劉小花，李 影，陳華根，陳 濤，陳宇寧

（成都市新都區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川610500）

某院肺炎鏈球菌365株臨床分布及耐藥性分析

劉小花，李 影，陳華根，陳 濤，陳宇寧

（成都市新都區(qū)人民醫(yī)院檢驗(yàn)科，四川610500）

目的分析該院肺炎鏈球菌的臨床分布情況及耐藥性。方法回顧性分析2013年1月至2015年1月該院臨床分離的365株肺炎鏈球菌的耐藥性和臨床分布。采用肺炎鏈球菌培養(yǎng)與鑒定方法及藥敏試驗(yàn)。結(jié)果多種臨床標(biāo)本均可分離到肺炎鏈球菌，以痰標(biāo)本[83.56%（305/365）]和咽拭子標(biāo)本[14.52%（53/365）]為主；科室分布中以兒科[69.32%（253/365）]最高，其次為呼吸內(nèi)科[10.41%（38/365）]；肺炎鏈球菌對阿莫西林、復(fù)方新諾明、紅霉素、克林霉素、氯霉素、青霉素、四環(huán)素、頭孢噻肟、左氧氟沙星的耐藥率分別為5.21%（19/365）、84.93%（310/365）、99.73%（364/365）、96.44%（352/365）、11.78%（43/365）、4.66%（17/365）、90.14%（329/365）、4.11%（15/365）、0.82%（3/365），未發(fā)現(xiàn)對氨芐西林、利福平、頭孢呋辛、頭孢克洛、頭孢噻吩、萬古霉素、氧氟沙星耐藥菌株。結(jié)論該院肺炎鏈球菌對多種抗菌藥物耐藥，提示臨床應(yīng)合理使用抗菌藥物，并實(shí)時(shí)監(jiān)測肺炎鏈球菌耐藥情況。

鏈球菌，肺炎；微生物敏感性試驗(yàn)；抗藥性，細(xì)菌；抗菌藥

肺炎鏈球菌為革蘭染色陽性、菌體似矛頭狀、成雙或成短鏈狀排列的雙球菌，有毒菌株體外有化學(xué)成分為多糖的莢膜。5%～10%健康者上呼吸道攜帶該菌。有毒株是引起疾病的重要病原菌，是引起社區(qū)獲得性呼吸道感染的常見病原菌，也是導(dǎo)致醫(yī)院內(nèi)感染的常見致病原之一，其感染還可導(dǎo)致腦膜炎、中耳炎、菌血癥、鼻竇炎等疾病[1]。據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，肺炎鏈球菌對各類抗菌藥物的耐藥率不斷升高，且呈多重耐藥趨勢，給臨床治療帶來極大困難[2]。因此，作者分析了本院365株肺炎鏈球菌的耐藥情況，旨在更好地指導(dǎo)臨床合理用藥。

1 資料與方法

1.1 資料

1.1.1 菌株來源 選擇2013年1月至2015年1月本院門診與住院患者分離的肺炎鏈球菌365株，只篩選每例患者第一株菌。

1.1.2 儀器與試劑 梅里埃VITEK2-compactATB儀、哥倫比亞血平板、二氧化碳（carbon dioxide，CO2）培養(yǎng)箱、奧普托欣藥敏紙片、ATB STREP 5藥敏條等。采用肺炎鏈球菌ATCC14355標(biāo)準(zhǔn)菌株進(jìn)行質(zhì)控。

1.2 方法

1.2.1 肺炎鏈球菌培養(yǎng)與鑒定 將菌株接種在CO2孵箱中37℃培養(yǎng)18～24 h后挑取菌落細(xì)小、圓形、灰白色、表面光滑、半透明、邊緣整齊、初期扁平以后中心塌陷、呈現(xiàn)臍窩狀、直徑0.5～1.5 mm、周圍有草綠色溶血環(huán)的可疑菌落，再接種于血平板上貼上奧普托欣藥敏紙片后在CO2孵箱中37℃培養(yǎng)18～24 h，培養(yǎng)后若觀察在紙片周圍出現(xiàn)明顯抑菌環(huán)，且抑菌圈大于14 mm則判斷為肺炎鏈球菌，若抑菌圈小于14 mm時(shí)則進(jìn)行膽汁溶菌實(shí)驗(yàn)，若膽汁使菌落溶解則判斷為肺炎鏈球菌。

1.2.2 藥敏試驗(yàn) 將挑取的肺炎鏈球菌菌落加入ATB STREP 5藥敏試劑中培養(yǎng)18～24 h，用梅里埃VITEK2-compact ATB儀檢測該菌對各種抗菌藥物的耐藥情況。

2 結(jié) 果

2.1 菌株標(biāo)本來源分布 多種臨床標(biāo)本均可分離到肺炎鏈球菌，365株肺炎鏈球菌中來自痰標(biāo)本 305株（83.56%），咽拭子標(biāo)本53株（14.52%），血液標(biāo)本3株（0.82%），眼分泌物1株（0.27%），耳分泌物2株（0.55%），鼻腔分泌物1株（0.27%）。

2.2 科室來源分布 365株肺炎鏈球菌中來自兒科253株（69.32%），呼吸內(nèi)科38株（10.41%），神經(jīng)及心血管內(nèi)科17株（4.66%），門診1株（0.27%），普外科3株（0.82%），泌尿外科2株（0.55%），眼耳鼻咽喉科2株（0.55%），社區(qū)服務(wù)中心6株（1.64%），康復(fù)醫(yī)學(xué)科1株（0.27%），重癥醫(yī)學(xué)科 19株（5.21%），消化內(nèi)科 6株（1.64%），中醫(yī)科4株（1.10%），內(nèi)分泌/腎病/血液內(nèi)科9株（2.47%），內(nèi)科綜合病區(qū)4株（1.10%）。

2.3 對16種抗菌藥物的耐藥性 肺炎鏈球菌對多種抗菌藥物產(chǎn)生了高耐藥性，對紅霉素、克林霉素、四環(huán)素耐藥率高達(dá)90.00%以上，對阿莫西林、青霉素、頭孢噻肟、左氧氟沙星仍有較好的敏感性，耐藥率小于10.00%，未發(fā)現(xiàn)對氨芐西林、利福平、頭孢呋辛、頭孢克洛、頭孢噻吩、萬古霉素、氧氟沙星耐藥的菌株，見表1。

表1 對16種抗菌藥物的耐藥性（n=365）

續(xù)表1 對16種抗菌藥物的耐藥性

3 討 論

肺炎鏈球菌是肺炎、腦膜炎、中耳炎及血流感染的常見病原菌，據(jù)估算全球每年肺炎鏈球菌感染約1 450萬例次，其中中國約170萬例次。隨著近年來抗生素的廣泛使用，肺炎鏈球菌耐藥現(xiàn)象也日益嚴(yán)重，尤其是耐藥率上升最為迅速。

本研究回顧性分析了肺炎鏈球菌對抗菌藥物的耐藥情況、臨床分布和標(biāo)本來源。從藥敏試驗(yàn)結(jié)果看，肺炎鏈球菌耐藥現(xiàn)象較嚴(yán)重，以紅霉素、克林霉素、四環(huán)素為主，提示紅霉素和四環(huán)素已不是治療肺炎鏈球菌的有效藥物。肺炎鏈球菌對青霉素的耐藥率在不同地區(qū)存在一定差異，全國細(xì)菌耐藥性監(jiān)測網(wǎng)報(bào)道的耐藥率為56.90%[3]，李坤霞等[4]報(bào)道，煙臺地區(qū)肺炎鏈球菌對青霉素耐藥率高達(dá)56.30%，何國才[5]報(bào)道，桂林市兒童感染肺炎鏈球菌對青霉素耐藥率達(dá)到52.60%，梁軍兵等[6]報(bào)道，上海地區(qū)肺炎鏈球菌對青霉素耐藥率為26.60%，而本研究結(jié)果顯示，肺炎鏈球菌對青霉素耐藥率為4.66%，遠(yuǎn)低于煙臺、桂林、上海等地。此外未發(fā)現(xiàn)對萬古霉素耐藥的菌株，與多數(shù)文獻(xiàn)報(bào)道一致[7-10]。而抗菌藥物的廣泛使用是肺炎鏈球菌對多種抗菌藥物產(chǎn)生高耐藥性的主要原因?；颊咴谑褂每咕幬镏委熎陂g，暴露于亞抑菌濃度的一些肺炎鏈球菌基因突變頻率增加而出現(xiàn)超突變表型[11]，超突變可以讓肺炎鏈球菌有更強(qiáng)的選擇性優(yōu)勢，以便其迅速積累突變，應(yīng)對抗菌藥物的外界環(huán)境壓力；其次為肺炎結(jié)合疫苗（pneumoniae conjugate vaccine，PCV）對耐藥性的影響，國外一項(xiàng)在美國監(jiān)測8所醫(yī)院所有兒科侵襲性肺炎鏈球菌疾病（invasive pneumococcal disease，IPD）案件的前瞻性監(jiān)測研究發(fā)現(xiàn)，1994～2000年青霉素不敏感肺炎鏈球菌（penicillin nonsensitive streptoccus pneumoniae，PNSP）發(fā)生率逐年提高，引入PCV7年后，2001年P(guān)NSP發(fā)生率穩(wěn)定于45.00%，2002年下降至33.00%[12]。可見近年來，肺炎鏈球菌對抗菌藥物耐藥性的增加取決于多方面的原因，但最應(yīng)該做的是解決抗菌藥物濫用的問題，不讓肺炎鏈球菌有積累突變的機(jī)會，而對氨芐西林、利福平、頭孢呋辛、頭孢克洛、頭孢噻吩、萬古霉素、氧氟沙星仍表現(xiàn)出較佳的抗菌活性，因此，可將該類抗菌藥物作為肺炎鏈球菌感染的臨床治療藥物。

根據(jù)菌株標(biāo)本來源分析，365株肺炎鏈球菌中來自痰標(biāo)本305株（83.56%），咽拭子標(biāo)本53株（14.52%），與國家耐藥性監(jiān)測中心的相關(guān)報(bào)道相似[13]。

根據(jù)科室分布分析，兒科最高[253株（69.32%）]，其次為呼吸內(nèi)科[38株（10.41%）]。肺炎鏈球菌在兒科的感染率高是因?yàn)榉窝祖溓蚓鳛橐环N條件致病菌，常定植于鼻咽部黏膜，特別是嬰幼兒攜帶率高，當(dāng)機(jī)體免疫力低下時(shí)有致病力的肺炎鏈球菌乘機(jī)侵入，可引起肺炎、中耳炎、腦膜炎、菌血癥等疾病[14]。因此，應(yīng)積極預(yù)防，增強(qiáng)體質(zhì)，保持室內(nèi)通風(fēng)，積極防治貧血、營養(yǎng)不良及佝僂病等，注意衛(wèi)生，避免交叉感染；可以預(yù)防接種。呼吸內(nèi)科比例也相對較高，當(dāng)機(jī)體抵抗力下降時(shí)肺炎鏈球菌?？汕秩敕谓M織引起肺炎，尤其在冬春季節(jié)，健康者鼻咽部?？膳囵B(yǎng)出肺炎鏈球菌，因此，呼吸道也常會受到肺炎鏈球菌的感染，應(yīng)積極預(yù)防或進(jìn)行免疫預(yù)防以降低呼吸道肺炎鏈球菌感染率。

綜上所述，目前，本院肺炎鏈球菌耐藥狀況不容樂觀，但肺炎鏈球菌仍對部分抗菌藥物敏感，因此，可選用這些抗菌藥物作為治療肺炎鏈球菌感染的臨床藥物，此外，為避免肺炎鏈球菌會對更多的抗菌藥物耐藥，減少對抗菌藥物的濫用是必不可少的，并且在以后的工作中做好對肺炎鏈球菌的鑒定、培養(yǎng)和藥敏試驗(yàn)工作，應(yīng)根據(jù)藥敏試驗(yàn)結(jié)果合理使用抗菌藥物。

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10.3969/j.issn.1009-5519.2015.17.034

B

1009-5519（2015）17-2651-02

2015-06-27）

四川省衛(wèi)生廳科研課題（130534）；成都市新都區(qū)社會事業(yè)科技計(jì)劃項(xiàng)目（2014.07）。

劉小花（1986-），女，四川內(nèi)江人，碩士研究生，主要從事臨床微生物學(xué)、分子生物學(xué)的研究；E-mail：rvaw@qq.com。