赭曲霉毒素A模擬抗原表位及噬菌體展示酶聯(lián)免疫吸附分析法的建立
2015-06-18 10:36:02王呂熊斯誠(chéng)鄒旭強(qiáng)陳超超邵輝鋒陳雪嵐
分析化學(xué) 2015年6期
王呂 熊斯誠(chéng) 鄒旭強(qiáng) 陳超超 邵輝鋒 陳雪嵐
摘 要 以驢抗鼠二抗包被微孔板，以捕獲方式包被抗赭曲霉毒素A（OTA）單克隆抗體，利用噬菌體隨機(jī)七肽庫(kù)篩選OTA模擬抗原表位，并以其替代檢測(cè)抗原，建立了基于噬菌體展示技術(shù)的酶聯(lián)免疫吸附分析（Phage ELISA）檢測(cè)OTA的方法。結(jié)果表明，篩選獲得的模擬OTA 抗原表位七肽氨基酸序列為GMSWMMA?；谀M表位噬菌體建立的Phage ELISA方法半數(shù)抑制濃度（IC50值）為（0.15 ± 0.02） ng/mL，檢測(cè)OTA的線(xiàn)性范圍為0.03～0.50 ng/mL，OTA的檢出限為0.03 ng/mL，且Phage ELISA與其它4種常見(jiàn)真菌毒素（黃曲霉毒素B1、伏馬毒素B1、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇及玉米赤霉烯酮）無(wú)交叉反應(yīng)。大米樣品OTA加標(biāo)實(shí)驗(yàn)表明，批內(nèi)加標(biāo)回收率為97.0%～115.2%，批間加標(biāo)回收率為107.2%～123.1%，與ELISA試劑盒檢測(cè)結(jié)果比較，無(wú)顯著性差異。
關(guān)鍵詞 赭曲霉毒素A；噬菌體展示肽庫(kù)；模擬表位；酶聯(lián)免疫吸附法endprint
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