管明龍 張靜 陳蘭蘭 田瑞敏

(1.川北醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)系，四川 南充 637100；2.川北醫(yī)學(xué)院護(hù)理學(xué)院護(hù)理學(xué)系，四川 南充 637100；3.川北醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院藥理教研室，四川 南充 637100)

節(jié)節(jié)草水煎液對(duì)家兔血液凝固的影響

管明龍1張靜1陳蘭蘭2田瑞敏3△

(1.川北醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)系，四川 南充 637100；2.川北醫(yī)學(xué)院護(hù)理學(xué)院護(hù)理學(xué)系，四川 南充 637100；3.川北醫(yī)學(xué)院藥學(xué)院藥理教研室，四川 南充 637100)

目的：研究節(jié)節(jié)草水煎液對(duì)家兔離體血液凝固時(shí)間的影響。方法：采用心臟采血的方法收集血液，經(jīng)脫鈣制成抗凝血。將脫鈣制成的抗凝血分為五組，每組1 ml，前四組分別加入100%，50%，25%，12.5%的節(jié)節(jié)草水煎液0.1 ml，第五組加入0.1 ml蒸餾水作為對(duì)照組，然后分別加入0.025% CaCl2溶液對(duì)血漿進(jìn)行復(fù)鈣，觀察并記錄各組血液凝固的時(shí)間。結(jié)果：濃度為100%的節(jié)節(jié)草水煎液組血液凝固時(shí)間較對(duì)照組縮短(P<0.05)，50%、25%、12.5%的節(jié)節(jié)草水煎液組血液凝固時(shí)間較對(duì)照組都延長(P<0.05)。結(jié)論：節(jié)節(jié)草水煎液對(duì)家兔血液凝固時(shí)間有明顯影響，濃度不同對(duì)血液凝固時(shí)間的影響不同。

節(jié)節(jié)草；水煎液；血液凝固時(shí)間

血管血栓性疾病是多發(fā)病、常見病，嚴(yán)重危害著人類的健康。而血小板的粘附、活化和聚集，最終形成血栓，成為血栓性疾病的發(fā)病基礎(chǔ)。因此，目前，抗血小板藥物已經(jīng)作為治療血栓性疾病的有效手段在臨床上被廣泛應(yīng)用，最常用的是阿司匹林，其次是血小板ADP受體拮抗劑如TP[1]。由于血栓性疾病發(fā)病率呈逐年上升的趨勢(shì)，所以更需要尋找更多、更有效的抗血栓形成的藥物。節(jié)節(jié)草為木賊科木賊屬的干燥全草，別名為木賊，筆筒草，問荊等。20世紀(jì)80年代以來對(duì)該植物的藥理研究報(bào)告逐年增加。主要是對(duì)節(jié)節(jié)草的生化鑒定研究較多，但關(guān)于節(jié)節(jié)草具有抗凝血的作用的研究卻很鮮見。本實(shí)驗(yàn)旨在通過觀察不同濃度的節(jié)節(jié)草水煎液對(duì)家兔離體血液凝固時(shí)間的影響，進(jìn)一步明確節(jié)節(jié)草的抗凝血作用。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動(dòng)物

家兔2只(3 kg左右，由川北醫(yī)學(xué)院動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供)。

1.1.2 實(shí)驗(yàn)器材

電子天平、燒杯若干、試管若干、5 ml注射器、膠頭滴管若干。

1.1.3 藥物試劑

節(jié)節(jié)草水煎液、抗凝劑(乙二胺四乙酸鹽)、0.025% CaCl2溶液、蒸餾水，所有藥品為國產(chǎn)分析純。

1.1.4 節(jié)節(jié)草水煎液制取

精確稱取節(jié)草20 g清洗干凈，加400 ml蒸餾水煎煮30 min，所得液經(jīng)潔凈紗布濾過，取其濾液，冷卻。定原液濃度為100%，再將其余溶液分別用蒸餾水稀釋至濃度為50%、25%、12.5%。

1.2 方法

1.2.1 家兔血液采集

采血前固定家兔，心前區(qū)去毛，于胸骨左緣4-5肋間搏動(dòng)最強(qiáng)處將針頭垂直插入心臟進(jìn)行采血，并將采集的新鮮血液加入到含有抗凝劑的燒杯中(血液：抗凝劑=9：1)。

1.2.2 家兔體外抗凝試驗(yàn)血液凝固時(shí)間的測(cè)定

先取5支試管分別編號(hào)，然后取經(jīng)脫鈣制成的抗凝血1ml分別加入各組試管中，再將前四組分別加入100%，50%，25%，12.5%的節(jié)節(jié)草水煎液各0.1 mL,第五組加入0.1ml蒸餾水作為對(duì)照組。由同一人快速向五組試管滴加0.025% CaCl2溶液5滴，在每組試管的第5滴0.025% CaCl2溶液剛滴下時(shí)開始計(jì)時(shí)，并將處理好的試管每隔10 s同時(shí)傾斜一次，以傾斜時(shí)血液不再流動(dòng)代表血液凝固，記錄凝血時(shí)間。同理，平行實(shí)驗(yàn)重復(fù)6組。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

2 結(jié)果

節(jié)節(jié)草水煎液對(duì)家兔體外凝血時(shí)間的影響：如表1所示，與空白對(duì)照組相比，濃度為50%、25%、12.5%的節(jié)節(jié)草水煎液組均能延長家兔的體外凝血時(shí)間，但未發(fā)現(xiàn)有明顯的劑量依賴性；濃度為100%的節(jié)節(jié)草水煎液可使血液凝固時(shí)間縮短。血液凝固時(shí)間組間比較P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

表1 各組凝血時(shí)間

注：與對(duì)照組相比，**P<0.01，*P<0.05。

3 討論

血管血栓性疾病的發(fā)病機(jī)制是血栓形成，血栓分為動(dòng)脈血栓和靜脈血栓，動(dòng)脈血栓形成的基礎(chǔ)病變是動(dòng)脈粥樣硬化，血小板粘附聚集起“扳機(jī)”作用，因此降血脂和抗血小板粘附、聚集能預(yù)防動(dòng)脈血栓形成；靜脈血栓形成的主要因素是淤血和高凝，因此采取措施抗凝和減輕淤血能有效預(yù)防靜脈血栓的形成[2]。所以，尋找具有抗凝作用的中藥方劑或單味中藥的有效成分，對(duì)臨床防治血栓的形成具有很大的實(shí)踐意義。有研究說明木賊有良好的抗血栓作用。同時(shí)，酚酸類是節(jié)節(jié)草的主要成分[3]，研究證明酚酸類物質(zhì)中的阿魏酸鈉具有抗血小板聚集和抗血栓形成的作用[4]，所以濃度為75%、50%、25%的節(jié)節(jié)草水煎液具有抗凝作用。由于節(jié)節(jié)草所含成分復(fù)雜不僅含有阿魏酸同時(shí)含有咖啡酸、生物堿類及黃酮類等其他成分，咖啡酸有止血作用,能縮短血凝及出血時(shí)間[5-6]。而濃度為100%的節(jié)節(jié)草水煎液具有促凝的作用，結(jié)果與其他組相反可能與其所含咖啡酸有關(guān)，也可能是由于在此濃度下促凝物質(zhì)的含量多于抗凝物質(zhì)造成，具體原因有待進(jìn)一步探究。

1 阮長耿. 血小板與血栓性疾病[J]. 醫(yī)學(xué)研究通訊, 2004, 33(7):7-9.

2 李家增. 血管血栓性疾病的發(fā)病機(jī)制和防治[J]. 基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床, 2006, 26(6):561-565.

3 樸惠順,金光洙. 木賊的化學(xué)成分和藥理作用研究進(jìn)展[J]. 時(shí)珍國醫(yī)國藥, 2006, 17(6):1077-1078.

4 靖會(huì),姚凌云,李教社,等. 國內(nèi)阿魏酸鈉的藥理研究進(jìn)展[J]. 西北藥學(xué)雜志, 2002, 17(5):236-238.

5 吳蘭兒. 新止血、升白藥-咖啡酸、咖啡酸胺[J].南京藥學(xué)院學(xué)報(bào), 1980,(2):24-24.

6 李清華. 小薊止血成分的研究[J]. 中草藥, 1982, 13(9):393-393.

Effects of the drilgrass decoctions on the blood coagulation of rabbit

Guan Ming-Long1, Zhang Jing1, Chen Lan-Lan2, Tian Rui-Min3△

(1.Department of Clinical Medicine, North Sichuan Medical College, Sichuan Nanchong 637100;2.School of Nursing, North Sichuan Medical College, Sichuan Nanchong 637100;3.Department of Pharmacology, North Sichuan Medical College, Sichuan Nanchong 637100)

Objective：To investigate the effects of drilgrass decoctions on the blood clotting time of rabbit. Methods: The blood was collected from carotid artery, and turned to anticoagulant blood by getting rid of calcium. The anticoagulant blood was divided into five groups. There was 1 ml blood in each group. The first four groups were added into 0.1 ml drilgrass decoctions at different concentration(100%, 50%, 25%, 12.5%) separately, and the fifth group was added into 0.1 ml distilled water as a control group. The calcium complex(added 0.025% CaCl2) was added to observe and record the blood clotting time of each group. Results: The blood clotting time in the 100% concentration groups were significantly shorter than those in the control groups(P<0.01), and the blood clotting time in the 50%, 25%, 12.5% concentration groups were significantly longer than those in the control groups(P<0.05). Conclusions: Drilgrass decoctions have significant effect on the blood clotting time of rabbit. And different concentrations lead to the different influence on the blood clotting time.

Drilgrass; Decoctions; Blood clotting time

管明龍，男，川北醫(yī)學(xué)院臨床醫(yī)學(xué)專業(yè)2012級(jí)本科生，Email：2458075446@qq.com。

△通訊作者：田瑞敏，女，助教，主要從事載脂蛋白才C3的功能研究，Email：truimin@126.com。

2014-12-26)