王秀玲，葉升鋒，桑華春（北京智云達(dá)科技有限公司，北京102200）

食品中山梨酸快速檢測方法研究

王秀玲，葉升鋒，桑華春*
（北京智云達(dá)科技有限公司，北京102200）

摘要：探討分光光度法測定食品中山梨酸含量的準(zhǔn)確性，為食品安全檢測提供高效快速準(zhǔn)確的方法。采用分光光度法測定了多種食品中山梨酸含量并進(jìn)行加標(biāo)回收率的驗(yàn)證，回收率可達(dá)90%～105%。結(jié)果證明該方法操作簡單、準(zhǔn)確性好、速度快、檢測成本低。

關(guān)鍵詞：分光光度法；山梨酸；食品

山梨酸及其鉀鹽是種良好的防腐劑，廣泛用于食品、化妝品、農(nóng)產(chǎn)品等行業(yè)。合理使用山梨酸及其鉀鹽能防止微生物的生長，有效延長保質(zhì)期。山梨酸和山梨酸鉀日允許量為25mg/kg[1]，食用過多會(huì)對人體造成傷害，破壞腸道正常菌群的平衡，影響體內(nèi)的新陳代謝[2-3]。嚴(yán)重時(shí)會(huì)抑制骨骼生長，危害腎、肝臟的健康[4-5]。因此，國家對食品中山梨酸的限量有嚴(yán)格的標(biāo)準(zhǔn)要求。食品中山梨酸的檢測方法主要有液相色譜法、氣相色譜法和薄層色譜法[6-10]，雖這些方法精確度高，重復(fù)性好，但是由于其操作復(fù)雜，專業(yè)要求嚴(yán)格，檢測成本高等缺點(diǎn)[11-12]，不宜廣泛推廣。根據(jù)山梨酸在一定條件下經(jīng)過化學(xué)反應(yīng)生成紅色衍生物這一原理，試驗(yàn)探討了分光光度法測定食品中的山梨酸。

1　原理及方法

1.1檢測原理

根據(jù)山梨酸及其鹽類在硫酸和重鉻酸鉀的氧化作用下產(chǎn)生丙二醛，丙二醛又和硫代巴比妥酸產(chǎn)生紅色衍生物。在一定范圍內(nèi)，其紅色的深度與丙二醛濃度呈正比，用PCS食品安全快速檢測儀測定其吸光值。

1.2儀器與試劑

1.2.1主要儀器

PCS多功能食品安全快速檢測儀：北京智云達(dá)科技有限公司；水浴鍋：金壇市光華儀器廠。

1.2.2試劑

重鉻酸鉀溶液、硫代巴比妥酸溶液、濃硫酸、山梨酸鉀：均為分析純；檢測樣品均為市購。

1.3操作步驟

1.3.1樣品前處理

固體樣品：固體樣品取可食部分將樣品粉碎后，取樣5 g加蒸餾水45mL，于組織搗碎機(jī)中搗成勻漿，稱取勻漿2 g于50mL試管中用蒸餾水定容至50mL，搖勻，過濾備用。

液體樣品：液體稱取5 g樣品（濃縮果汁取2.5 g加蒸餾水至5mL），加蒸餾水45mL直接混勻成混合液。稱取混合液2 g于50m L試管中用蒸餾水定容至50mL，搖勻，備用。

1.3.2顯色操作

吸取2 m L樣品處理液于10m L比色管中，加入2mL重鉻酸鉀溶液，蓋塞搖勻，沸水浴加熱7min，取出立即加入2mL硫代巴比妥酸法溶液，搖勻后繼續(xù)沸水浴10min，取出冷卻3min。

空白對照：空白管內(nèi)用2mL濃硫酸代替2mL重鉻酸鉀溶液，其余步驟與樣品處理相同。

1.3.3樣品測定

以空白管為對照，532 nm處測定各樣品的吸光值。

1.4標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

配制1 g/L的山梨酸標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液（以山梨酸計(jì)），混勻溶解后配制成 0.00、0.40、0.80、2.00、4.00、6.00、8.00mg/L的山梨酸標(biāo)液，取不同濃度標(biāo)液各2mL于10mL比色管中，然后加入2mL重鉻酸鉀溶液，蓋塞搖勻，沸水浴加熱7min，取出后立即加入2m L硫代巴比妥酸法溶液，搖勻后，繼續(xù)沸水浴加熱10min，取出冷卻3min，在532 nm處測定其吸光值。以山梨酸濃度為橫坐標(biāo)，吸光值為縱坐標(biāo)。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線如圖1。

圖1　標(biāo)準(zhǔn)曲線-山梨酸含量與吸光值關(guān)系Fig.1　Standard curveof the relationship of sorbic acid and its absorbance

2　測定條件的確定

2.1波長的選擇

用0.5mg/L的山梨酸標(biāo)準(zhǔn)溶液，加入山梨酸檢測試劑后，顯色處理。用PCS多功能食品安全檢測儀進(jìn)行光譜掃描，如圖2所示，生成的紅色衍生物在波長532 nm處具有巨大吸收峰。

圖2　溶液吸收光譜Fig.2　Absorption spectrum of solution

2.2顯色條件及穩(wěn)定性

經(jīng)大量試驗(yàn)測定，水浴溫度越高，反應(yīng)越充分，因此選取沸水浴；水浴時(shí)間在0～10min內(nèi)吸光值逐漸變大，10min后吸光值略有降低。且反應(yīng)后生成的紅色衍生物在室溫條件下可存放5 h。

2.3干擾因素排除

針對食品中主要共存物質(zhì)的影響作出試驗(yàn)，以±5%相對標(biāo)準(zhǔn)偏差作為判定標(biāo)準(zhǔn)，試驗(yàn)證明試樣中糖類、醇類、酸類、天然色素、糖精、苯甲酸、淀粉等存在時(shí)，其測定結(jié)果誤差均可控制在±5%，因此不會(huì)影響測定結(jié)果?？芍摲椒ǖ倪x擇性很好。

2.4檢出限的確定

檢出限用不含山梨酸的食品按照樣品處理方法提取20次，然后計(jì)算標(biāo)準(zhǔn)偏差（SD），求得檢出限（3· SD）：濃縮果蔬汁的檢出限為8mg/kg，其他食品的檢出限為4mg/kg。

3　樣品測定及加標(biāo)回收率的驗(yàn)證

試驗(yàn)選取了10種不同食品測定其山梨酸及其鉀鹽的含量，每種樣品稱取4份，每份為5 g，其中1份樣品不加標(biāo)液，另外3份分別按照0.50、1.00、1.50 g/kg水平[13-14]進(jìn)行加標(biāo)，然后按照樣品檢測方法進(jìn)行操作，根據(jù)吸光值計(jì)算其山梨酸含量，每種樣品3個(gè)平行，試驗(yàn)重復(fù)3次，測量值為平均值。然后計(jì)算精密度及回收率，結(jié)果見表1。

表1　精密度及加標(biāo)回收率驗(yàn)證試驗(yàn)（n=9）Table1　Resultsof precision and recoveries test（n=9）

由表1可知試驗(yàn)平均相對偏差為1.01%～2.99%，回收率可達(dá)90%～105%，由此可知該方法測定山梨酸精密度高，重現(xiàn)性好，回收率理想。這說明該方法測定山梨酸含量，結(jié)果準(zhǔn)確可靠。

4　結(jié)論與討論

使用PCS食品安全快速檢測儀測定食品中山梨酸含量是一種高效快速便捷的檢測方法。試驗(yàn)采用標(biāo)準(zhǔn)加入法，對10種食品中的山梨酸含量及加標(biāo)樣品進(jìn)行了測定，結(jié)果表明該方法測定結(jié)果精密度高，重現(xiàn)性好，回收率可達(dá)90%～105%，與傳統(tǒng)的氣相色譜和液相色譜相比，不僅簡化了操作過程，縮短了檢測時(shí)間，而且降低了檢測成本，實(shí)現(xiàn)了食品中山梨酸含量的準(zhǔn)確、便捷、快速檢測。同時(shí)該方法能夠適用于各種食品中山梨酸的檢測，滿足了食品安全快速檢測的需求。

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DOI：10.3969/j.issn.1005-6521.2015.22.039

收稿日期：2014-04-23

作者簡介：王秀玲（1986—），女（漢），碩士，主要從事食品安全快速檢測方法研究。

*通信作者：桑華春（1964—），女（漢），博士，研究員。

Study on the Rapid Detection of Sorbic Acid in Food

WANGXiu-ling，YESheng-feng，SANGHua-chun*
（Beijing Zhiyunda Science and Technology Co.，Ltd.，Beijing102200，China）

Abstract：Investigated theaccuracyofspectrophotometry to detectsorbic acid content in food，and provided an efficientand accuratemethod for the rapid detection of food safety.Tested sorbic acid contentofvariousof foods by the spectrophotometriy and investigated the recovery which was 90%-105%.The results showed that the method wassimple，high accurate，fastand low cost.

Keywords：spectrophotometry；sorbic acid；food