方宗壯，張小玲，潘曉威，趙振東，謝艷麗，章程輝

(1. 海南大學(xué) 食品學(xué)院，海南 ?？?70228;2. 海南大學(xué)分析測試中心，海南 海口570228)

苯醚甲環(huán)唑?qū)偃蝾悮⒕鷦?，由于其對蔬菜和瓜果等多種真菌性病害具有非常好的保護和治療作用，因此，近年來它在果樹、蔬菜、小麥、豆類、瓜類等作物中被廣泛使用. 苯醚甲環(huán)唑為低毒類物質(zhì)，將其直接噴灑于蔬菜、水果上，人長期低劑量的反復(fù)接觸可能會有蓄積作用而使人們易受其危害［1］.

目前，對食品中的苯醚甲環(huán)唑的檢測已多見于報道，對其檢測方法和檢測結(jié)果的要求也越來越高，故采取不確定度分析的方法，分析其測量過程中影響測量結(jié)果準確性的因素并對其改進是非常必要的［2－7］.

本文通過對采后芒果中苯醚甲環(huán)唑殘留量整個測定過程的監(jiān)控，運用不確定度分析的方法，找出了其測定過程中影響結(jié)果準確性的主要因素.

不確定度是指因系統(tǒng)影響或人為測量誤差的存在而導(dǎo)致被測量值不能確定的程度. 不確定度越小，被測值的測量結(jié)果與其真值就越接近;反之，測量結(jié)果與真實值的差別就越大.不確定度一方面可用于判斷被測值是否準確;另一方面可用于測量結(jié)果準確性之間的比較.本文采用測量不確定度來表示指南中的辦法確定的不確定度，其一般流程如下:

分析并確定不確定度來源 根據(jù)不確定度來源的性質(zhì)確定評定類別(A 或B 類) 按所屬類別評定方法評定標準不確定度 計算合成標準不確定度 確定擴展不確定度

1 材料和方法

1.1 材料與試劑 芒果采自海南省昌江縣芒果基地，品種為臺農(nóng)，藥品標樣為苯醚甲環(huán)唑標準品(純度大于98.5%)，由農(nóng)業(yè)部質(zhì)量標準研究所提供;實驗農(nóng)藥為w =10%的苯醚甲環(huán)唑水分散粒劑，由浙江世佳科技有限公司提供.

乙腈(分析純)，廣東光華化學(xué)廠有限公司;乙腈(色譜純)，Buridick ＆ Jackson;無水硫酸鎂(分析純)，廣州化學(xué)試劑廠;氯化鈉(分析純)，廣州化學(xué)試劑廠;PSA(乙二胺－N －丙基硅烷)孔徑6 nm，粒度45 μm，愛杰爾公司.

1.2 實驗儀器 安捷倫6890N 型電子俘獲氣相色譜儀，美國安捷倫公司;IKA MS3 渦旋器，德國IKA 公司;RV 10 旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，申生科技公司;H1650 高速離心機，湘儀離心機公司;食品料理機;AA.160 型電子天平，美國丹法公司;HS－840/HS－1300 超凈工作臺，蘇州尚田潔凈公司;高速勻漿分散機，德國IKA 公司;BD/BC－199VMQ 冰柜，美的電器.

1.3 苯醚甲環(huán)唑標準溶液的配制 標準母液:以萬分之一電子分析天平稱取0.010 00g 苯醚甲環(huán)唑標準品，用丙酮定容至10 mL，得到1 000.0 μg·mL－1的標準母液.保存于－18 ℃冰箱中，用時稀釋至相應(yīng)質(zhì)量濃度.

1.4 實驗儀器參數(shù) 色譜柱:安捷倫DB－1，30 m×0.25 mm ×0.25 μm;進樣口溫度:200 ℃;檢測器溫度:350 ℃;柱溫:210 ℃保持1 min，然后以10 ℃·min－1升至280 ℃保持8 min;分流比10∶1.

1.5 測定方法及步驟 將芒果樣的可食部分用刀切下，用九陽食物料理機攪碎、混勻，作為備用.然后切取不少于200 g 芒果全果，充分混勻高速勻漿2 min，制成待測試樣.

(1)提取:準確稱取5 g(準確到0.01 g)待測芒果樣品

取50 mL 的離心管，向其中加入10 mL 乙腈，混勻后再加入4 g 無水MgSO4和1 g NaCl，再混勻，于6 000 r·min－1離心5 min.

(2)凈化:取離心后上清液5 mL 添加到10 mL 離心管中，再加入100 mg PSA、500 mg 無水MgSO4，渦旋混勻1 min 后，6 000 r·min－1離心10 min，吸取4 mL 上清液，旋蒸至近干，加入2 mL 正己烷溶解，0.22 μm 濾膜過濾，待測.

1.6 數(shù)學(xué)模型

式中:W—試驗中被測農(nóng)藥的殘留量(mg·kg－1);ρ—標準溶液中農(nóng)藥的質(zhì)量濃度(mg·L－1);A—樣品溶液中目標物的峰面積;AS—農(nóng)藥標準溶液中目標物的峰面積;V1—提取溶劑的總體積(mL);V2—吸取出提取液的體積(mL);V3—樣品最后定容的體積(mL);m—試樣的質(zhì)量(g).

1.7 測量不確定度的來源分析 從檢測過程來分析，導(dǎo)致氣相色譜法測定采后芒果中苯醚甲環(huán)唑殘留量的不準確因素主要有標品濃度、樣品及標品的峰面積、樣品的處理方法以及稱量、測量、定容等方面［8］.

2 結(jié)果與分析

2.1 標液的質(zhì)量濃度ρ 引起的標準不確定度u(ρ) 標液的質(zhì)量濃度標準不確定度u(ρ)來源于標準品的稱量，在標準品溶液的配制過程，對各不確定度分量需分別進行評定，然后合成.

重復(fù)性誤差為± 0.000 1 g，則:

則天平稱量是造成的標準不確定度為:

相對不確定度:urel(m)=u(m)/m=0.029 6.

2.1.2 標品溶液配制過程造成的標準不確定度u(V )

2.1.2.1 標品溶液配制過程中量器校準造成的標準不確定度u1(V)標品溶液配制過程中使用了一系列的玻璃量器，根據(jù)檢定規(guī)程［9］，均有相應(yīng)的最大允許誤差，取計算各玻璃量器的標準不確定度(表1).

表1 量器校準造成的標準不確定度

2.1.2.2 標品溶液配制過程中因人讀數(shù)造成的標準不確定度u2(V)依據(jù)《化學(xué)分析中不確定度評估指南》，人員讀數(shù)允許有1% 的不確定性，即±0.01 的誤差，取計算各標準不確定度(表2).

表2 人員讀數(shù)造成的標準不確定度

2.1.2.3 標品溶液配制過程中造成的相對標準不確定度urel(V)(表3).

表3 定容稀釋造成的相對標準不確定度

2.1.3 標品濃度ρ 造成的相對標準不確定度［urel(ρ)］

庭園內(nèi)主要的建筑物都安排在同一個軸網(wǎng)系統(tǒng)內(nèi)，布置了方正的建筑之后，剩下不規(guī)則形狀的用地則通過安排石山、樹池、花池等配景去消解。樹池和花池的平面形狀在靠近建筑的一側(cè)，保持與建筑外墻平行或垂直。在不規(guī)則形狀的用地里，走道與花池使用了不規(guī)則的折線造型，修飾了不規(guī)則的用地形狀（圖16）。

由于urel(m)，uRel(V1)，uRel(V2)，uRel(V3)是互相獨立和互不相關(guān)的，故標品的濃度ρ 造成的相對標準不確定度:

2.2 樣品的峰面積A1造成的標準不確定度u(A1) 樣品峰面積的標準不確定度u(A)來源于氣相色譜儀的定量重復(fù)性.依據(jù)氣相色譜儀的檢定證書，其定量重復(fù)性小于2.0%，取得其相對不確定度為:

2.3 標準品的峰面積A2造成的標準不確定度u(As) 同2.2 法的分析，得標準品峰面積的標準不確定度urel(As)=0.011 54.

2.4 樣品處理過程中體積V 造成的標準不確定度V(v)和相對標準不確定度Vrel(v)

2.4.1 因量器校準造成的標準不確定度V1(v) 樣品處理過程中使用了一系列量器，均有最大允許誤差，取計算標準不確定度(表4).

表4 樣品處理過程中量器校準造成的標準不確定度

2.4.2 人員讀數(shù)造成的標準不確定度V2(v) 同2.1.2.2 方法的分析，得標準不確定度(表5).

表5 人員讀數(shù)造成的標準不確定度

2.4.3 樣品處理過程中體積V 造成的相對標準不確定度 由表6 可得:

表6 體積V 造成的相對標準不確定度

2.5 樣品稱樣量m 造成的標準不確定度u(m) 稱樣品5.00 g，電子天平檢定的最大允許誤差為±0.000 5 g ，故得:

重復(fù)性的誤差為± 0.000 1 g，得

則可得天平校準的標準不確定度和相對標準不確定度分別為:

2.6 樣品測量重復(fù)性造成的標準不確定度u(x) 稱3 份樣品，分別測定，測定結(jié)果如表7 .用極差法計算得:

表7 樣品重復(fù)性測量結(jié)果

2.7 樣品中加標回收率造成的標準不確定度u(R) 樣品的處理過程是非常復(fù)雜的，容易導(dǎo)致測量誤差，故采用空白加標測定的辦法.在回收率實驗中做3 份空白加標，分別測定，用極差法計算得:

表8 空白加標回收率測定結(jié)果

2.8 合成標準不確定度及擴展不確定度 相對合成標準不確定度為:

實驗所得采后芒果中苯醚甲環(huán)唑殘留量為0.002 5 mg·kg－1，則測量結(jié)果的合成標準不確定度為:u(x)=0.002 5 mg·kg－1× 0.037 8 =0.000 094 5 mg·kg－1;取k=2，則測量擴展不確定度為:U=2u(x)=2 ×0.000 094 5 mg·kg－1=0.000 189 mg·kg－1.

2.9 測量結(jié)果表示 采后芒果中苯醚甲環(huán)唑殘留量可表示為(0.002 5 ±0.000 189)mg·kg－1，k=2.

3 討 論

由于樣品的處理和配制過程嚴格按照實驗室的標準操作規(guī)程，并且實驗中所使用的儀器及玻璃器具皆屬高精密度用品，故樣品處理和配置過程中因轉(zhuǎn)移、稀釋、定容和因儀器精密度造成的不確定度可忽略不計.但整個評定過程中造成不確定度大的主要因素有標品濃度以及樣品和標品的峰面積，分析其原因，主要是由于廠家標品純度不高或標品配置后儲藏過久導(dǎo)致純度下降所致，還有氣象色譜儀柱效下降的問題，故可選用標品應(yīng)挑選質(zhì)量、純度更好的廠家，標品要現(xiàn)配現(xiàn)用.

4 結(jié) 論

通過對氣相色譜法測定采后芒果中苯醚甲環(huán)唑殘留量過程的監(jiān)測，得出影響其測量結(jié)果準確性的因素主要是標品的濃度，樣品和標品的峰面積，故測定采后芒果中苯醚甲環(huán)唑殘留量的過程中，應(yīng)對其足夠重視.

該方法同樣適用于氣相色譜法測定蔬菜、水果中其他農(nóng)藥殘留的測量不確定度評定，選擇恰當?shù)膶嶒灧椒ǎ?guī)范操作，完全可以降低測量的不確定度，保證實驗結(jié)果的準確、可靠性.

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