IFN-γ水平的檢測及臨床意義

楊 浩，李 蕊

(湖北省鄂州市鄂鋼醫(yī)院，湖北 鄂州436000)

哮喘患兒體內(nèi)EOS、IgE、IL-4及

IFN-γ水平的檢測及臨床意義

楊 浩，李 蕊

(湖北省鄂州市鄂鋼醫(yī)院，湖北 鄂州436000)

目的 探討哮喘患兒體內(nèi)嗜酸性粒細胞(eosinophil，EOS)、免疫球蛋白E(IgE)、白介素4(IL-4)及γ干擾素(IFN-γ)水平的檢測及臨床意義，為臨床疾病的診斷和治療提供依據(jù)。方法 抽選湖北省鄂州市鄂鋼醫(yī)院2012年11月至2013年6月收治的95例哮喘患兒(哮喘組，其中急性發(fā)作期47例、緩解期48例)，并抽選同期在本院體檢的79例健康患者為對照研究(健康組)，采用肺功能儀測定兩組的肺功能，并采用痰液誘導、酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)分別測定患兒痰液中的EOS百分率及血清中IgE、IL-4、IFN-γ水平。結(jié)果 哮喘組患兒的1秒用力呼氣容積(FEV1)/用力肺活量(FVC)的比值(FEV1%)為(69.67±6.63)%，明顯低于健康組的(102.27±11.93)%，差異具有統(tǒng)計學意義(t=22.750，P<0.001)；哮喘組患兒的FEV1占預計值百分比為(70.45±9.62)，明顯低于健康組的(90.13±6.34)，差異有統(tǒng)計學意義(t=15.582，P<0.001)。哮喘組患兒的痰EOS百分率、血清中IgE、IL-4水平均高于健康組(t值分別為321.962、82.644、76.913，均P<0.05)，哮喘組患兒的IFN-γ水平明顯低于健康組(t=30.207，P<0.001)。急性發(fā)作期哮喘患兒的痰EOS百分率及血清中IgE、IL-4水平均高于緩解期哮喘患兒的(t值分別為15.752、40.762、31.162，均P<0.05)，急性發(fā)作期哮喘患兒的IFN-γ水平明顯低于緩解期哮喘患兒的(t=35.892，P<0.05)。結(jié)論 血清中IL-4、IgE水平及痰液中EOS百分率升高、血清IFN-γ水平降低，與哮喘的發(fā)生、發(fā)展密切相關，對其治療及病情判斷具有重要價值。

哮喘；免疫球蛋白E；嗜酸性粒細胞；急性發(fā)作期；白介素4；干擾素γ

支氣管哮喘(以下簡稱哮喘)是臨床常見的兒科呼吸道疾病，是由淋巴及肥大細胞、嗜酸性粒細胞(eosinophil，EOS)等多種細胞因子參與的一種變態(tài)多發(fā)性炎癥疾病[1-2]?；純簹獾朗芏喾N炎癥因子刺激，其反應性明顯增高，并伴有反復喘息、氣流受限、咳嗽等臨床表現(xiàn)[3]。哮喘發(fā)病機制極為復雜，研究認為其與炎癥反應、免疫調(diào)節(jié)紊亂、突發(fā)感染及遺傳等因素均存在顯著的相關性[4]。本研究抽選95例哮喘患兒為研究對象，測定其體內(nèi)EOS、免疫球蛋白E(IgE)、白介素4(IL-4)及干擾素γ(IFN-γ)水平對于預測病情及判斷診治療效的臨床意義，現(xiàn)報道如下。

1 資料和方法

1.1 臨床資料

選取湖北省鄂州市鄂鋼醫(yī)院2012年11月至2013年6月收治的95例哮喘患兒(哮喘組，其中急性發(fā)作期47例、緩解期48例)，所有患者均符合中華醫(yī)學會兒科學分會《兒童支氣管哮喘診斷與防治指南》[5]的診斷標準；其中男65例，女30例，年齡2～11歲，平均(5.5±2.7)歲。并同期選取在本院體檢的79例健康患者為對照研究(健康組)，其中男45例，女34例，年齡3～10歲，平均(5.8±2.6)歲。兩組患兒均無心、肺、肝、腎等臟器的器質(zhì)性病變，排除存在自身免疫性疾病的患者，近期均未服用過對EOS、IgE、IL-4及IFN-γ水平有影響的藥物。本研究取得患兒及其家屬同意，并獲得本院倫理委員會同意。兩組在性別比(χ2=2.436，P=0.119)、平均年齡(t=0.742，P=0.229)等一般資料的比較差異無顯著性(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 肺功能測定

采用德國康訊肺功能儀肺功能測定1秒用力呼氣容積(FEV1)/用力肺活量(FVC)的比值(FEV1%)及FEV1占預計值的百分比。

1.2.2 痰液誘導及痰液標本制備

痰液誘導：兩組均吸入200μg劑量的沙丁胺醇，10分鐘后，對于能自行咳痰者，進行口鼻清理后，收集其痰液標本；對于無痰或痰少者，清理口鼻后，采用超聲霧化器將3%的高滲生理鹽水霧化吸入，時長10～20分鐘，然后再收集其痰液標本。霧化過程中若有明顯氣急、胸悶等癥狀應立即停止霧化。

痰液標本制備：將4倍體積的0.1%二硫蘇糖醇加入到痰液中，震蕩30分鐘使其充分混勻，再加入4倍體積的磷酸鹽緩沖溶液。紗布過濾后離心10分鐘(2 000rpm)制成細胞懸液，然后采用臺盼藍染色進行細胞計數(shù)。將鱗狀上皮細胞>10個的標本棄除，計算出痰液中EOS百分率。

1.2.3 血清收集及檢測

抽取兩組患兒3mL的清晨空腹靜脈血，置于室溫放半小時后再離心15分鐘(3 000rpm轉(zhuǎn)速，4℃)，將血清分離出來后置于-80℃的溫箱中保存待檢。采用ELISA檢測IgE、IL-4及IFN-γ水平，嚴格按試劑盒說明書操作。

1.3 統(tǒng)計學方法

2 結(jié)果

2.1 哮喘患兒組與健康組肺功能比較

哮喘組患兒的FEV1%及FEV1占預計值的百分比明顯低于健康組(P<0.001)，見表1。

2.2 哮喘患兒與健康組各指標比較

哮喘組患兒的痰EOS百分率、血清中IgE、IL-4水平明顯高于健康組(P<0.001)；IFN-γ水平明顯低于健康組(P<0.001)，見表2。

2.3 哮喘急性發(fā)作期與緩解期各指標變化

與緩解期哮喘患兒相比，急性發(fā)作期血清中IgE、IL-4水平及痰EOS百分率顯著升高(P<0.001)；IFN-γ水平明顯降低(P<0.001)，見表3。

Table 1 Comparison of lung function between asthma group and healthy group

組別例數(shù)(n)IgE(ng/L)IL-4(IU/mL)IFN-γ(ng/L)EOS百分率(%)哮喘組95252.32±16.1335.83±2.2542.35±6.596.39±0.12健康組7966.12±13.019.32±2.2872.64±6.580.28±0.13t82.64476.91330.207321.962P<0.001<0.001<0.001<0.001

表3 哮喘急性發(fā)作期與緩解期痰EOS百分率及血清中IgE、IL-4、IFN-γ變化 Table 3 Changes of sputum EOS percentage, serum IgE, IL-4 and IFN-γ at acute exacerbation phase and at remission phase

3 討論

3.1 哮喘的炎癥反應機制

哮喘是臨床常見的慢性兒科呼吸系統(tǒng)疾病，以氣道阻塞、炎癥及高反應性為臨床特征。發(fā)病機制極為復雜，涉及肥大、淋巴以及中性粒細胞，EOS，氣道上皮細胞等一系列細胞因子，IgE，以及多種炎癥因子的參與。哮喘發(fā)作時常呈現(xiàn)多種炎癥基因水平升高或異常，并可通過炎癥反應及免疫應答，導致免疫因子合成、分泌失調(diào)，機體免疫功能紊亂。

IgE是一種可介導Ⅰ型變態(tài)反應的免疫球蛋白，可特異性與EOS、肥大等細胞膜上受體結(jié)合，再次接觸到相同抗原后，便可激活上述細胞，從而釋放大量炎癥性介質(zhì)，致使靶細胞功能改變，引發(fā)過敏性疾病[6-7]。IL-4是由Th2細胞分泌，是一種特異性的IgE誘導劑，能夠活化靜止的B細胞，使其產(chǎn)生特異性IgE，還能使血管內(nèi)皮細胞黏附分子高表達，導致EOS選擇性的聚集于炎癥部位，引發(fā)氣道炎癥反應。IFN-γ能夠促進Th1細胞分化，而對Th2細胞分化具有抑制作用，使兩個細胞亞群處于平衡狀態(tài)，從而有效控制哮喘患者的氣道炎癥反應[8]。因此，臨床可以通過提高患者IFN-γ表達來達到抑制IL-4活性，降低體內(nèi)IgE水平，從而阻斷哮喘患者的早期發(fā)病，預防和改善哮喘患者的臨床癥狀。

3.2 哮喘患兒體內(nèi)嗜酸性粒細胞、免疫球蛋白E、白介素4及干擾素γ水平的變化

本研究結(jié)果顯示，哮喘組患兒的痰EOS百分率、血清中IgE、IL-4水平明顯高于健康組(P<0.001)；IFN-γ水平明顯低于健康組(P<0.001)。與緩解期哮喘患兒相比，急性發(fā)作期血清中IgE、IL-4水平及痰EOS百分率顯著升高(P<0.001)；IFN-γ水平明顯降低(P<0.001)。這說明EOS、IgE、IL-4與哮喘氣道重構(gòu)存在顯著的內(nèi)關聯(lián)性，其表達增加可能是哮喘患者氣道重構(gòu)的病理機制，其中嗜酸性粒細胞是參與I型變態(tài)反應的主要細胞之一，首次接觸過敏原時，機體產(chǎn)生的免疫球蛋白IgE與EOS結(jié)合使之致敏，當再次接觸相同的過敏原時這些致敏的EOS就會釋放出大量的炎性介質(zhì)，在趨化因子作用下產(chǎn)生氣道高反應和慢性炎癥，這是EOS參與哮喘發(fā)病的病理基礎。而哮喘患兒分泌減少，不能有效抑制IL-4活性，降低體內(nèi)IgE、EOS水平，可能是引起或加重哮喘患者氣道炎癥反應的原因之一。血清中IL-4、IgE水平及痰液中EOS在氣管哮喘的發(fā)病機制中擔任著不同的角色，起著不同的作用且關系密切。

綜上所述，血清中IL-4、IgE水平及痰液中EOS百分率升高、血清IFN-γ水平降低，與哮喘的發(fā)生、發(fā)展密切相關，對其治療及病情判斷具有重要價值。

[1]楊磊,黃洋,周小勤,等.武漢地區(qū)兒童支氣管哮喘患病率及危險因素調(diào)查[J].中華實用兒科臨床雜志,2013,28(21):1622-1624.

[2]安濤,郭曉清.哮喘患兒血清TNF、IL-8、IgE的動態(tài)變化及其臨床意義[J].臨床軍醫(yī)雜志,2010,38(l):107-109．

[3]杭金國,姚澤忠,管敏昌,等.臺州地區(qū)支氣管哮喘患兒過敏原特異性IgE檢測分析及臨床意義[J].檢驗醫(yī)學,2011,9(5):42.

[4]吳紅梅,于瑩,張莉.支氣管哮喘患兒血清總IgE、TNF-α檢測及其臨床意義[J].中國實驗診斷學,2010,4(8):1244-1245.

[5]中華醫(yī)學會兒科學會呼吸學組,《中華兒科雜志》編輯委員會.兒童支氣管哮喘診斷與防治指南[J].中華兒科雜志,2008,46(10):745-753.

[6]Ma C, Ma Z, Fu Q,etal. Anti-asthmaticeffects of baicalin in a mouse model of allergic asthma[J].Phytother Res,2014,28(2):231-237.

[7]Kim H B, Jin H S, Lee S Y,etal. The effect of rush immunotherapy with house dust mite in the production of IL-5 and IFN-gamma from the peripheral blood T cells of asthmatic children[J]. J Korean Med Sci,2009,24(3):392-7.

[8]Brightling C, Berry M, Amrani Y. Targeting TNF-alpha: A novel therapeutic approach for asthma[J]. J Allergy Clin Immunol,2008,121(1):5-10.

[專業(yè)責任編輯：侯 偉]

Detection of EOS, IgE, IL-4 and IFN-γ levels and its clinical significance in children with asthma

YANG Hao, LI Rui

(EzhouofHubeiProvinceEgangHospital,HubeiEzhou436000,China)

Objective To detect the levels of eosinophil (EOS), IgE, IL-4 and IFN-γ in children with asthma and explore their clinical significance, so as to provide basis for clinical diagnosis and treatment of the disease. Methods Totally 95 children with asthma admitted in Ezhou of Hubei Province Egang Hospital from November 2012 to June 2014 were selected (asthma group, including 47 cases at acute exacerbation phase and 48 cases at remission phase),and 79 patients undergoing health medical examination in the hospital at the same period were selected (healthy group). The lung function was measured in both groups by lung function instrument, and sputum inductin and enzyme linked immunosorbent assay (ELISA) were used for the determination of EOS percentage in sputum, IGE, IL-4 and IFN-γ levels. Results FEV1 % in the asthma group (69.67±6.63%) was significantly lower than that in the healthy group (102.27±11.93%), and the difference was significant (t=22.750,P<0.001), and percentage of FEV1 of expected value in the asthma group (70.45±9.62) was lower than that in the healthy group (90.13±6.34) with significant difference (t=15.582,P<0.001). Sputum EOS percentage, serum IgE and IL-4 levels in the asthma group were higher than those in the healthy group (tvalue was 321.962, 82.644 and 76.913, respectively, allP<0.05), but IFN-γ level was significantly lower (t=30.207,P<0.001). Sputum EOS percentage, serum IgE and IL-4 levels in asthma children at acute exacerbation phase were higher than those of children at remission phase (tvalue was 15.752, 40.762 and 31.162, respectively, allP<0.05), but IFN-γ level was significantly lower at acute exacerbation phase (t=35.892,P<0.05). Conclusion The high levels of IL-4 and IgE, high EOS percentage in sputum, and low level of serum IFN-γ are closely related with the occurrence and development of asthma, which are important in treatment and judging disease.

asthma; IgE; eosinophil (EOS); acute exacerbation; IL-4; IFN-γ

2014-09-23

楊 浩(1977-)，男，主治醫(yī)師，主要從事兒科臨床工作。

李 蕊，副主任醫(yī)師。

10.3969/j.issn.1673-5293.2015.03.062

R725.6

A

1673-5293(2015)03-0573-03