梁 勤， 石四箴

(同濟(jì)大學(xué)附屬兒童口腔醫(yī)學(xué)研究所，上海 200032)

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·臨床研究·

CRT@bacteria檢測幼兒齲病活躍性的研究

梁 勤， 石四箴

(同濟(jì)大學(xué)附屬兒童口腔醫(yī)學(xué)研究所，上海 200032)

目的 探討CRT@bacteria齲病活躍性檢測法反映幼兒患齲現(xiàn)狀及預(yù)測齲病進(jìn)展?fàn)顩r的作用。方法 以復(fù)旦大學(xué)上海醫(yī)學(xué)院幼兒園104名3歲幼兒為研究對象，連續(xù)3年行口腔檢查,連續(xù)兩年行CRT@bacteria齲病活躍性檢測(同時(shí)半定量檢測變形鏈球菌和乳桿菌)，分別記錄患齲率、齲補(bǔ)牙數(shù)(dft)和齲補(bǔ)牙面數(shù)(dfs)以及CRT-MS/LB等級分度。結(jié)果 CRT-MS/LB各度分布狀況在兩次檢測中無顯著性差異。CRT-MS/LB各度間患齲率、dft和dfs均有高度顯著性差異，與dft、dfs呈高度正相關(guān)性。CRT-MS/LB首檢各度與1～2年后的dft和dfs增量高度正相關(guān)。結(jié)論 CRT@bacteria檢測法能較準(zhǔn)確地反映幼兒患齲現(xiàn)狀，在預(yù)測齲病進(jìn)展方面有較好的可信性。與CRT-LB相比，CRT-MS在預(yù)測幼兒齲病進(jìn)展方面更準(zhǔn)確、更穩(wěn)定。

齲病活躍性； CRT@bacteria； 齲補(bǔ)牙數(shù)； 齲補(bǔ)牙面數(shù)

齲病活躍性檢測(caries activity test， CAT)是檢測個(gè)體與人群對齲病的敏感程度，并預(yù)測齲病發(fā)展的一種客觀的檢測方法。它是一種預(yù)報(bào)性檢測，特別在齲高危人群的篩選監(jiān)控上有一定的意義。該檢測法主要針對機(jī)體的易感性和口腔致齲菌，從菌斑、唾液和牙齒組織結(jié)構(gòu)等方面進(jìn)行研究分析。

變形鏈球菌(streptococcusmutans, MS)和乳酸桿菌(lactobacillus, LB)是目前公認(rèn)的主要致齲菌，在齲病的發(fā)生和發(fā)展中起重要作用。CRT@bacteria檢測法是通過同時(shí)半定量檢測唾液中變形鏈球菌和乳桿菌菌落數(shù)來判斷機(jī)體的齲活躍性，該方法在國內(nèi)開展的較少，特別是追蹤研究尚未見報(bào)道。

本研究采用CRT@bacteria檢測法對復(fù)旦大學(xué)上海醫(yī)學(xué)院幼兒園104名3歲幼兒同一個(gè)體的齲病活躍性進(jìn)行了為期3年的追蹤檢測，并與患齲狀況進(jìn)行分析，研究唾液中變形鏈球菌和乳桿菌菌落數(shù)在反映患齲狀況及預(yù)測齲病進(jìn)展方面的有效性和可靠性，為齲病防治提供信息。

1 資料與方法

1.1 一般資料

以復(fù)旦大學(xué)上海醫(yī)學(xué)院幼兒園104名3歲幼兒為研究對象(男53名，女51名)。所選幼兒身體健康，無全身系統(tǒng)性疾病，牙列均為完整乳牙列，近日無使用抗菌素史。

1.2 內(nèi)容與方法

對同一個(gè)體連續(xù)兩年進(jìn)行口腔臨床檢查和CRT@bacteria檢測(2007至2008年)，第3年(2009年)僅進(jìn)行口腔檢查。每年檢查及檢測開始前對檢查者進(jìn)行自身標(biāo)準(zhǔn)一致性檢驗(yàn)，Kappa值均>0.80。1.2.1 口腔檢查 每名幼兒均由本研究所一名富有經(jīng)驗(yàn)的兒童口腔?？漆t(yī)師進(jìn)行口腔檢查。在幼兒園教室人工光源下，使用口鏡和5號探針進(jìn)行齲齒檢查。齲蝕程度的檢查和記錄分為4度： 牙釉質(zhì)齲為1度牙本質(zhì)淺齲為2度牙本質(zhì)深齲或露髓為3度殘冠或殘根為4度。將檢查結(jié)果記錄在兒童口腔檢查表中，計(jì)算齲補(bǔ)牙數(shù)(dft)和齲補(bǔ)牙面數(shù)(dfs)。失牙數(shù)因失牙原因不明，未予統(tǒng)計(jì)。

檢測試劑盒由Ivoclar Vivadent Inc., Liech-tenstein生產(chǎn)，其專用附著板兩面分別覆蓋變形鏈球菌選擇性輕唾桿菌培養(yǎng)基(黑色)及乳酸桿菌選擇性Rogosa agar培養(yǎng)基(綠色)。

受試兒咀嚼特制蠟塊1min，使附著在牙面上菌斑中的菌落分離，混入唾液中以加強(qiáng)檢測效果。收集刺激性唾液于量杯中，用吸管將唾液均勻滴注于附著板的兩面(要求覆蓋整個(gè)板面)，置于37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)。48h后取出附著板，觀察變形鏈球菌和乳酸桿菌的菌落密集度，并與標(biāo)準(zhǔn)圖對比確定分度。

變形鏈球菌和乳酸桿菌菌落分度標(biāo)準(zhǔn)為，0度： <104CFU/ml；1度： 104～105CFU/ml；2度： 105～106CFU/ml；3度： >106CFU/ml。0度和1度列為齲活躍性低危；2度和3度列為齲活躍性高危。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

全部數(shù)據(jù)采用SPSS 17.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行處理，采用χ2檢驗(yàn)、方差分析、Spear-man等級相關(guān)分析及秩和檢驗(yàn)。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 CRT@bacteria各度在兩次檢測中之分布狀況

在兩次檢測中,CRT-MS/LB各度分布狀況差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(Z分別為-0.600、-0.645，P>0.05)，見表1。

2.2 CRT@bacteria各度的患齲狀況及相關(guān)性

隨著BT的逐漸完善和普及，近年來一些新研究不斷出現(xiàn)。Thomen等[17]在BT治療后40～104 d對7例患者進(jìn)行多次3He MRI檢查，發(fā)現(xiàn)肺通氣缺損與BT術(shù)后天數(shù)負(fù)相關(guān)，即肺通氣功能不斷改善。Kirby等[18]利用光學(xué)相干斷層掃描技術(shù)(OCT)對2例行BT的慢性持續(xù)哮喘患者進(jìn)行了2年隨訪，提示BT效果可能與氣管炎癥、膠原蛋白沉積及氣管壁厚度有關(guān)。Chakir等[19]對9例哮喘患者在術(shù)前和術(shù)后進(jìn)行了組織活檢，發(fā)現(xiàn)其氣管平滑肌和Ⅰ型膠原蛋白沉積厚度均減少，但因樣本量過小，癥狀改善與組織學(xué)改變的具體關(guān)聯(lián)尚需進(jìn)一步研究。

2007年CRT-MS結(jié)果顯示，各度間患齲率、dft和dfs差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=44.035，F(xiàn)=17.806，F(xiàn)=12.485，均P<0.01)，各度與dft和dfs高度相關(guān)(r=0.669，r=0.663，均P<0.01)；CRT-LB結(jié)果顯示，各度間患齲率、dft和dfs差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=35.467，F(xiàn)=33.325，F(xiàn)=26.759，均P<0.01)，各度與dft和dfs高度相關(guān)(r=0.669，r=0.650，均P<0.01)。2008年CRT-MS結(jié)果顯示，各度間患齲率、dft和dfs差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=38.001，F(xiàn)=23.365，F(xiàn)=16.981，均P<0.01)，各度與dft和dfs高度相關(guān)(r=0.657，r=0.654，均P<0.01)；CRT-LB結(jié)果顯示，各度間患齲率、dft和dfs差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=22.714，F(xiàn)=9.799，F(xiàn)=7.292，均P<0.01)，各度與dft和dfs高度相關(guān)(r=0.478，r=0.469，均P<0.01)，見表2。

2.3 CRT-MS首檢各度1、2年后新增患齲狀況及相關(guān)性

2007年CRT-MS首檢各度與1、2年后的dft和dfs增量均有高度顯著性差異(F=6.812，F(xiàn)=12.245，F(xiàn)=11.113，F(xiàn)=16.742，P<0.01)；各度與新增患齲狀況高度相關(guān)(r=0.441，r=0.492，r=0.556，r=0.584，P<0.01)。2008年CRT-MS首檢各度與1年后的dft和dfs增量均有高度顯著性差異(F=5.049，F(xiàn)=8.692，P<0.01)；各度與新增患齲狀況高度相關(guān)(r=0.360，r=0.516，P<0.01)，見表3。

2.4 CRT-LB首檢各度1、2年后新增患齲狀況及相關(guān)性

2007年CRT-LB首檢各度與1、2年后的dft和dfs增量均有高度顯著性差異(F=3.674，P<0.05；F=5.666，F(xiàn)=11.107，F(xiàn)=12.374，P<0.01)；各度與新增患齲狀況高度相關(guān)(r=0.414，r=0.449，r=0.525，r=0.566，P<0.01)。2008年CRT-LB首檢各度與1年后的dft增量、dfs增量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=3.060，P<0.05；F=4.290，P<0.01)；各度與新增患齲狀況均高度相關(guān)(r=0.263，r=0.347，P<0.01)，見表4。

表1 CRT@bacteria各度在兩次檢測中的分布Tab.1 The distribution of CRT degrees in two detections

表2 CRT@bacteria各度的患齲狀況Tab.2 The caries status in different degree of CRT@bacteria

表3 CRT-MS首檢各度1～2年后新增患齲狀況Tab.3 The caries increment 12 year later predicted by CRT-MS degrees at baseline

(續(xù)表3)

表4 首檢CRT-LB各度1～2年后的新增患齲狀況Tab. 4 The caries increment 1-2 year later predicted by CRT-LB degrees at baseline

3 討 論

CAT是一種反映患齲狀況并預(yù)測齲病進(jìn)展的試驗(yàn)，可用于個(gè)體或群體測定機(jī)體對齲病的敏感度，某些發(fā)達(dá)國家已成為口腔保健檢測的一部分。多年來，國外已開發(fā)出多種檢測齲活躍性的商品化試劑，雖然大多數(shù)齲活躍性檢測與患齲現(xiàn)狀有關(guān)，并在一定程度上可預(yù)測齲病敏感性，至今尚無一種非常理想的檢測法。

變形鏈球菌是公認(rèn)的主要致齲菌，在齲病的發(fā)生、發(fā)展中有著極其重要的作用。變形鏈球菌的產(chǎn)酸、耐酸性決定其能夠在菌斑的酸性環(huán)境中生存，并持續(xù)代謝產(chǎn)酸，發(fā)揮致齲作用。多數(shù)學(xué)者認(rèn)為乳酸桿菌不是齲病發(fā)生的初始致病菌,其致齲作用較弱，更多涉及牙本質(zhì)齲，在齲病發(fā)展過程中作用較大[1-2]。

唾液是口腔中不同組織和結(jié)構(gòu)的橋梁,唾液和菌斑的細(xì)菌之間存在微生態(tài)動力平衡[2]。研究表明,唾液中的變形鏈球菌和乳酸桿菌計(jì)數(shù)和菌斑中相對應(yīng)的致齲菌計(jì)數(shù)高度相關(guān)[2-3]。由于菌斑的采集和處理相對于唾液樣本要復(fù)雜，目前多數(shù)齲病活躍性檢測法以唾液為樣本。檢測唾液中變形鏈球菌和乳酸桿菌菌落數(shù)常用于評估個(gè)體或群體的齲病易感度。研究結(jié)果表明，兒童唾液中變形鏈球菌與乳酸桿菌計(jì)數(shù)與患齲狀況相關(guān)，特別是以變形鏈球菌計(jì)數(shù)作為預(yù)測指標(biāo)能較好地反映齲病進(jìn)展?fàn)顩r[4-7]。

本研究結(jié)果表明，MS和LB各度人數(shù)分布狀況在兩次檢測中無顯著性差異，表明群體齲活躍性之分布相對穩(wěn)定，其中齲病活躍性強(qiáng)者占少數(shù)，與以往報(bào)道相似[8]。CRT MS/LB各度間的患齲率、dft和dfs均有高度顯著性差異，且與dft、dfs高度相關(guān)，即菌落數(shù)越多，患齲狀況越嚴(yán)重，說明檢測唾液中變形鏈球菌和乳酸桿菌菌落數(shù)量能反映被檢測者之患齲嚴(yán)重程度和齲活躍性，與以往的研究結(jié)果相似[9-10]。

預(yù)測結(jié)果顯示，首檢SM各度與1、2年后的dft和dfs增量均有高度顯著性差異；首檢LB各度除與1年后的dft增量有顯著性差異外，其余均有高度顯著性差異。SM/LB首檢各度與1、2年后新增患齲狀況均高度相關(guān)，即首次檢測度數(shù)越高，1～2年后新增患齲狀況越嚴(yán)重，說明唾液中變形鏈球菌和乳桿菌計(jì)數(shù)與所預(yù)測的齲蝕嚴(yán)重程度相符合，在預(yù)測齲病進(jìn)展方面亦有較高的可靠性。

從與患齲狀況的相關(guān)程度上而言，LB略差于MS。乳酸桿菌雖是主要致齲菌，但對牙面的親和力低，在牙菌斑中所占比例很小，雖能產(chǎn)酸但總量少，難以造成大范圍脫礦破壞。因此在早期齲的發(fā)生中，乳桿菌不是主要致因素，其對早期齲預(yù)測的準(zhǔn)確性不如變形鏈球菌高[1,9]。

臨床工作中，對MS和LB檢測結(jié)果高危并伴有齲齒的兒童，應(yīng)當(dāng)積極進(jìn)行開放性齲齒的治療，局部使用氟化物。同時(shí)具體分析致齲的危險(xiǎn)因素，對患兒和家長重點(diǎn)進(jìn)行口腔衛(wèi)生宣教和飲食管理，降低齲病發(fā)病率。加強(qiáng)追蹤觀察，每3個(gè)月檢查1次。對檢測結(jié)果低危伴有齲齒者，除治療齲齒、局部用氟外，應(yīng)當(dāng)加強(qiáng)口腔衛(wèi)生宣教，建議每3個(gè)月檢查1次，無新發(fā)齲齒后可改為每6個(gè)月復(fù)查1次。對檢測結(jié)果低危無齲齒者，應(yīng)仍存在患齲風(fēng)險(xiǎn)，可在局部用氟、口腔衛(wèi)生宣教的基礎(chǔ)上，每6個(gè)月復(fù)查1次。

齲病是多因素作用的疾病，任何一種齲活躍性試驗(yàn)都不能同時(shí)反映微生物、宿主及食物等因素的變化。因此，臨床上應(yīng)選用多種齲活躍性檢測法，包括檢測菌斑或唾液中的致齲菌數(shù)、唾液的緩沖能力和流率等，同時(shí)綜合受檢者的既往齲病史、飲食喂養(yǎng)習(xí)慣、口腔衛(wèi)生習(xí)慣、社會經(jīng)濟(jì)地位等多種因素，才能較好的評判機(jī)體的齲活躍性，進(jìn)而采取有效的齲病防治措施。

CRT@bacteria檢測法操作簡單，能同時(shí)半定量檢測唾液中變形鏈球菌和乳酸桿菌菌落數(shù)，穩(wěn)定性好，能較好地反映幼兒患齲現(xiàn)狀，并能預(yù)測齲病進(jìn)展?fàn)顩r，對齲病的防治工作有一定的指導(dǎo)作用。

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Application of CRT@bacteria test in assessment of caries activity in preschool children

LIANGQin,SHISi-zhen

(Research Institute of Pediatric Dentistry, Tongji University, Shanghai 200032， China)

Objective To apply CRT@bacteria test in assessment of caries activity in preschool children. Methods One hundred and four children aged 3 years were examined for dental caries at baseline and successively for 2 years. CRT@bacteria test was performed for simultaneous detection ofstreptococcusmutans(MS) andlactobacilli(LB) in saliva at the 1st and 2nd years. Caries prevalence，mean dft and dfs were calculated. Results There were no significant differences in distribution rate of CRT degrees between two detections. There were highly positive correlations between CRT-MS/LB degrees and caries status (dft and dfs) in two detections. Highly positive correlations existed between CRT-MS/LB scores at baseline and the caries status (dft and dfs increment) 1-2 year later in two detections. Conclusion CRT@bacteria test is effective in reflecting the caries status and useful in predicting the caries risk in preschool children. CRT-MS is more accurate and stable in predicting the caries risk compared to CRT-LB.

caries activity； CRT@bacteria; dft; dfs

10.16118/j.1008-0392.2015.01.023

2014-05-29

梁 勤(1968—)，女，副主任醫(yī)師，碩士.E-mail： fxhshanghai@sohu. com

石四箴.E-mail： shisizhen@163.com

R 780.1

A

1008-0392(2015)01-0105-05