吳潔清 王 俠 魯廣建

(新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，河南 衛(wèi)輝 453100)

腎透明細胞癌中弗林蛋白酶、C-myc和Bcl-2的表達及意義

吳潔清 王 俠1魯廣建2

(新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院腫瘤內(nèi)科，河南 衛(wèi)輝 453100)

目的 探討腎透明細胞癌組織中弗林蛋白酶(Furin)、人C-myc癌基因產(chǎn)物(C-myc)和B細胞淋巴瘤/白血病基因(Bcl)-2的表達及臨床意義。方法 123例腎透明細胞癌臨床資料及術(shù)后存檔的蠟塊組織作為觀察組，80例正常腎組織作為對照組。應(yīng)用免疫組化SP法檢測兩組中Furin、C-myc和Bcl-2的表達。結(jié)果 兩組中Furin、C-myc和Bcl-2的表達差別顯著。觀察組Furin、C-myc和Bcl-2的表達與腫瘤的細胞核分級、Ki67增殖指數(shù)及是否伴有壞死密切相關(guān)。相關(guān)性分析顯示觀察組中Furin、C-myc和Bcl-2的表達均無明顯相關(guān)性(P>0.05)。結(jié)論 Furin、C-myc和Bcl-2高表達是腎透明細胞癌發(fā)生發(fā)展的促進因素，三者間未見明顯關(guān)聯(lián)性。

腎透明細胞癌；弗林蛋白酶(Furin)；C-myc；Bcl-2；免疫組化

腫瘤發(fā)展過程中多種蛋白表達失調(diào)〔1〕。弗林蛋白酶(Furin)是機體內(nèi)前體蛋白加工酶，具有多種生物學(xué)功能〔2〕。學(xué)者近年發(fā)現(xiàn)Furin與腫瘤進展相關(guān)〔3〕。人C-myc癌基因產(chǎn)物(C-myc)是原癌基因，可以調(diào)節(jié)腫瘤細胞中DNA合成及細胞的分化，對腫瘤生長有明顯的促進作用〔4,5〕。Bcl-2是凋亡抑制基因，通過調(diào)節(jié)抗氧化途徑抑制細胞的凋亡，促進腫瘤的生長及進展〔6,7〕。本實驗關(guān)注腎透明細胞癌術(shù)后組織中Furin、C-myc和Bcl-2的表達及其臨床意義。

1 資料與方法

1.1 臨床資料 2011年1月至2013年12月我院經(jīng)病理學(xué)確診的腎透明細胞癌患者123例的臨床資料和術(shù)后組織作為觀察組，均符合WHO的診斷標準。其中男63例，女60例；年齡50～79歲，平均65.3歲。術(shù)前均未進行放、化療。選擇距腫瘤邊緣>5 cm、經(jīng)病理證實為正常腎組織的蠟塊組織80例作為對照組，其中男40例，女40例，年齡51～78歲，平均64.3歲。兩組在常規(guī)比較中無明顯差異。

1.2 Furin、C-myc和Bcl-2的檢測 Furin、C-myc和Bcl-2試劑均為濃縮液，正式檢測前按不同比例進行稀釋，并進行預(yù)實驗。選擇最理想的配比濃度應(yīng)用于正式檢測。三種蛋白的檢測均由同一病理科主管技師操作，應(yīng)用免疫組化SP法，嚴格按說明進行，嚴格質(zhì)量控制。

1.3 Furin、C-myc和Bcl-2結(jié)果的判定方法 Furin、C-myc和Bcl-2均以細胞質(zhì)和(或)細胞膜中出現(xiàn)棕黃色為陽性。計數(shù)10個高倍視野(400倍)，計算陽性細胞百分率。以陽性率≥5%為陽性，以<5%計為陰性。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法 應(yīng)用SAS6.12軟件進行χ2檢驗和線性相關(guān)分析。

2 結(jié) 果

2.1 兩組Furin、C-myc和Bcl-2表達的比較 觀察組中Furin、C-myc和Bcl-2的表達明顯高于對照組，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.000 1)。見表1。

表1 兩組Furin、C-myc和Bcl-2陽性表達的比較〔n(%)〕

2.2 觀察組Furin、C-myc和Bcl-2在不同分組中的比較 觀察組中Furin、C-myc和Bcl-2的表達與腫瘤的細胞核分級、Ki67增殖指數(shù)及是否伴有壞死密切相關(guān)。見表2。

表2 觀察組Furin、C-myc和Bcl-2陽性表達在不同分組中的比較〔n(%)〕

2.3 觀察組中Furin、C-myc和Bcl-2表達的相關(guān)性分析 觀察組中Furin、C-myc和Bcl-2的表達均未見相關(guān)性(P>0.05)。

3 討 論

腎透明細胞癌常位于腎皮質(zhì)下，少數(shù)呈多中心性病變。腫瘤細胞的形態(tài)多樣，最常見的是泡巢狀和腺泡狀結(jié)構(gòu)，腫瘤間質(zhì)有小的薄壁血管構(gòu)成的網(wǎng)狀間隔〔8〕。腫瘤細胞質(zhì)內(nèi)有脂質(zhì)和糖原，常規(guī)制片過程中脂質(zhì)溶解使細胞形成透明狀，細胞膜清楚。近來研究顯示多種抗體可以標記腎透明細胞癌，如角蛋白、波形蛋白等〔9〕。近來學(xué)者發(fā)現(xiàn)多種蛋白在腫瘤異常表達，不僅促進腫瘤的進展，還可能具有復(fù)雜的生物學(xué)功能〔10〕。Furin是新發(fā)現(xiàn)的蛋白，具有多種生物學(xué)功能，如對多肽的合成和分泌、細胞膜相關(guān)受體的成熟過程、相關(guān)級聯(lián)蛋白的激活等有重要影響〔11,12〕。近年認為Furin是腫瘤進展的重要因素，可以在多種腫瘤中表達，如宮頸癌〔13〕、胃腺癌〔14〕和舌鱗狀細胞癌〔15〕等。C-myc是原癌基因，不僅能與細胞核內(nèi)的DNA形成有效的嵌合，還對轉(zhuǎn)錄因子有調(diào)控作用〔16〕。C-myc對增殖可能具有特殊作用，研究顯示C-myc是決定細胞從G0/G1期進入S期的開關(guān)，其高表達時可以使腫瘤細胞處于高增殖狀態(tài)〔17,18〕。Bcl-2是在t(14:18)染色體易位斷點處發(fā)現(xiàn)的癌基因，具有明顯的阻斷細胞程序化死亡的作用〔19〕。但是近年研究顯示并不是所有的凋亡都能被Bcl-2成功阻斷，因此機體還存在著其他調(diào)節(jié)凋亡的因素〔20,21〕。

本實驗結(jié)果提示Furin、C-myc和Bcl-2高表達是促進腫瘤發(fā)生和進展的重要因素。無論Furin、C-myc和Bcl-2的具體作用如何，上述實驗結(jié)果均顯示出三種蛋白類似的癌基因作用。Furin、C-myc和Bcl-2的作用過程可能不在同一通路上。Furin的表達程度可以在一定程度上反映腫瘤的生物學(xué)行為。C-myc可以通過調(diào)節(jié)下游相關(guān)靶基因轉(zhuǎn)錄過程，使C-myc參與細胞的周期調(diào)控、增殖分化與程序性死亡。也有觀點認為C-myc可以作用于缺乏TATA盒的核心啟動元件，通過參與細胞分化、發(fā)育、生長信號的轉(zhuǎn)導(dǎo)、細胞增殖和凋亡過程發(fā)揮作用〔4〕；結(jié)果顯示觀察組中Furin、C-myc和Bcl-2的表達與腫瘤的細胞核分級、Ki67增殖指數(shù)及是否伴有壞死密切相關(guān)，提示Furin、C-myc和Bcl-2對促進腫瘤進展及增殖有重要作用。三種蛋白均具有促進Ki67增殖的過程，這使腫瘤細胞獲得Furin、C-myc和Bcl-2表達失調(diào)信息后使細胞停滯在增殖旺盛期。Furin、C-myc和Bcl-2高表達引起細胞出現(xiàn)腫瘤性壞死，對局部組織的影響大，正常細胞損傷明顯。近年也有學(xué)者認為C-myc和Bcl-2對腫瘤血管生成有影響〔7〕，因此C-myc和Bcl-2對腫瘤生長的調(diào)控作用也可能與腫瘤細胞的失控性增殖和血管生成有關(guān)，但是其作用過程需待證實。

綜上，F(xiàn)urin、C-myc和Bcl-2高表達是腎透明細胞癌發(fā)生發(fā)展的促進因素，F(xiàn)urin、C-myc和Bcl-2高表達提示腫瘤處于進展期，三者間未見明顯關(guān)聯(lián)性。

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〔2013-12-19修回〕

(編輯 苑云杰)

吳潔清(1965-)，男，碩士，副主任醫(yī)師，主要從事腫瘤放化療研究。

R73

A

1005-9202(2015)12-3316-03；

10.3969/j.issn.1005-9202.2015.12.059

1 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院檢驗學(xué)院 2 新鄉(xiāng)醫(yī)學(xué)院第一附屬醫(yī)院檢驗科