劉 娜,尹艷清,周樹(shù)婭,馬小麗,王丁丁,李 良,楊麗娟

(1.云南民族大學(xué) 教育部民族藥資源化學(xué)國(guó)家民委-重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,云南 昆明 650500;2.云南大學(xué) 教育部自然資源藥物化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,云南 昆明 650091)

緬甸產(chǎn)鈍葉樟揮發(fā)油的化學(xué)成分研究

劉 娜1,尹艷清1,周樹(shù)婭1,馬小麗2,王丁丁2,李 良2,楊麗娟1

(1.云南民族大學(xué) 教育部民族藥資源化學(xué)國(guó)家民委-重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,云南 昆明 650500;2.云南大學(xué) 教育部自然資源藥物化學(xué)重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,云南 昆明 650091)

運(yùn)用超聲提取、回流提取、水蒸汽蒸餾、浸泡提取4種方法對(duì)緬甸產(chǎn)鈍葉樟植物的揮發(fā)油進(jìn)行了提取,通過(guò)氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)技術(shù)結(jié)合計(jì)算機(jī)檢索首次分析了緬甸產(chǎn)鈍葉樟揮發(fā)油的化學(xué)成分. 分別鑒定出42、40、22、36個(gè)成分, 其中黃樟素(safrole)相對(duì)含量最高, 達(dá)到19.76%～28.47%.比較4種提取方法, 得油率分別為3.49%、2.50%、0.85%、1.92%, 表明超聲提取法效果最優(yōu).

鈍葉樟;揮發(fā)油;化學(xué)成分;黃樟素;氣相色譜-質(zhì)譜

鈍葉樟(Cinnamomumobtusifolium)系樟科(Lauraceae)樟屬(Cinnamomum)常綠喬木[1].主要分布在緬甸、印度、孟加拉、老撾、越南等地區(qū),在中國(guó)云南、廣東、湖南等地也有分布[2].生長(zhǎng)于山坡、溝谷的疏林或密林中,海拔600～1 780 m.其樹(shù)皮、枝、果用于腰膝痹痛,虛寒胃痛,風(fēng)寒感冒,閉經(jīng)腹痛.鮮品搗爛敷用于接骨和瘀血.莖皮治胃寒痛,風(fēng)濕骨痛,腰肌勞損,溫中散寒,理氣止痛,止血,接骨,用于胃寒痛,陽(yáng)痿,閉經(jīng); 外用于外傷出血,骨折,蛇咬傷等功效[3].目前,已有文獻(xiàn)對(duì)湖南[4-5],浙江[6-7],云南[8-9],廣西[10-11],福建[12],四川[13],安徽[14]等地樟樹(shù)葉的化學(xué)成分進(jìn)行了研究,發(fā)現(xiàn)其主要成分為芳樟醇,黃樟素,松油醇,芳姜黃酮,氧化石竹烯,α-蒎烯等化合物.但緬甸產(chǎn)鈍葉樟(Cinnamomumobtusifolium)的化學(xué)成分研究尚未見(jiàn)報(bào)道.

本研究運(yùn)用超聲提取、回流提取、水蒸汽蒸餾、浸泡提取4種方法對(duì)緬甸產(chǎn)鈍葉樟植物的揮發(fā)油進(jìn)行了提取,并通過(guò)氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)技術(shù)結(jié)合計(jì)算機(jī)檢索首次分析了緬甸產(chǎn)鈍葉樟揮發(fā)油的化學(xué)成分.

1 實(shí)驗(yàn)部分

1.1 儀器與材料

Trace1310型氣相色譜與ISQ單四級(jí)桿質(zhì)譜聯(lián)用儀;旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀;超聲儀;水蒸汽蒸餾提取裝置;回流裝置.乙醚,無(wú)水硫酸鈉(均為分析純).

植物樣品鈍葉樟于2012年8月采自緬甸,經(jīng)中科院西雙版納熱帶植物研究所唐勇博士鑒定為Cinnamomumobtusifolium.

1.2 4種方法對(duì)鈍葉樟揮發(fā)油提取

1.2.1 超聲提取法

原料粉碎過(guò)0.356 mm篩,稱取50.0 g 裝入 1 000 mL 錐形瓶中,加乙醚400 mL,置于超聲中,超聲溫度為25 ℃,時(shí)間為20 min,功率為100 W.待提取完畢后,抽慮,重復(fù)3次,合并濾液,真空濃縮至無(wú)液滴流出,測(cè)得揮發(fā)油得率為3.49%.

1.2.2 回流提取法

原料粉碎過(guò)0.356 mm篩,稱取50.0 g裝入 1 000 mL 錐形瓶中,加乙醚400 mL,置于恒溫水浴鍋中,溫度為40 ℃,時(shí)間為4 h.待提取完畢后,抽慮,真空濃縮至無(wú)液滴流出,測(cè)得揮發(fā)油得率為2.50%.

1.2.3 水蒸汽蒸餾法

將粉碎好的鈍葉樟粉末稱取50 g裝入 1 000 mL的圓底燒瓶中,加500 mL水及一個(gè)大的攪拌子連接回流冷凝管,至于恒溫油浴鍋中,調(diào)節(jié)電磁攪拌器溫度135 ℃攪拌速度300 r/min,蒸餾10 h收集流出液,用乙醚萃取,經(jīng)無(wú)水硫酸鈉干燥,過(guò)濾,至于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干,測(cè)得揮發(fā)油得率為0.85%.

1.2.4 浸泡提取法

將粉碎好的鈍葉樟粉末稱取50 g裝入 1 000 mL的瓶子中，加入300 mL乙醚浸泡3天(3次),過(guò)濾收集乙醚至于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上蒸干,測(cè)得揮發(fā)油得率為1.92%.

1.3 揮發(fā)油GC-MS分析條件

Trace1310型氣相色譜與ISQ單四級(jí)桿質(zhì)譜聯(lián)用儀.氣相色譜條件: 石英毛細(xì)管柱TG-5MS,30 m×0.25 mm,膜厚0.25 μm.載氣為氦氣,分流比60∶1,柱前壓40 kPa,柱流量0.8 mL/min，進(jìn)樣口溫度250 ℃,接口溫度250 ℃,進(jìn)樣量1 μL.升溫程序: 從40 ℃開(kāi)始以3 ℃/min升到10 ℃,保持1 min,然后4 ℃/min升到180 ℃,保持1 min,再以5 ℃/min升到250 ℃,保持4 min; 質(zhì)譜條件: 離子源溫度250 ℃,電離方式EI,電子能量70 eV,掃描質(zhì)量范圍(m/z)：30～500 .

2 結(jié)果與分析

2.1 4種方法提取鈍葉樟揮發(fā)油的GC-MS總離子流圖

4種方法提取純?nèi)~樣樣發(fā)油的GC-MS總離子流圖見(jiàn)圖1～4.

2.2 鈍葉樟揮發(fā)油成分的GC-MS分析

鈍葉樟揮發(fā)油成分的GC-MS分析結(jié)果見(jiàn)表1.

表1 純?nèi)~樣樣發(fā)油成分的GC-MS分析結(jié)果

續(xù)表

序號(hào)保留時(shí)間/min化合物名稱分子式相對(duì)百分含量/%超聲回流水蒸氣浸泡3242.59E,E,Z-1,3,12-十九烷三烯-5,14-二醇C19H34O21.941.92—2.143343.705-乙基-4-十三烷酮C15H30O3.522.35—2.333444.4117-十八碳炔酸C18H32O20.860.78—0.863544.833,7,11-三甲基-1,6,10-十二烷三烯-3-甲酸乙酯C16H26O20.20———3644.997-甲基-Z-十四碳烯-1-醇乙酸酯C17H32O20.19—0.53—3746.631'-(丁炔-3-酮-1-基)-,(1R,2S,5R)-薄荷醇C14H22O20.940.88—0.743847.022-甲基-1-十六烷醇C17H36O0.44—0.39—3947.754α-乙酰氧基-5,5,8-三甲基八氫苯并[b]吡喃C14H24O32.732.28—2.194048.034,7-十八碳二炔酸甲酯C19H30O23.152.65—2.384148.51乙酸,1-[2-(2,2,6-三甲基-二環(huán)[4.1.0]庚烷-1-基)-乙基]-乙酸乙烯酯C16H26O22.061.85—1.824248.872,6,10-三甲基十四烷C17H360.49—0.71—4349.75(Z,Z)-2-(9,12-十八癸二烯基氧基)-乙醇C20H38O20.25———4450.641,3-乙基-5-(2-乙基丁基)-十八烷C26H540.510.380.68—4551.452,3-二甲基-5-三氟甲基1,4-苯二醇C9H9F3O20.17———4652.671,3-乙基-5-(2-乙基丁基)-十八烷C22H42O0.380.290.68—4755.19異戊酸香葉酯C15H26O20.380.42——

2.3 提取揮發(fā)油的4種方法比較

4種方法提取揮發(fā)油的溫度、時(shí)間以及得油率如表2所示.

表2 4種揮發(fā)油提取方法比較

揮發(fā)油的4種提取方法中,超聲提取法無(wú)需高溫度、無(wú)需加熱,或者加熱溫度低,萃取時(shí)間短大大降低能耗,揮發(fā)油的得油率為3.49%,其提取揮發(fā)油的效率最高,所以,超聲提取法為最優(yōu)的揮發(fā)油提取法.

3 結(jié)語(yǔ)

運(yùn)用超聲提取、回流提取、水蒸汽蒸餾、浸泡提取4種方法對(duì)緬甸產(chǎn)鈍葉樟植物的揮發(fā)油進(jìn)行了提取,得油率分別為3.49%、2.50%、0.85%、1.92%,結(jié)果表明超聲提取法效果最優(yōu); 并通過(guò)氣質(zhì)聯(lián)用(GC-MS)對(duì)其揮發(fā)油的化學(xué)成分進(jìn)行了分析,主要為萜類,倍半萜類,芳香醇類,酯類等,其中黃樟素(safrole)相對(duì)含量最高,達(dá)到19.76%～28.47%,占總精油含量的近1/5～1/4,它是合成香料的重要原料[15-16].其余含量較高的成分為: 氧化石竹烯(1.56%～8.76%),正十五碳醛(3.11%～7.98%),2-亞丙烯基環(huán)丁烯(6.06%),環(huán)氧化蛇麻烯 Ⅱ(6.02%),14-8S,14-雪松烯二醇(5.67%),芳姜黃酮(0.86%～3.48%)等,芳姜黃酮有抗生育活性[17].因此,緬甸產(chǎn)鈍葉樟可以作為生物醫(yī)藥,名貴香料,化工等的原料,本研究為緬甸產(chǎn)鈍葉樟的資源功能評(píng)價(jià)及綜合利用提供了科學(xué)依據(jù).

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(責(zé)任編輯 王 琳)

Chemical constituents of volatile oil ofCinnamomumobtusifoliumfrom Myanmar

LIU Na1,YIN Yan-qing1,ZHOU Shu-ya1,MA Xiao-li2,WANG Ding-ding2,LI Liang2,YANG Li-juan1

(1.Key Laboratory of Chemistry in Ethnic Medicinal Resources, State Ethnic Affairs Commission and Ministry of Education of China,Yunnan Minzu University, Kunming 650500,China;2.Key Laboratory of Medicinal Chemistry for Natural Resources,Ministry of Education of China, Yunnan University, Kunming 650091 China)

The chemical constituents of volatile oil ofCinnamomumobtusifoliumfrom Myanmar were studied. Using four methods(ultrasonic,reflux,steam distillation and immersion extraction),the volatile oils of this plant were extracted, and the extracted rates of volatile oil were 3.49%,2.50%,0.85% and 1.92%,respectively.The results showed that the best extraction method was the ultrasonic extraction. The chemical constituents of volatile oil were analyzed by GC-MS. In the above-mentioned four methods,42,40,22 and 36 compounds were identified respectively.The highest constituent of the essential oils was safrole(relative contents at 19.76%—28.47%).

cinnamomumobtusifolium;volatile oils;chemical constituents;safrole;GC-MS

2014-02-14.

國(guó)家自然科學(xué)基金(21162042);云南民族大學(xué)創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目；云南民族大學(xué)大學(xué)生創(chuàng)新性實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目(2013HXSRTZ08);云南民族大學(xué)研究生創(chuàng)新項(xiàng)目(11HXYJS08).

劉娜(1987-),女,碩士研究生.主要研究方向：天然藥物化學(xué).

楊麗娟(1971-),女,博士,教授,碩士生導(dǎo)師.主要研究方向：超分子化學(xué)與藥物化學(xué).

R284.2

A

1672-8513(2015)01-0029-05