柳迎昭，彭輝勇，王麗，吳晨光，王勝軍

（江蘇大學(xué)附屬人民醫(yī)院1.內(nèi)分泌科，2.檢驗科，江蘇鎮(zhèn)江212002）

橋本甲狀腺炎患者外周血IL-23水平及意義

柳迎昭1，彭輝勇2，王麗1，吳晨光1，王勝軍2

（江蘇大學(xué)附屬人民醫(yī)院1.內(nèi)分泌科，2.檢驗科，江蘇鎮(zhèn)江212002）

目的：檢測橋本甲狀腺炎（HT）患者血漿IL-23和IL-17的水平，探討其臨床意義。方法采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELASA）檢測61例HT患者和37名健康對照者血漿IL-23和IL-17水平并分析二者相關(guān)性，同時分析IL-23與自身抗體的相關(guān)性。結(jié)果HT患者血漿IL-23和IL-17水平明顯高于健康對照者（P＜0.01），兩者存在顯著正相關(guān)（r=0.465 9，P=0.000 2）；甲狀腺功能減低的HT患者血漿中IL-23水平與其血清甲狀腺球蛋白抗體（TGAb，r= 0.392 9，P=0.012 1）、甲狀腺過氧化物酶抗體（TPOAb，r=0.334 7，P=0.034 8）水平存在正相關(guān)，而甲狀腺功能正常的HT患者血漿中IL-23水平與其血清TGAb（r=0.155 4，P=0.501 1）、TPOAb（r=-0.194 9，P=0.395 3）水平無明顯相關(guān)性。結(jié)論：IL-23在橋本甲狀腺炎發(fā)病中起重要作用。

橋本甲狀腺炎；白介素23；白介素17；Th17細胞

橋本甲狀腺炎（Hashimoto′s thyroiditis，HT）又稱慢性淋巴細胞性甲狀腺炎，是一種自身免疫性甲狀腺疾病，屬于器官特異性自身免疫病范疇，以體內(nèi)出現(xiàn)甲狀腺特異性自身抗體和甲狀腺淋巴細胞浸潤為主要特征，最終出現(xiàn)甲狀腺組織結(jié)構(gòu)破壞和甲狀腺功能低下［1］。Th17細胞是近年來發(fā)現(xiàn)的一種CD4+T細胞亞群，以產(chǎn)生細胞因子IL-17為特征，主要參與自身免疫性疾病的發(fā)生。已有研究表明Th17細胞及其細胞因子IL-17參與HT的發(fā)生或發(fā)展［2-3］。IL-23屬于IL-12家族成員，可以促進Th17細胞產(chǎn)生IL-17，Th17細胞分泌IL-17具有IL-23依賴性［4］。本文通過檢測HT患者外周血IL-23和IL-17水平，探討IL-23在HT發(fā)病中的作用及意義。

1 對象與方法

1.1 研究對象

61例HT患者均在本院初次獲診，其中女51例，男10例，平均年齡（42±15）歲。所有患者均經(jīng)臨床診斷及實驗室檢查證實［觸診彌漫性對稱性甲狀腺腫大，質(zhì)地較堅實；血清甲狀腺球蛋白抗體（TGAb）、甲狀腺過氧化物酶抗體（TPOAb）升高；甲狀腺B超顯示低回聲灶］。有6例患者經(jīng)甲狀腺細針穿刺獲得細胞學(xué)診斷。其中，甲狀腺功能正常（非甲減組）21例，甲狀腺功能減低（甲減組）40例，均未經(jīng)左甲狀腺素片（LT-4）及其他影響甲狀腺功能的藥物治療。對照組為健康體檢者，其中男4例，女33例，平均年齡（45±9）歲，無甲狀腺疾病、自身免疫性疾病及家族史。血清甲狀腺FT3、FT4、TSH、TGAb、TPOAb均正常（表1）。

表1 各組臨床參數(shù)的比較

1.2 方法

1.2.1 標(biāo)本的收集 使用K2EDTA抗凝管抽取HT患者及健康體檢者外周靜脈血2 mL，2 000 r/min離心5 min，收集上層血漿于無菌EP管中。

1.2.2 IL-23、IL-17的檢測 采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELASA）檢測血漿IL-23和IL-17的水平，ELISA檢測試劑盒為eBioscience公司產(chǎn)品，操作步驟按照說明書進行，檢測儀器為FLX 800酶標(biāo)儀（美國BioTek公司）。

1.2.3 血清甲狀腺抗體的檢測 采用免疫化學(xué)發(fā)光法檢測血清TGAb、TPOAb水平，化學(xué)發(fā)光分析儀LDX-800為美國Beckman Coulter公司產(chǎn)品。

1.3 統(tǒng)計學(xué)方法

采用GraphPad.Prism.V5.0作圖進行分析，采用SPSS 16.0進行統(tǒng)計學(xué)分析，數(shù)據(jù)按均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示，多組樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析，其中組間比較采用LSD-t檢驗，相關(guān)性分析采用Pearson分析方法，P＜0.05為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 各組患者血漿中IL-23和IL-17含量

本組HT患者血漿中IL-23和IL-17含量均明顯高于健康對照組（P＜0.01）。其中，甲減組和非甲減組血漿中IL-23、IL-17含量間差異無統(tǒng)計學(xué)意義。見圖1。

圖1 橋本甲狀腺炎患者血漿中IL-23和IL-17的含量

2.2 HT患者IL-23與IL-17水平的相關(guān)性

IL-23水平與IL-17水平相關(guān)性分析結(jié)果顯示，HT患者血漿中IL-23水平與IL-17水平呈顯著正相關(guān)（r=0.465 9，P=0.000 2）。見圖2。

圖2 橋本甲狀腺炎患者血漿中IL-23與IL-17相關(guān)性分析

2.3 IL-23含量與TGAb、TPOAb的相關(guān)性分析

甲減組患者血漿中IL-23含量與其血清TGAb（r=0.392 9，P=0.0121）、TPOAb（r=0.334 7，P= 0.034 8）水平存在正相關(guān)；非甲減組患者血漿中IL-23含量與其血清TGAb（r=0.155 4，P=0.501 1）、TPOAb（r=-0.194 9，P=0.395 3）水平無明顯相關(guān)性。見圖3。

3 討論

HT是一類臨床上常見的自身免疫性疾病，以體內(nèi)產(chǎn)生特異性甲狀腺自身抗體和甲狀腺淋巴細胞浸潤為主要特征。該病的發(fā)病機制尚不完全清楚，目前較為一致的觀點認為在遺傳易感因素與環(huán)境因素共同作用基礎(chǔ)上，機體免疫功能發(fā)生紊亂是導(dǎo)致發(fā)病的主要原因。

圖3 橋本甲狀腺炎患者血漿中IL-23水平與自身抗體水平的相關(guān)性分析

Th17細胞是近年來新發(fā)現(xiàn)的一種以產(chǎn)生IL-17為主的效應(yīng)性CD4+T細胞亞群，主要參與抗感染免疫、誘導(dǎo)炎癥發(fā)生及多種自身免疫性疾病的發(fā)病過程。

IL-17是Th17細胞的主要效應(yīng)因子，是一種致炎細胞因子，可以促進T細胞的激活并刺激內(nèi)皮細胞、上皮細胞、成纖維細胞產(chǎn)生多種細胞因子介導(dǎo)炎癥反應(yīng)，從而促進自身免疫性疾病等炎癥性疾病的發(fā)生。有研究顯示，IL-17在類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、多發(fā)性硬化癥等自身免疫性疾病患者體內(nèi)表達升高［5］。本研究結(jié)果顯示，HT患者血漿中IL-17水平高于健康對照組，與相關(guān)文獻報道相符［6-8］，說明IL-17與HT的發(fā)病相關(guān)。

Th17細胞的分化受多種細胞因子的調(diào)控，RORγt是Th17細胞的轉(zhuǎn)錄因子，在TGF-β和IL-6作用下，RORγt誘導(dǎo)na?ve T細胞IL-17基因的轉(zhuǎn)錄，使得na?ve T細胞向Th17細胞方向分化。近年來研究表明，IL-23在Th17細胞的分化中發(fā)揮重要作用［9］。IL-23是一種異源二聚體細胞因子，屬于IL-12家族成員，由p19、p40兩個亞單位組成，主要來源于抗原活化的樹突狀細胞。有研究表明，在IL-23缺乏情況下，TGF-β仍然可以誘導(dǎo)Th17細胞的產(chǎn)生。然而，進一步研究發(fā)現(xiàn)，缺乏IL-23的Th17細胞幾乎無法存活。由此可見，IL-23不是Th17細胞分化的必需因子，卻是Th17細胞存活、增殖的重要細胞因子［10-11］。IL-23在多種炎癥及自身免疫病中發(fā)揮重要作用［12-13］。

對自身免疫性疾病的研究多集中于Th17細胞，對IL-23的研究則較少。本研究結(jié)果顯示，橋本甲狀腺炎患者外周血中IL-23和IL-17水平明顯高于健康對照組，且兩者呈顯著正相關(guān)。吳漢妮等［14］研究發(fā)現(xiàn)橋本甲狀腺炎患者甲狀腺組織中IL-23和IL-17表達升高，提示IL-23在橋本甲狀腺炎的發(fā)病中起積極作用。IL-23可以促進Th17細胞IL-17與IL-22的產(chǎn)生，同時抑制IL-10和IFN-γ的產(chǎn)生，因此，IL-23有助于維持Th17細胞的表型［15］。結(jié)合我們前期研究結(jié)果［2］及其他文獻結(jié)果，進一步證實了IL-23在橋本甲狀腺炎發(fā)病的作用。

本研究結(jié)果還發(fā)現(xiàn)，甲狀腺功能正常的HT患者血漿IL-23水平與TGAb、TPOAb無明顯相關(guān)性，而甲狀腺功能減低的橋本甲狀腺炎患者血漿IL-23水平與TGAb、TPOAb存在正相關(guān)，提示IL-23可能促進了HT的發(fā)展，增加了抗原提呈細胞誘導(dǎo)的自身免疫反應(yīng)細胞的浸潤。Ruggeri等［16］、Figueroa-Vega等［17］等也報道了HT患者血漿IL-23水平與TGAb、TPOAb無明顯相關(guān)性，可能與納入的病例甲狀腺功能基本都是正常有關(guān)。有動物實驗研究表明［18］，針對IL-17和IL-23治療可明顯緩解自身免疫性疾病的病情，因此，拮抗IL-23可能為治療橋本甲狀腺炎等自身免疫性疾病提供新的思路。

綜上所述，橋本甲狀腺炎患者IL-23和IL-17水平升高且兩者存在正相關(guān)，提示IL-23在橋本甲狀腺炎發(fā)病中起重要作用，IL-23促進Th17細胞的增殖和IL-17的產(chǎn)生，導(dǎo)致甲狀腺自身免疫性炎癥的發(fā)生。

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Expression and significance of serum IL-23 in patients w ith Hashimoto′s thyroiditis

LIU Ying-zhao1，PENG Hui-yong2，WANG Li1，WU Chen-guang1，WANG Sheng-jun2
（1.Department of Endocrinology，2.Department of Clinical Laboratory，the Affiliated Hospital of Jiangsu University，Zhenjiang Jiangsu 212002，China）

Objective：To determine the levels of plasma interleukin-23（IL-23）and interleukin-17（IL-17），and analyze the clinical significance of them in patientswith Hashimoto′s thyroiditis（HT）.M ethods：Enzyme linked immunosorbent assay（ELISA）was used to analyze the concentration of plasma IL-23 and IL-17 in 61 HT patients and 37 healthy controls.Results：The concentration of plasma IL-23 and IL-17 was significantly elevated in the HT patients than the controls（P＜0.01）.A positive correlation was observed between the level of IL-23 and IL-17.The level of plasma IL-23 in hypothyroid patients with HT showed positive correlationswith the level of serum TGAb or TPOAb，but the correlation between the level of plasma IL-23 in euthyroid patients and the level of serum TGAb or TPOAb were not found.Conclusion：IL-23 may play an important role in the pathogenesis of HT.

Hashimoto′s thyroiditis；interleukin-23；interleukin-17；Th17 cells

R581.4

A

1671-7783（2015）04-0331-04

10.13312/j.issn.1671-7783.y140336

江蘇省衛(wèi)生廳醫(yī)學(xué)科研資助項目（H200952）；鎮(zhèn)江市社會發(fā)展資助項目（SH2013040）

柳迎昭（1970—），女，江蘇大豐人，副主任醫(yī)師，主要從事內(nèi)分泌疾病研究。

2014-12-26 ［編輯］ 陳海林