王紅鋒

（姜堰區(qū)中醫(yī)院，江蘇泰州225500）

全自動(dòng)血沉儀和魏氏法測(cè)定不同程度貧血紅細(xì)胞沉降率的比較分析

王紅鋒

（姜堰區(qū)中醫(yī)院，江蘇泰州225500）

目的通過全自動(dòng)血沉儀和魏氏法測(cè)定不同程度貧血紅細(xì)胞沉降率（ESR），并解決拖尾現(xiàn)象引起的ESR數(shù)值讀取困難。方法模擬制作不同程度紅細(xì)胞濃度引起的貧血標(biāo)本30份，分別用魏氏法和儀器法測(cè)定ESR，并通過制定標(biāo)準(zhǔn)曲線校準(zhǔn)魏氏法出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象的結(jié)果，進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析；分別使用魏氏法和儀器法測(cè)定5次，比較重復(fù)性。結(jié)果2種ESR測(cè)定方法結(jié)果比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），且2種方法測(cè)定結(jié)果具有較好的線性關(guān)系（r=0.995）。2種方法測(cè)定ESR均具有較好的重復(fù)性。結(jié)論不同程度貧血能夠引起ESR改變，嚴(yán)重貧血時(shí)容易出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象，可根據(jù)實(shí)驗(yàn)室具體情況制定標(biāo)準(zhǔn)曲線進(jìn)行數(shù)值的校正。

血沉； 貧血； 自動(dòng)分析/儀器和設(shè)備； 紅細(xì)胞； 儀器法； 魏氏法

紅細(xì)胞沉降率（ESR）是臨床上廣泛應(yīng)用的一種檢查指標(biāo)，其特異性較差，但操作較為簡(jiǎn)便且對(duì)實(shí)驗(yàn)室要求較低，能夠廣泛開展。ESR能夠?qū)Χ喾N疾病的診斷和鑒別診斷進(jìn)行輔助，且在疾病進(jìn)展程度、療效判定和預(yù)后觀察等方面具有十分重要的參考意義。作為觀察炎癥急性時(shí)相反應(yīng)的指標(biāo)，ESR是臨床上廣泛應(yīng)用的常規(guī)檢查項(xiàng)目之一，對(duì)于腫瘤、風(fēng)濕免疫性疾病和感染性等疾病的診斷和治療具有十分重要的參考價(jià)值[1-3]。ESR測(cè)定結(jié)果受到多種因素的影響，如紅細(xì)胞數(shù)、紅細(xì)胞形態(tài)和血漿中膽固醇、蛋白質(zhì)、卵磷脂等物質(zhì)的影響，其中貧血對(duì)ESR的影響較大。魏氏（Weeterger）法是國(guó)際血液學(xué)標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)（ICSH）推薦的ESR測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)方法[4]。近年來，全自動(dòng)血沉儀開始在臨床廣泛應(yīng)用，本院目前使用的是DRAGONMED 2010全自動(dòng)血沉儀，具有操作簡(jiǎn)便、自動(dòng)化和能夠自動(dòng)校正溫度等優(yōu)點(diǎn)。為檢測(cè)全自動(dòng)血沉儀與魏氏法在不同程度貧血患者測(cè)定中的差異，本研究通過模擬不同程度貧血標(biāo)本，并進(jìn)行試驗(yàn)和比較，現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 本研究所有模擬制作標(biāo)本來自本院實(shí)習(xí)學(xué)生血樣30份，年齡21～23歲，其中男16例，女14例。另選擇門診就診患者30例，按照魏氏法測(cè)ESR結(jié)果分為低值組（ESR＜20 mm/h）、中值組（ESR 20～80 mm/h）和高值組（ESR＞80 mm/h），各10例。所有入選者均知情同意，并自愿參加本研究。

1.2 方法

1.2.1 儀器與試劑 本研究使用的血沉儀為DRAGONMED 2010全自動(dòng)血沉儀，儀器配套的檢測(cè)管為大龍醫(yī)療設(shè)備（上海）有限公司生產(chǎn)。魏氏血沉架及標(biāo)準(zhǔn)硅化負(fù)壓管均為泰州為爾康醫(yī)用品有限公司生產(chǎn)。

1.2.2 試驗(yàn)方法

1.2.2.1 不同程度貧血標(biāo)本制作 采集受試者血樣標(biāo)本后顛倒混勻，3 000 r/min離心5 min，將血漿和血細(xì)胞分離，制取壓積紅細(xì)胞，對(duì)壓積紅細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，通過計(jì)算后取一定量相應(yīng)血漿分別配置成紅細(xì)胞濃度為4.0× 1012、3.0×1012、2.0×1012、1.5×1012、1.0×1012、0.5×1012L-1的紅細(xì)胞懸液。

1.2.2.2 不同ESR測(cè)定方法 全自動(dòng)血沉儀測(cè)定ESR方法嚴(yán)格按照儀器操作說明書進(jìn)行測(cè)定，30 min后儀器自動(dòng)報(bào)告結(jié)果。魏氏法測(cè)ESR嚴(yán)格按照臨床檢驗(yàn)操作規(guī)范進(jìn)行，取1.6 mL紅細(xì)胞懸液和109 mmol/L枸櫞酸鈉溶液加入到0.4 mL血沉管中，液面位于“0”刻度處，固定于血沉架上，靜置1 h后觀察結(jié)果。對(duì)不同ESR測(cè)定方法結(jié)果進(jìn)行相關(guān)性分析。

1.2.2.3 魏氏法與儀器法測(cè)ESR重復(fù)性分析 嚴(yán)重貧血時(shí)紅細(xì)胞濃度較低，應(yīng)用魏氏法測(cè)ESR容易出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象導(dǎo)致結(jié)果讀取困難，因此作者應(yīng)用全自動(dòng)血沉儀和魏氏法對(duì)同一患者標(biāo)本進(jìn)行測(cè)定，然后制定校準(zhǔn)曲線，用來校準(zhǔn)應(yīng)用魏氏法測(cè)ESR時(shí)出現(xiàn)上述現(xiàn)象的標(biāo)本。30份標(biāo)本分別應(yīng)用魏氏法和儀器法各測(cè)定5次，計(jì)算平均值、標(biāo)準(zhǔn)差以及變異系數(shù)（CV）。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計(jì)量資料以±s表示，采用t檢驗(yàn)，相關(guān)性分析采用線性回歸方程法。P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié) 果

2.1 2種ESR測(cè)定方法結(jié)果比較 2種ESR測(cè)定方法對(duì)于不同程度貧血測(cè)定結(jié)果比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 2種ESR測(cè)定方法結(jié)果比較（±s，mm/h）

表1 2種ESR測(cè)定方法結(jié)果比較（±s，mm/h）

紅細(xì)胞濃度（×1012L-1）方法n 4.03.02.01.51.00.5魏氏法儀器法30 30 9.0±2.3 9.0±2.6 48.0±3.6 47.0±4.4 53.0±4.6 55.0±6.3 75.0±3.4 78.0±4.1 95.0±6.9 89.0±6.6 168.0±12.6 148.0±10.3

2.2 2種ESR測(cè)定示法相關(guān)性分析 2種方法測(cè)定結(jié)果具有較好的線性關(guān)系（r=0.995），見圖1。

圖1 2種ESR測(cè)定方法相關(guān)性分析

2.3 魏氏法與儀器法測(cè)ESR重復(fù)性分析 30份標(biāo)本中第1號(hào)標(biāo)本采用儀器法CV為16.0%，魏氏法CV為6.7%，其余標(biāo)本號(hào)2種方法CV均小于5.0%。采用魏氏法和儀器法測(cè)得ESR值和CV結(jié)果比較，差異均無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表2。

表2 魏氏法與儀器法測(cè)ESR重復(fù)性分析

續(xù)表2 魏氏法與儀器法測(cè)ESR重復(fù)性分析

3 討 論

貧血是臨床上較為常見的癥狀之一。在臨床實(shí)踐中，常常會(huì)遇到一些大量失液或大量補(bǔ)液的患者，如失血后補(bǔ)充血容量、腎衰竭時(shí)進(jìn)行大量的飲水和補(bǔ)液、嚴(yán)重腹瀉或大量出汗導(dǎo)致失液等，都會(huì)導(dǎo)致血液的濃縮和稀釋，而這些情況都會(huì)引起ESR這個(gè)臨床常用指標(biāo)的改變[5-6]。貧血對(duì)ESR的影響較大，一般情況下貧血可導(dǎo)致紅細(xì)胞的沉降速度加快，主要原因?yàn)榧t細(xì)胞數(shù)目的減少導(dǎo)致紅細(xì)胞碰撞機(jī)會(huì)減少，且紅細(xì)胞總面積減少導(dǎo)致血漿逆阻力減少，因此導(dǎo)致ESR加快。但也有相關(guān)研究認(rèn)為，在嚴(yán)重貧血時(shí)ESR不加快，其原因?yàn)榧t細(xì)胞過少導(dǎo)致緡錢狀紅細(xì)胞聚集等因素有關(guān)[7-8]。ESR是一種常規(guī)的篩查指標(biāo)，由Fehaeus和Westregreu等在1921年創(chuàng)立，至今仍然是臨床常用的重要指標(biāo)，雖其特異性較差，但對(duì)多種疾病的鑒別，尤其是動(dòng)態(tài)觀察具有很高的診斷價(jià)值，主要判斷機(jī)體是否感染、組織是否損傷和壞死、一些疾病是否處在活動(dòng)期及其進(jìn)展和惡化等、腫瘤的浸潤(rùn)、擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移等[9]。因此，保證ESR測(cè)定結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性是指導(dǎo)臨床合理診斷和治療的關(guān)鍵性基礎(chǔ)。

雖然目前隨著科學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展，ESR的測(cè)定方法也有很大的進(jìn)展，但I(xiàn)CSH和美國(guó)臨床檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)委員會(huì)（NCCNS）仍然將魏氏法作為推薦方法[10]。DRAGONMED 2010全自動(dòng)血沉儀具有干凈安全、快捷簡(jiǎn)便、精確可靠、快速高效和性價(jià)比高等優(yōu)點(diǎn)。儀器檢查標(biāo)本全過程封閉，能夠避免因?yàn)椴僮髡卟僮鞑划?dāng)和實(shí)驗(yàn)室環(huán)境導(dǎo)致的污染，無按鍵操作，能夠隨時(shí)隨機(jī)測(cè)定標(biāo)本，具有光學(xué)檢測(cè)裝置和全自動(dòng)溫度補(bǔ)償設(shè)備，血液標(biāo)本的高度在64～50 mm時(shí)儀器會(huì)自動(dòng)做出調(diào)節(jié)，省略了傳統(tǒng)手工法制備標(biāo)本、測(cè)定時(shí)間和溫度校準(zhǔn)等繁瑣的程序。

當(dāng)血細(xì)胞數(shù)量明顯降低時(shí)，魏氏法測(cè)定ESR容易出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象，而隨著紅細(xì)胞數(shù)目的進(jìn)一步降低，拖尾現(xiàn)象更加嚴(yán)重，這嚴(yán)重影響到結(jié)果的讀取和判斷，因此本研究應(yīng)用全自動(dòng)血沉儀和魏氏法對(duì)同一患者標(biāo)本進(jìn)行測(cè)定，然后制定校準(zhǔn)曲線，用來校準(zhǔn)應(yīng)用魏氏法測(cè)ESR時(shí)出現(xiàn)上述現(xiàn)象的標(biāo)本。拖尾現(xiàn)象的出現(xiàn)可能是因?yàn)榧t細(xì)胞濃度過低時(shí)，大部分紅細(xì)胞可發(fā)生緡錢狀聚集，但小部分紅細(xì)胞分散在血漿中，不能夠形成緡錢狀，導(dǎo)致ESR一快一慢，出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象。相關(guān)研究中[11]，貧血時(shí)ESR不升高，可能與未排除拖尾現(xiàn)象有關(guān)，本研究采用校正消除了拖尾現(xiàn)象對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響，因此與相關(guān)研究得出的結(jié)論不一致[12]。全自動(dòng)血沉儀采用光電跟蹤和定時(shí)掃描的方式，儀器通過發(fā)光二極管和光電管檢測(cè)到紅細(xì)胞與血漿界面的透光度進(jìn)而計(jì)算出ESR值，血沉儀能夠不受拖尾現(xiàn)象的影響，因此可結(jié)合儀器制定標(biāo)準(zhǔn)曲線用于校正魏氏法出現(xiàn)拖尾現(xiàn)象的結(jié)果。

本研究中，第1號(hào)標(biāo)本采用儀器法計(jì)算CV為16.0%，魏氏法CV為6.7%，其余均小于5.0%。分析其結(jié)果，主要是由于數(shù)值較小導(dǎo)致均值較小，并不顯著影響結(jié)果的可靠性，因此魏氏法與儀器法測(cè)定ESR均具有良好的可重復(fù)性。

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10.3969/j.issn.1009-5519.2015.19.031

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1009-5519（2015）19-2968-03

2015-05-09）

王紅鋒（1975-），男，江蘇泰州人，主管檢驗(yàn)師，主要從事臨床檢驗(yàn)工作；E-mail：wanghfz@163.com。