邢麗杰等

摘 要：該文建立了超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（UPLC-MS/MS）同時(shí)測(cè)定葡萄中4種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的方法。樣品經(jīng)乙腈提取，WAX小柱凈化，采用BEH C18色譜柱分離，以乙腈和水為流動(dòng)相進(jìn)行梯度洗脫。采用電噴霧離子化，負(fù)離子分段掃描和多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（MRM）檢測(cè)，外標(biāo)法定量。結(jié)果表明：赤霉素、對(duì)氯苯氧乙酸、氯吡脲、2，4-二氯苯氧乙酸在1～200ng/mL范圍內(nèi)線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.990；4種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的方法檢出限均為0.2μg/kg，方法定量限為0.5μg/kg，樣品添加回收試驗(yàn)的平均回收率為74.8%～101.5%，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差為3.3%～8.6%（n=7）。該方法簡(jiǎn)單、靈敏度高、分析時(shí)間短，適用于葡萄中4植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的測(cè)定。

關(guān)鍵詞：超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜；植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑；葡萄

中圖分類號(hào) S66 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼 A 文章編號(hào) 1007-7731（2015）10-33-03

Abstract：A method was established for determining 4 plant growth regulator residues in grapes by ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry（UPLC-MS/MS）.Samples were extracted with acetonitrile，and cleaned up on a WAX cartridge.The target analytes were separated on a BEH C18 column with gradient elution using a mobile phase made up of acetonitrile and water.The samples were detected under negative multiple reactions monitoring（MRM）mode through polarity switching between time segments.The result showed that the linearities of gibberellic acid，4-chlorophenoxyaceticacid，forchlorfenuron，and 2，4-dichlorophenoxyacetic were in the concentration range of 1ng/mL～200ng/mL，with the correlation coefficients higher than 0.990.The limits of detection（LOD）and the limits of quantitation（LOQ）of the method were 0.2μg/kg and 0.5μg/kg.The average spiked recovery rates were in the range of 74.8%～101.5%.The result showed that the relative standard deviation（RSD，n=7）was 3.3%～8.6%.The method proved to be simple，sensitive，rapid and suitable for the determination of 4 plant growth regulator residues in grapes.

Key words：Ultra performance liquid chromatography-tandem mass spectrometry（UPLC-MS/MS）；Plant growth regulator；Grapes

植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑（Plant growth regulator，PGRs）是一種能提高農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)量和品質(zhì)的激素[1]，主要用于葡萄、獼猴桃、番茄、棉花等，人體如果攝入大量的植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑，會(huì)引成腹瀉、免疫力下降等危害，甚至致畸、致癌、致突變等嚴(yán)重后果[2]。近年來，隨著植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑在水果、蔬菜等農(nóng)產(chǎn)品中的廣泛和大量使用，其危害性已經(jīng)引起了全社會(huì)民眾的關(guān)注。

目前檢測(cè)植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑殘留的常用方法有高效液相色譜法[3]、氣質(zhì)聯(lián)用法[4]和液質(zhì)聯(lián)用法[5-6]。液相色譜法由于抗干擾能力差，存在一定的假陽性；氣質(zhì)聯(lián)用前處理較為復(fù)雜，檢測(cè)時(shí)間較長(zhǎng)；液質(zhì)聯(lián)用法對(duì)于物質(zhì)的分析從結(jié)構(gòu)上進(jìn)行確認(rèn)，大大降低了假陽性，而且前處理方法簡(jiǎn)單、時(shí)間短，適用于多組分快速檢測(cè)。為此，本研究采用超高效液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜技術(shù)同時(shí)測(cè)定了葡萄中4種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑的殘留量。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑 乙腈（HPLC級(jí)，德國(guó)MERCK公司）；甲醇（HPLC級(jí)，德國(guó)CNW公司）；WAX小柱（60mg/3mL 美國(guó)Waters公司）；氯化鈉、乙酸乙酯為分析純；超純水；4種植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑標(biāo)準(zhǔn)品：赤霉素（gibberellic acid，GA3）、對(duì)氯苯氧乙酸（4-chlorophenoxyaceticacid 4-CPA）、氯吡脲（forchlorfenuron）、2，4-二氯苯氧乙酸（2，4-dichlorophenoxyacetic），純度均大于96%（德國(guó)Dr.Ehrenstorfer）。

1.2 儀器與設(shè)備 Waters Xevo TQ-MS 液質(zhì)聯(lián)用儀（美國(guó)Waters公司）；高速冷凍離心機(jī)（德國(guó)Sigma公司）；氮吹儀（美國(guó)Organomation公司）；旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（瑞士Buchi公司）；勻漿機(jī)（德國(guó)IKA公司）；超純水儀（成都超純科技有限公司）；超聲儀KQ-600DE（江蘇昆山市超聲儀器公司）。