)的時間（1.5～4 min）、PVP/AgNO3比例（0、2∶1、8∶1），對不同條件下制備的納米銀產(chǎn)物進(jìn)行分析。利用X線衍射確定物相，區(qū)分納米銀的形態(tài)；利用紫外-可見光分光光度計區(qū)分銀納米線，判定銀納米線的產(chǎn)率及線粒比；利用電子顯微鏡觀察產(chǎn)物的形貌，以確定晶體結(jié)構(gòu)（單晶、孿晶或多晶）；通過紅外光譜分析測定產(chǎn)物中是否存在有機(jī)物來判定納米銀清洗是否干凈。

1.4 結(jié)果

1.4.1 不同NaCl加入量下的納米銀形態(tài) 對不同NaCl加入量所得的納米銀產(chǎn)物進(jìn)行形態(tài)分析顯示，反應(yīng)體系中沒有NaCl或NaCl加入量少時，得到的納米銀顆粒未見結(jié)構(gòu)整齊、形態(tài)單一的準(zhǔn)球形，其粒徑為（60±10）nm；NaCl的量增加到0.1 mg時所得到的產(chǎn)物中不僅有準(zhǔn)球形，還出現(xiàn)了立方體、右椎體、納米棒等球形以外的結(jié)構(gòu)；NaCl的加入量再增加后，所得到的產(chǎn)物中納米顆粒所占的比例減少，銀納米線所占比例增加；將5 mg NaCl加入反應(yīng)中所得到的產(chǎn)物中納米銀顆粒含量很少，而是以銀納米線為主，其線徑為（60±10）nm，線長為 2～4 μm。

1.4.2 不同反應(yīng)時間的納米銀形態(tài) 在反應(yīng)溶液中不加NaCl時，隨著反應(yīng)時間的延長，所得產(chǎn)物的形態(tài)沒有改變，均為準(zhǔn)球形的納米銀顆粒，結(jié)構(gòu)整齊、形態(tài)單一，粒徑為（60±10）nm；而且紫外-可見光分光光度計掃描的結(jié)果顯示，隨著反應(yīng)時間延長，所得產(chǎn)物的波長吸收峰沒有改變，為430～440 nm，據(jù)文獻(xiàn)[4]報道此吸收峰對應(yīng)的是準(zhǔn)球形納米銀顆粒，實(shí)驗(yàn)結(jié)果與報道相符；隨著反應(yīng)時間的延長，波長掃描特征吸收峰的吸收強(qiáng)度增高，說明所獲得的準(zhǔn)球形納米銀顆粒的量增加。

在反應(yīng)溶液中加入5 mg NaCl溶液后，隨著反應(yīng)時間的延長，得到的產(chǎn)物不一樣，在1.5 min時得到的為納米銀顆粒，其大小不一、形態(tài)不規(guī)則，表明納米銀生長階段在初期；反應(yīng)2 min時得到納米銀顆粒，顆粒粒徑為（60±10）nm，形態(tài)以立方體為主，也有右椎體、準(zhǔn)球體顆粒，還夾雜少許銀納米棒，表明出現(xiàn)了納米銀的完整結(jié)構(gòu)；在時間逐漸延長到3 min時，銀納米線的產(chǎn)量增加，其產(chǎn)生的量與納米顆粒的量一樣多，測量線長為1～2 μm；反應(yīng)時間到4 min時，產(chǎn)物中主要是銀納米線，僅有很少的納米銀顆粒，銀納米線的線長也延長到2～4 μm。通過紫外-可見光分光光度計波長掃描，隨著時間的延長，吸收峰有變化，在1.5 min處的吸收峰為460 nm，吸收峰的強(qiáng)度稍低，因此處的吸收峰對應(yīng)納米顆粒的立方體，故此時納米銀顆粒還少；在反應(yīng)到2 min時吸收峰為460 nm，此時的吸收峰強(qiáng)度很高，說明此時產(chǎn)物中主要是納米銀顆粒的立方體；反應(yīng)時間延長到3 min時，有兩個吸收峰，分別在390 nm處與460 nm處，而390 nm處代表銀納米線，表示此時納米銀顆粒與銀納米線的產(chǎn)量一樣多；反應(yīng)到4 min時，吸收峰為390 nm，即此時產(chǎn)物中主要含有銀納米線，結(jié)果如表1所示。

1.4.3 不同比例PVP/AgNO3時產(chǎn)物中納米銀的形態(tài)反應(yīng)溶液中不加NaCl時，在不同比例的PVP/AgNO3反應(yīng)體系中，得到的產(chǎn)物均為納米銀顆粒，在不加入PVP時產(chǎn)物中納米銀顆粒大小不規(guī)則，而在加入PVP后，產(chǎn)物中納米銀顆粒形狀為準(zhǔn)球形，大小均勻，形態(tài)規(guī)則，粒徑為60～70 nm。

表1 不同反應(yīng)時間下納米銀產(chǎn)物的分析

反應(yīng)溶液中加入5 mg NaCl后，不同比例PVP/AgNO3反應(yīng)體系中，得到的產(chǎn)物形態(tài)明顯不同，反應(yīng)液中未加PVP時，所得結(jié)果為納米銀顆粒，其形態(tài)不規(guī)則；加入PVP使得PVP/AgNO3比例為2∶1時，所得產(chǎn)物主要為納米線；而加入更多PVP使得PVP/Ag-NO3比例為8∶1時，產(chǎn)物中主要是納米顆粒，而納米線的量很少，結(jié)果如表2所示。

表2 不同比例PVP/AgNO3時產(chǎn)物中納米銀的形態(tài)

2 不同形態(tài)納米銀的殺菌性能

2.1 儀器

2.1.1 儀器 96孔板（廣州普博儀器有限公司）、電子天平（美國奧豪斯，AR2140）、高速離心機(jī)（安徽中科中佳科學(xué)儀器有限公司，HC-3017）、恒溫振蕩器（上海智誠分析儀器制造有限公司，ZHWY-2102C）、透射電子顯微鏡（上海日立高新技術(shù)國際貿(mào)易有限公司，H-7650）。

2.1.2 試劑 LB培養(yǎng)基、瓊脂均購自廣東環(huán)凱微生物科技有限公司；NaCl、碳酸氫鈉（NaHCO3）、磷酸鈉（Na3PO4）、硫化鈉（Na2S）、硝酸（HNO3）均購自國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司；去離子水為研究組自制。

2.1.3 菌種及培養(yǎng) 大腸埃希菌 （E.coil）（廣東省微生物所菌種保藏中心）在LB液體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。

2.2 方法

2.2.1 測量納米銀的最低抑菌濃度 （MIC）采用對倍稀釋法，把96孔板LB培養(yǎng)基中加入不同形態(tài)的納米銀（銀立方體、銀納米線、準(zhǔn)球形顆粒）與大腸埃希菌液，以2倍稀釋法設(shè)定濃度，納米銀濃度設(shè)定為3～100 μg/mL，大腸埃希菌濃度為 1×103、1×104、1×105、1×106cfu/mL，將孔板放于37℃、200 r/min振蕩器中培養(yǎng)24 h，判定 MIC。

2.2.2 測定納米銀的殺菌效果 把大腸埃希菌懸浮液中加入2 mmol/L NaHCO3緩沖液以1∶10的比例稀釋，使得大腸埃希菌濃度為1×106cfu/mL，在離心管中以移液槍加入稀釋后的細(xì)菌液，在加入3種形態(tài)的納米銀，將其濃度設(shè)定為 3、6.25、12.5、25、50、100 μg/mL，并設(shè)置空白對照，對照組中未加入納米銀，其他成分則相同。樣品反應(yīng)時間為1 min，各取100 μL樣品接種在LB培養(yǎng)基中培養(yǎng)24 h（放于37℃恒溫?fù)u床），查看大腸埃希菌生長情況。

2.2.3 透射電鏡觀察 通過透射電鏡觀察納米銀與大腸埃希菌的接觸情況，步驟為：大腸埃希菌稀釋液中加入納米銀，納米銀濃度為100 μg/mL，取一滴混合液經(jīng)銅網(wǎng)固定2 min、濾紙吸去液體、經(jīng)磷鎢酸染色2 min后去掉多余染色液，在透射電鏡下觀察處理后的樣品。

2.3 結(jié)果

2.3.1 不同形態(tài)納米銀的MIC 納米銀能抑制大腸埃希菌的生長，且隨著大腸埃希菌濃度的增加，抑制其生長所需的納米銀的量增加，不同形態(tài)納米銀的MIC不同，銀立方體形態(tài)納米銀的MIC最小，即抑制細(xì)菌生長的能力最強(qiáng)，準(zhǔn)球形顆粒抑制細(xì)菌生長的能力次之，銀納米線MIC最大，即抑制細(xì)菌生長的能力最弱，結(jié)果如表3所示。

表3 不同形態(tài)納米銀的最低抑菌濃度（μg/mL）

2.3.2 納米銀的殺菌效果 將大腸埃希菌中加入不同形態(tài)納米銀進(jìn)行培養(yǎng)的結(jié)果中，隨著納米銀濃度的增加，對大腸埃希菌的抑制作用增強(qiáng)，3種形態(tài)納米銀對大腸埃希菌抑制能力不同，銀立方體的濃度為25 μg/mL時即能滅活大腸埃希菌，而準(zhǔn)球形顆粒濃度為100 μg/mL時使大腸埃希菌滅活，銀納米線濃度超過100 μg/mL時仍不能完全滅火大腸埃希菌，可見銀立方體的滅菌效果最優(yōu)，銀納米線滅菌效果最差，準(zhǔn)球形顆粒介于兩者之間，結(jié)果如圖1顯示。

圖1 不同形態(tài)納米銀培養(yǎng)皿中大腸埃希菌培養(yǎng)情況

2.3.3 不同形態(tài)納米銀與細(xì)菌混合后投射電鏡觀察結(jié)果 大腸埃希菌中沒有加入納米銀時，透射電鏡下觀察到大腸埃希菌表面并無多余的雜質(zhì)，其表面光滑、平整。在大腸埃希菌液中加入3種形態(tài)的納米銀后，大腸埃希菌表面不平整，吸附著不同形態(tài)的納米銀。透射電鏡顯示3種形態(tài)的納米銀與細(xì)菌的接觸情況不同，銀立方體與大腸埃希菌能有效接觸，兩者接觸面積大；球形納米銀能與大腸埃希菌有效接觸，兩者的接觸面積亦很大；銀納米線不能與大腸埃希菌有效接觸，兩者的接觸面積小。

3 討論

納米銀的制備方法大體分為物理方法、化學(xué)方法、生物方法[5]。物理法是把較大的單質(zhì)銀以物理學(xué)方法制備成納米大小的納米銀，有機(jī)械球磨法、蒸發(fā)冷凝法、霧化法等。其中機(jī)械球磨法的產(chǎn)物主要是納米銀顆粒，顆粒分布不均，純度低。據(jù)有關(guān)報道，低溫高能機(jī)械球磨法制備出了平均粒徑為20 μg的納米銀顆粒；蒸發(fā)冷凝法能夠制備清潔界面納米銀粉，有報道利用氣象冷凝法得到了懸浮的納米銀粉；霧化法的產(chǎn)物為粉劑，有報道利用霧化法制備出超細(xì)顆粒，粒徑在5～20 nm[6-7]?；瘜W(xué)法是利用化學(xué)反應(yīng)原理把銀離子還原成單質(zhì)銀，有化學(xué)還原法、微乳液法、溶膠-凝膠法等。其中化學(xué)還原法以水或有機(jī)溶劑將金屬鹽溶解，再通過還原劑或表面活性劑使粒子結(jié)晶后脫水，制備得到粉體，制備的成本低、產(chǎn)量大，條件易控制，可制備出5～30 nm大小的納米銀粒子；微乳液法是使兩種不相溶的溶劑混合成乳液，再從中析出固體成分，制備到納米粉體，制備到的納米顆粒多為球形，可制備6 nm的納米顆粒，粒徑均一；溶膠-凝膠法是利用特殊方法水解金屬化合物為溶膠、凝膠，然后處理得到納米粉體，產(chǎn)物粒度小、純度高[8-9]。生物方法是將生物材料天然合成納米微粒，采用的生物材料有龍眼葉、山茱萸、芳樟葉、梔子干粉、茶葉等，以其諸多優(yōu)點(diǎn)而成為近年來研究的熱點(diǎn)。鑒于納米銀的制備方法有多種，粒子形態(tài)也各異，且不同形態(tài)的納米銀性質(zhì)和殺菌性能不同，近年來的研究中提出了納米銀形貌的可控制備方法[10-11]。

20多年來，不同形態(tài)納米銀的制備有了很大發(fā)展，新的制備方法也克服了傳統(tǒng)方法中價格昂貴、純度不高等缺點(diǎn)，其中微波法以其操作簡單、制備速度快、產(chǎn)量多等優(yōu)點(diǎn)而備受關(guān)注，本研究借用前人的研究成果，并結(jié)合本研究組多年的研究經(jīng)驗(yàn)，通過控制微波法制備納米銀的條件來得到不同形貌的產(chǎn)物，對研究結(jié)果的分析如下：

首先，制備不同形態(tài)的納米銀是在熱力學(xué)與動力學(xué)中改變制備的條件來完成的，且沉淀性離子是考慮的條件之一，Cl-能通過控制使Ag+形成沉淀的速率來調(diào)控反應(yīng)的速率，而且Cl-通過與氧氣結(jié)合來控制對晶種的選擇，據(jù)此筆者研究不同NaCl的量對納米銀形態(tài)的影響，沒有NaCl或少量NaCl時產(chǎn)物中以準(zhǔn)球形納米銀顆粒為多，隨著NaCl量增多，非球形產(chǎn)物比例增加，球形顆粒比例減少，NaCl增加到5 mg時產(chǎn)物以銀納米線為多，可見控制Cl-的量能夠?qū)崿F(xiàn)對納米銀形態(tài)的控制[12-13]。

其次，由于納米銀晶體的生長是按照成核-聚集-生長過程進(jìn)行的，反應(yīng)時間的長短不同則納米銀形態(tài)亦不同。本研究通過控制微波中的反應(yīng)時間發(fā)現(xiàn)，在反應(yīng)時間為1.5 min時，產(chǎn)生不規(guī)則的納米銀顆粒，隨著時間的推延，產(chǎn)物中混有更多形態(tài)的納米銀顆粒，并逐漸出現(xiàn)納米銀棒，時間更長時產(chǎn)生長度更長的銀納米線，而納米銀顆粒的量逐漸減少，因此通過控制反應(yīng)的時間能調(diào)控納米銀顆粒和銀納米線的制備[14]。

鑒于PVP具有的空間位阻特性，能夠影響納米銀的分散性，控制納米銀的異性生長，據(jù)此考慮PVP加入量不同時對產(chǎn)物形態(tài)的影響，本研究在不加入PVP時得到不規(guī)則的納米銀顆粒，加入適量的PVP制備的產(chǎn)物以銀納米線為主，加入大量PVP時主要產(chǎn)生納米顆粒，可見PVP的加入量能夠影響納米銀的形態(tài)[15]。

納米銀是新型的殺菌材料，其殺菌效果強(qiáng)、廣譜且應(yīng)用安全，在殺菌領(lǐng)域具有不可估量的應(yīng)用價值，查閱相關(guān)報道，分析其殺菌機(jī)制為：銀能夠緊密地結(jié)合含硫或含磷的化合物，而在細(xì)胞膜上存在含硫的蛋白質(zhì)，納米銀結(jié)合硫蛋白后能夠吸附在細(xì)胞膜表面并累積于此，也可以穿透細(xì)胞膜抵達(dá)細(xì)胞內(nèi)部。相關(guān)研究也證實(shí)納米銀對細(xì)菌的殺滅作用是物理接觸與化學(xué)反應(yīng)共同作用完成的[16]。納米銀與細(xì)菌的物理接觸是限制性步驟，一旦接觸就會吸附在細(xì)胞膜表面，納米銀與細(xì)胞膜表面的含硫蛋白結(jié)合并反應(yīng)，導(dǎo)致細(xì)胞膜功能受損，通透性改變，細(xì)胞隨即死亡，因此，納米銀對細(xì)菌有抑制作用的重要機(jī)制是納米銀能夠直接接觸細(xì)菌表面[17]。

鑒于不同納米銀的性質(zhì)不同，其殺菌能力也有強(qiáng)弱差異，本次研究中為比較不同形態(tài)納米銀的殺菌能力，制備了銀立方體、準(zhǔn)球形顆粒、銀納米線3種形態(tài)納米銀，結(jié)果顯示不同形態(tài)納米線的殺菌性能有差異，比較3種形態(tài)納米銀的MIC，銀立方體的MIC最小，即殺菌效果最好，準(zhǔn)球形顆粒的MIC稍高，其殺菌效果稍弱，而銀納米線的MIC最高，亦即殺菌效果最弱[18-20]。通過透射電鏡觀察，分析不同形態(tài)納米銀的殺菌性能強(qiáng)弱不同的原因，是由于納米銀形態(tài)能夠影響其與細(xì)菌的接觸面積，銀立方體與球形顆粒能充分暴露接觸面，接觸更多的細(xì)菌，故殺菌性能強(qiáng)，而銀納米線的一維結(jié)構(gòu)減少了暴露面積，其殺菌性能相對弱。對于銀立方體與準(zhǔn)球形顆粒為何表現(xiàn)出不同的殺菌效果，就需要用納米銀的晶體結(jié)構(gòu)來解釋，現(xiàn)已經(jīng)明確銀立方體表面主要覆蓋{100}晶面，準(zhǔn)球形顆粒表面主要覆蓋{111}晶面，而γ{100}的表面能比γ{111}的表面能大，所以銀立方體的反應(yīng)活性更強(qiáng)，而具有較為穩(wěn)定的{111}晶面結(jié)構(gòu)的準(zhǔn)球形顆粒反應(yīng)活性稍弱，根據(jù)資料結(jié)果本研究推測，銀立方體的殺菌性能比準(zhǔn)球形顆粒的殺菌性能強(qiáng)是因?yàn)殂y立方體暴露有{100}晶面，反應(yīng)活性比暴露{111}晶面的準(zhǔn)球形顆粒強(qiáng)。

綜上所述，不同形態(tài)的納米銀其制備流程不同，在微波法制備納米銀過程中，改變反應(yīng)中所加NaCl的量、反應(yīng)的時間、反應(yīng)中PVP的量均能影響產(chǎn)物中納米銀的形態(tài)，據(jù)此，本研究可通過控制制備納米銀的材料或條件探究各種形態(tài)納米銀的最佳制備條件，來實(shí)現(xiàn)不同形態(tài)納米銀的可控制備。納米銀的形態(tài)不同則性質(zhì)不同，導(dǎo)致其與細(xì)菌接觸的有效面積大小也不同，則對細(xì)菌的滅活效果不同，本次研究的結(jié)果提示銀立方體的殺菌性能比準(zhǔn)球形顆粒強(qiáng)，準(zhǔn)球形顆粒的殺菌效果又優(yōu)于銀納米線，而對于改變殺菌試驗(yàn)中某一條件時對殺菌效果的影響，還需要進(jìn)一步的研究加以證實(shí)。

[1]蔡璇，魏源源，劉燕，等.飲用水化學(xué)消毒方法及其影響因素研究進(jìn)展[J].衛(wèi)生研究，2011，40（5）：660-663.

[2]LiWR，XieXB，ShiQS，etal.Antibacterialactivityandmechanism of silver nanoparticles on Escherichia coli[J].Applied Microbiology and Biotechnology，2010，85（4）：1115-1122.

[3]Schoen DT，Schoen AP，Hu L，et al.High speed water sterilization using one-dimensional nanostructures[J].Nano Letters，2010，10（9）：3628-3632.

[4]Xiu ZM，Zhang QB，Puppala HL，et al.Negligible particlespecific antibacterial activity of silver nanoparticles[J].Nano Letters，2012，12（8）：4271-4275.

[5]Suresh AK，Pelletier DA，Doktycz MJ.Relating nanomaterial properties and microbial toxicity[J].Nanoscale，2013，5（2）：463-474.

[6]Haase A，Arlinghaus HF，Tentschert J，et al.Application of laser postionization secondary neutral mass spectrometry/time-of-flight secondary ion mass spectrometry in nanotoxicology：visualization of nanosilver in human macrophages and cellular responses[J].ACS Nano，2011，5（4）：3059-3068.

[7]KimS，Ryu DY.Silver nanoparticle-induced oxidative stress，genotoxicity and apoptosis in cultured cells and animal tissues[J].Journal of Applied Toxicology，2013，33（2）：78-89.

[8]El Badawy AM，Silva RG，Morris B，et al.Surface chargedependent toxicity of silver nanoparticles[J].Environmental Science Technology，2010，45（1）：283-287.

[9]Yu SJ，Yin YG，Liu JF.Silver nanoparticles in the environment[J].Environmental Science：Processes&Impacts，2013，15（1）：78-92.

[10]孫檬茜，陳耀斌，李良超，等.無機(jī)抗菌劑的研究進(jìn)展[J].科技創(chuàng)新導(dǎo)報，2011，18（1）：20-21.

[11]韓秀秀，何文，田修營，等.銀系無機(jī)抗菌材料抗菌機(jī)理及應(yīng)用[J].山東輕工業(yè)學(xué)院學(xué)報，2010，24（1）：25-26.

[12]EI Badawy AM，Silva RG，Morris B，et al.Surface chargedependent toxicity of silver nanoparticles[J].Environmental Science Technology，2011，45（1）：283-287.

[13]Chernousova S，Epple M.Silver as antibacterial agent：ion，nanoparticle，and metal[J].Angewandte Chemie International Edition，2013，52（6）：1636-1653.

[14]Steinigeweg D，Schlücker S.Monodispersity and size control in the synthesis of 20-100 nm quasi-spherical silver nanoparticles by citrate and ascorbic acid reduction in glycerol-water mixtures [J].Chemical Communications，2012，48（69）：8682-8684.

[15]Li X，Lenhart JJ，Walker HW.Dissolution-accompanied aggregation kinetics of silver nanoparticles[J].Langmuir，2010，26（22）：16690-16698.

[16]劉芳.納米銀抗菌材料的制備及其抗菌性能研究[J].中國消毒學(xué)雜志，2012，29（12）：1089-1090.

[17]劉敏，胡嘉想，秦光和，等.納米銀抗菌凝膠劑的毒理學(xué)評價[J].中國消毒學(xué)雜志，2010，27（3）：260-261.

[18]Sosenkova LS，Egorova EM.The effect of particle size on the toxic action of silver nanoparticles [J].Journal of Physics：Conferences Series，2011，291（1）：210-211.

[19]湯京龍，王碩，劉麗，等.納米銀顆粒的細(xì)胞毒性作用及機(jī)制初探[J].北京生物醫(yī)學(xué)工程，2013，32（5）：485-489.

[20]黃念，林清，蘇永華，等.納米銀敷料治療燒傷創(chuàng)面的療效與安全研究進(jìn)展[J].北京生物醫(yī)學(xué)工程，2015，34（4）：427-431.