沈明華，張煥邦，黃國(guó)發(fā)，莫重輝＊

（1.青海大學(xué)農(nóng)牧學(xué)院，青海西寧810016；2.青海省湟中縣動(dòng)物衛(wèi)生監(jiān)督所，青海湟中811600）

瑞香狼毒（Stellera chamaejasme）是瑞香科狼毒屬多年生草本植物，分布廣泛，根系發(fā)達(dá)，吸水吸肥能力強(qiáng)，具有抗干旱、生長(zhǎng)迅速、繁殖快等特點(diǎn)。在牧草群落中占據(jù)優(yōu)勢(shì)地位，與其他植物爭(zhēng)奪營(yíng)養(yǎng)和空間，如果誤服、誤用，輕者會(huì)造成人畜中毒，重者會(huì)造成死亡，直接影響到畜牧業(yè)生產(chǎn)的發(fā)展，是我國(guó)天然草原上主要有毒植物之一［1］。

改革開放以來，我國(guó)畜牧業(yè)生產(chǎn)持續(xù)穩(wěn)定增長(zhǎng)，隨著社會(huì)經(jīng)濟(jì)的發(fā)展，人們對(duì)生態(tài)環(huán)境、草產(chǎn)品、畜產(chǎn)品等的要求也逐步提高，草地有毒植物的防除和利用受到社會(huì)各界的重視，為此政府組織廣大農(nóng)業(yè)、生物、醫(yī)學(xué)、化學(xué)、毒理、畜牧獸醫(yī)和草地科技工作者，圍繞草地有毒植物及其危害開展了長(zhǎng)期的調(diào)查研究和廣泛的學(xué)術(shù)交流，在有毒植物鑒定、毒性的確證、毒素分離提取、動(dòng)物中毒的流行病學(xué)、臨床診斷、毒草病理、毒理機(jī)制以及預(yù)防治療等方面取得很大成果［2－5］。在藥用價(jià)值方面眾多研究表明瑞香狼毒主要含有黃酮類、二萜類、香豆素類及木脂素類化學(xué)成分，具有抗腫瘤、抗驚厥、抗癲癇、抗菌、抗病毒、免疫調(diào)節(jié)及抗氧化等多種藥理作用［6－9］。其干燥根可入藥，作為傳統(tǒng)藏藥材，瑞香狼毒在藏醫(yī)藥中的應(yīng)用歷史悠久。近年來國(guó)內(nèi)外學(xué)者對(duì)瑞香狼毒化學(xué)成分和抗腫瘤、抗艾滋病等方面的研究取得了迅速的發(fā)展，對(duì)其化學(xué)成分及藥理作用方面的研究也有不少報(bào)道，但有關(guān)瑞香狼毒對(duì)綿羊血液學(xué)方面的影響尚未見報(bào)道。本試驗(yàn)研究了兩種劑量瑞香狼毒對(duì)試驗(yàn)羊血液常規(guī)指標(biāo)的影響，以期為瑞香狼毒的毒性效應(yīng)研究及其開發(fā)利用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 瑞香狼毒 2013年8月采于青海省湟中縣土門關(guān)鄉(xiāng)，采集瑞香狼毒花果期地上部分，陰干，粉碎備用。

1.1.2 試驗(yàn)動(dòng)物 臨床健康試驗(yàn)綿羊8只，雌雄兼有，選自青海省某養(yǎng)殖場(chǎng)。驅(qū)除體內(nèi)外寄生蟲，手術(shù)植入永久性瘤胃瘺管，待創(chuàng)口愈合后，隨機(jī)分為2組即瑞香狼毒低劑量組和高劑量組。

1.1.3 儀器設(shè)備 MEK－8222K 型血細(xì)胞全自動(dòng)分析儀（日本產(chǎn)）；EDTAK2抗凝管。

1.2 方法

1.2.1 染毒方法 試驗(yàn)前所有試驗(yàn)綿羊空腹稱重定為初始體重，低劑量組按2.5g／kg的劑量、高劑量組按5g／kg的劑量稱取瑞香狼毒干草粉，拌少量水，每天清晨空腹經(jīng)瘤胃瘺管一次投服，然后使其自由采食青干草和自由飲水，每只羊每天飼喂150g精料。每天觀察試驗(yàn)綿羊飲食、精神狀態(tài)、運(yùn)動(dòng)情況、中毒癥狀及中毒癥狀出現(xiàn)的時(shí)間并詳細(xì)記錄。連續(xù)飼喂32d時(shí)停止投服瑞香狼毒粉，并繼續(xù)觀察兩周。

1.2.2 檢測(cè)項(xiàng)目與方法 試驗(yàn)前及試驗(yàn)期間每隔4d頸靜脈采集抗凝血，在血細(xì)胞全自動(dòng)分析儀檢測(cè)白細(xì)胞（WBC）、紅細(xì)胞（RBC）、血紅蛋白（Hb）、紅細(xì)胞壓積（HCT）等血液常規(guī)指標(biāo)。

1.2.3 數(shù)據(jù)處理 所有試驗(yàn)數(shù)據(jù)的統(tǒng)計(jì)分析采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)軟件。

2 結(jié)果

2.1 臨床觀察結(jié)果

所有試驗(yàn)羊在試驗(yàn)期間體重明顯下降，但在整個(gè)試驗(yàn)期間食欲正常，飲水量增加，表現(xiàn)出輕微的精神沉郁、垂頭、喜臥、靠墻站立、眼神呆滯，行動(dòng)遲緩。在試驗(yàn)第18天左右試驗(yàn)羊開始出現(xiàn)不同程度的腹瀉癥狀，高劑量組試驗(yàn)羊比低劑量組試驗(yàn)羊腹瀉較為嚴(yán)重，表現(xiàn)為糞便稀軟不成形，糞便污染后肢被毛，試驗(yàn)第19天，低劑量組1只試驗(yàn)羊腹瀉死亡，試驗(yàn)第23 天高劑量組1 只試驗(yàn)羊精神沉郁，全身發(fā)抖，最后因衰竭而死亡。在試驗(yàn)第32天停止投服狼毒粉后所有試驗(yàn)羊逐漸停止腹瀉，精神好轉(zhuǎn)。

2.2 體重變化

由圖1可見，低劑量組試驗(yàn)羊在試驗(yàn)第8天開始體重明顯降低（P＜0.05）；高劑量組試驗(yàn)羊在第12天開始體重明顯降低（P＜0.05），且在整個(gè)試驗(yàn)期間體重呈下降趨勢(shì)。

圖1 試驗(yàn)羊體重變化趨勢(shì)Fig.1 Weight change trend of tested sheep

2.3 血液學(xué)指標(biāo)測(cè)定結(jié)果

2.3.1 RBC、Hb、HCT 的動(dòng)態(tài)變化 由表1可知，各試驗(yàn)組試驗(yàn)羊血液紅細(xì)胞（RBC）、紅細(xì)胞壓積（HCT）、血紅蛋白（Hb）在整個(gè)試驗(yàn)期間沒有明顯變化（P＞0.05），組間也均無差異（P＞0.05）。

2.3.2 WBC 的動(dòng)態(tài)變化 由表2可知，高劑量組白細(xì)胞（RBC）在試驗(yàn)第4天后明顯下降（P＜0.05），第20天后又升高（P＞0.05）。

表1 各組試驗(yàn)羊血液紅細(xì)胞、血紅蛋白、紅細(xì)胞壓積的動(dòng)態(tài)變化Table 1 Dynamic changes of red blood cells，lemoglobin and hematocrit of tested sheep in each group

3 討論

瑞香狼毒是一種含黃酮類化合物的有毒有害植物［2］。常建軍等［5］給家兔灌服瑞香狼毒中提取的粗黃酮類化合物后，家兔出現(xiàn)喜臥、不愿運(yùn)動(dòng)、精神沉郁等臨床表現(xiàn)，試驗(yàn)第6天～第8天出現(xiàn)腹瀉，其中3只家兔在試驗(yàn)第7天～第8天出現(xiàn)呼吸困難，表現(xiàn)為昂頭張口呼吸，于試驗(yàn)第9天～第10天因呼吸衰竭而死亡。陳永輝等［10］報(bào)道從異地新引進(jìn)的家畜在瑞香狼毒滋生的草地上放牧?xí)r，由于其對(duì)瑞香狼毒幼苗（芽）的識(shí)別能力差，常因誤食而發(fā)生中毒，多為急性中毒，主要表現(xiàn)為嘔吐、腹痛、腹瀉、四肢無力、臥地不起、全身痙攣、頭向后彎、心悸亢進(jìn)、糞便帶血，嚴(yán)重時(shí)虛脫或驚厥死亡。本試驗(yàn)中兩種劑量的試驗(yàn)羊在試驗(yàn)期間體重均明顯下降，表現(xiàn)出輕微的精神沉郁、垂頭、喜臥、靠墻站立、眼神呆滯、行動(dòng)遲緩等臨床表現(xiàn)，在試驗(yàn)第18天左右試驗(yàn)羊開始出現(xiàn)不同程度的腹瀉癥狀，高劑量組試驗(yàn)羊比低劑量組試驗(yàn)羊腹瀉較為嚴(yán)重，這與資料報(bào)道綿羊瑞香狼毒中毒癥狀相一致，表明瑞香狼毒對(duì)家畜中樞神經(jīng)系統(tǒng)、消化系統(tǒng)有強(qiáng)烈的刺激作用。

表2 各組試驗(yàn)羊血液中白細(xì)胞的動(dòng)態(tài)變化Table 2 Dynamic change of white blood cells of tested sheep in each group

動(dòng)物血液生理生化指標(biāo)是反映動(dòng)物機(jī)體狀況的重要指標(biāo)，是動(dòng)物疾病臨床診斷和治療的重要依據(jù)。血液對(duì)于維持動(dòng)物機(jī)體的正常生命活動(dòng)具有極其重要的意義，血液指標(biāo)能客觀地反映動(dòng)物機(jī)體的生理機(jī)能及代謝狀況。從本試驗(yàn)測(cè)定結(jié)果來看，各試驗(yàn)組試驗(yàn)羊血液紅細(xì)胞（RBC）、紅細(xì)胞壓積（HCT）、血紅蛋白（Hb）在整個(gè)試驗(yàn)期間沒有明顯變化（P＞0.05），兩組之間也無明顯變化（P＞0.05），說明這兩種劑量下瑞香狼毒對(duì)試驗(yàn)綿羊的造血系統(tǒng)尚未造成損傷，僅高劑量組白細(xì)胞（RBC）在試驗(yàn)第4天后 明 顯 下 降（P ＜0.05），20d 后 又 升 高（P ＞0.05），說明高劑量組瑞香狼毒對(duì)試驗(yàn)羊白細(xì)胞初期具有一定的抑制作用。

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