覃立剛 吳偉林 趙潔 駱華珍 葉娜

孕婦生殖道的感染危害程度要遠高于非孕婦的患者，生殖道的常見的病菌感染有念珠菌感染，念珠菌感染會導致孕婦羊膜腔內(nèi)出現(xiàn)感染、胎膜早破、早產(chǎn)低出生兒、甚至流產(chǎn)和死胎不良妊娠結局，也可經(jīng)垂直傳播使胎兒宮內(nèi)感染、胎兒先天性病及新生兒感染等發(fā)生，而且新生兒感染性疾病發(fā)病率仍較高、是新生兒重要死因[1]；但關于孕婦生殖道念珠菌感染與新生兒感染性疾病的相關性研究很少。目前國內(nèi)及廣東省內(nèi)關于孕婦生殖道念珠菌感染與所生產(chǎn)新生兒感染性疾病相關性的研究報道較少，惠州地區(qū)未見相關研究公開報道。加強圍產(chǎn)保健對孕婦生殖道念珠菌感染的監(jiān)測，提高新生兒生育、生存質(zhì)量，減少新生兒感染性疾病的發(fā)病率與死亡率，為圍產(chǎn)期保健提供科學的參考依據(jù)，有較高的社會效益及經(jīng)濟效益。本課題通過對生殖道念珠菌感染的孕婦及所生產(chǎn)的患有感染性疾病的新生兒進行回顧性調(diào)查研究，對孕婦生殖道念珠菌感染的發(fā)生率、所生產(chǎn)的患有新生兒感染性疾病的發(fā)病率、死亡率以及各種主要臨床表現(xiàn)進行分析，了解其中的相關性，為圍產(chǎn)期保健提供科學的參考依據(jù)。本文對本院2013年3月-2014年3月的1027例住院產(chǎn)婦的宮頸分泌物和陰道分泌物做常規(guī)細菌培養(yǎng)，現(xiàn)將結果報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2013年3月-2014年3月實施產(chǎn)前檢查發(fā)現(xiàn)生殖道遭念珠菌感染的晚期產(chǎn)婦1027例作為研究對象，將其陰道分泌物進行念珠菌培養(yǎng)，將檢驗結果呈陽性的患者作為對照組，隨機再抽取相同人數(shù)念珠菌檢驗呈陰性的產(chǎn)婦作為觀察組。對照組102例產(chǎn)婦中，經(jīng)陰道分泌物念珠菌培養(yǎng)結果顯示呈陽性，年齡22~34歲，平均（32.3±2.1）歲；孕齡37~41周，平均（39.2±0.8）周；體重49.3~62.1 kg，平均（54.6±2.3）kg。觀察組102例產(chǎn)婦中，經(jīng)陰道分泌物念珠菌培養(yǎng)結果呈陰性，年齡26~37歲，平均（32.4±0.6）歲；孕齡36~41周，平均（39.2±0.5）周；體重48.7~65.2 kg，平均（56.4±2.7）kg。兩組孕婦的年齡、孕齡、體重等一般資料比較差異均無統(tǒng)計學意義（P>0.05），具有可比性。

1.2 儀器的選用 本次試驗采用的儀器為超高倍顯微鏡圖像分析系統(tǒng)。

1.3 方法

1.3.1 標本的采集 采用無菌的棉拭子插入產(chǎn)婦的宮頸口1 cm左右的部位，然后轉動1周，停留3~5 s之后取出，放置于無菌管內(nèi)進行密封保存，然后再送往檢驗室檢驗。

1.3.2 念珠菌的培養(yǎng)方法 念珠菌感染的實驗室檢測方法：（1）鹽水直接涂片法（初篩）。棉拭子插入陰道1 cm處，然后轉動1周，停留3~5 s取出，或者使用窺陰器取宮頸分泌物，然后將標本置入預先加入0.5 mL氯化鈉的青霉素瓶內(nèi)，作懸滴涂片和革蘭染色，然后將二者的鏡檢結果進行記錄，然后將青霉素瓶、瓶內(nèi)剩余液體、棉拭子均放置于室內(nèi)24 h左右，室內(nèi)溫度在22~26 ℃，然后制作懸滴涂片在高倍顯微鏡下進行觀察。檢驗呈陽性者，用接種環(huán)挑取生長物1環(huán)，與凹玻片中50 μL血清進行混合，充分混合之后將蓋玻片蓋上，稍微輕壓讓混合物向四周均勻的溢散，然后放置在紙盒內(nèi)的水浴箱中，溫度保持在37 ℃，放置時間在3~4 h，然后觀察芽管的生成情況[2-3]；（2）直接培養(yǎng)法。①取少許菌落混懸于0.5 mL羊血清中；②將試管在35~37 ℃培養(yǎng)，培養(yǎng)時間小于3 h；③培養(yǎng)完畢，取一滴懸液滴在載玻片上，低倍鏡下觀察有無芽管從胞體生出，寬大約為胞體的一半，長大為胞體的3~4倍；④培養(yǎng)2 h內(nèi)白色念珠菌生成芽管[4]。

1.3.3 念珠菌的鑒定 取樣品液劃線或者涂布與平板上，保持溫度在25~28 ℃，放置48 h，白色念珠菌表現(xiàn)為藍綠色，熱帶念珠菌表現(xiàn)為鐵藍色或者藍灰色，光滑念珠菌呈現(xiàn)出紫色，克柔假絲酵母菌呈現(xiàn)出粉紅色，其他念珠菌均為白色，詳情如表1所示。

表1 各種念珠菌的鑒定顏色區(qū)別

1.3.4 人員操作要求 所有的工作人員必須保持嚴謹?shù)墓ぷ鲬B(tài)度，統(tǒng)一經(jīng)受公司或者醫(yī)院的專業(yè)培訓，操作人員的人數(shù)確保固定。

1.3.5 新生兒患感染性疾病診斷 新生兒出生后到出院前3 d的時間段內(nèi)，嬰兒出現(xiàn)感染性疾病，比如感染性肺炎、化膿性腦膜炎、感染性腹瀉、臍帶炎等均可被診斷為新生兒感染性疾病[5]。

1.4 統(tǒng)計學處理 采用SPSS 16.0軟件對所得數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計分析，計量資料用（x-±s）表示，比較采用t檢驗，計數(shù)資料以率（%）表示，比較采用 字2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

本次所選取的研究對象為1027例晚期產(chǎn)婦，其中經(jīng)生殖道分泌物檢測得出102例孕婦被念珠球菌感染，感染率為9.93%，未被念珠球菌感染的患者為925例，所占比例為90.07%；結果顯示，第一胎產(chǎn)前念珠菌檢驗呈陽性的群體，個體最高，其一般情況如表2所示。

表2 102例產(chǎn)前陰道念珠菌感染產(chǎn)婦的一般情況 例（%）

其中白色念珠菌75例，占所有的念珠菌感染者的73.53%；光滑念珠菌20例，所占比例為19.61%，克柔假絲酵母菌7例，所占比例為6.86%，詳見表3。

表3 念珠菌的感染情況

對照組患者即念珠菌檢驗呈陽性的產(chǎn)婦，所產(chǎn)新生兒發(fā)生感染性疾病的有9例，發(fā)生率為8.82%。觀察組患者即念珠球菌檢驗呈陰性的產(chǎn)婦，新生兒出現(xiàn)感染性疾病的有2例，發(fā)生率為1.96%，兩組比較差異有統(tǒng)計學意義（字2=4.7084，P=0.0300）。對照組患感染性新生兒中尿布疹2例，口腔內(nèi)生白斑3例，嘴角皸裂3例，咽部鵝口瘡1例。觀察組新生兒2例均為感染性肺炎病。兩組患兒均出現(xiàn)死亡情況。

3 討論

念珠菌是一種真菌，其中白色的念珠菌可以導致婦女患陰道炎。它的形狀呈卵圓形，有芽孢，同時細胞發(fā)芽會形成假菌絲。念珠菌對于日光、紫外線等具有很強的抵抗力，但是不耐高溫，一般溫度超過60 ℃，時長大約1 h左右，菌體便會死亡[6]。本次試驗中檢驗結果顯示假絲酵母菌的病原為白假絲酵母菌、光滑假絲酵母菌以及平滑假絲酵母菌等。女性的陰道微生物系統(tǒng)是由機體的內(nèi)分泌調(diào)節(jié)、微生態(tài)菌群、解剖結構三者聯(lián)合組成的，如果是生理期或者妊娠期，那么生殖道內(nèi)部的生態(tài)環(huán)境就會發(fā)生變化，從而引發(fā)念珠菌或者其他細菌的感染[7]。因此對于念珠菌的分離、培養(yǎng)鑒定都應該引起醫(yī)學研究者廣泛的關注。

由于感染念珠菌而導致的陰道炎是一種非常常見的婦科病，其中以妊娠晚期的產(chǎn)婦患病率最高，資料顯示，在妊娠晚期的產(chǎn)婦中大約有25%~30%的陰道中有念珠菌[7]，本次研究對象的采集過程中，念珠菌檢驗呈陽性患者的比例為9.93%，遠遠低于一般水平。念珠菌屬于女性陰道的正常菌群，主要感染原因是因為孕婦在妊娠晚期機體的免疫力降低，雌激素分泌過多，然后導致陰道的菌群平衡失調(diào)，同時在妊娠晚期產(chǎn)婦陰道的pH值降低，酸性增強，而念珠菌是耐酸性菌群，在酸性環(huán)境中生長速度和繁殖速度加快，因此妊娠末期和非妊娠期女性，念珠菌感染差別非常大[8-9]。本次研究中，念珠菌培養(yǎng)呈陽性的產(chǎn)婦為102例，結果顯示，陽性率最高的是家庭主婦，主要的原因可能是由于個人的衛(wèi)生情況有關。以白色念珠菌為主的75例，所占的比例為73.53%，因此由于白念珠菌而引發(fā)的陰道炎應該引起人們的重視，從而采取有效的治療措施。陰道是產(chǎn)婦自然分娩新生兒出生的途徑，因此如果有孕婦患有陰道炎，那么很容易造成新生兒發(fā)生感染性疾病，另外現(xiàn)在妊娠末期對于產(chǎn)婦來說也非常容易導致胎膜早破等并發(fā)癥。

醫(yī)學技術的不斷發(fā)展，人們對于生育的觀念也有了轉變，但是在保證少生優(yōu)育的同時，醫(yī)學研究者更應該關注孕婦妊娠和分娩過程中所要面臨的問題，特別是由于產(chǎn)婦的婦科疾病從而直接影響新生兒的身體健康。研究表明，新生兒的感染性疾病大部分都是由產(chǎn)婦垂直傳播的[10]。比如B型鏈球菌，簡稱GBS，它能夠使得新生兒體內(nèi)引發(fā)多種感染，比如肺炎、腦膜炎等，而這種病菌多存在于產(chǎn)婦的直腸和陰道之中，因此非常容易傳染給新生兒；大腸桿菌可以引發(fā)新生兒出現(xiàn)腦膜炎、敗血癥以及肺炎，主要存在于產(chǎn)婦的大腸內(nèi)部，同樣也非常容易垂直傳播給新生兒；主要的臨床癥狀是高燒、精神萎靡、厭食等；念珠菌可以導致新生兒發(fā)生感染性疾病，比如尿布疹、口咽部生鵝口瘡、嘴角龜裂，口腔內(nèi)白斑等[11-12]。本次研究中對照組新生兒中尿布疹2例，主要的臨床癥狀會陰部、肛門、臀部，大腿外側等部位的皮膚發(fā)紅、充血，嚴重者出現(xiàn)表皮脫落伴有紅斑和丘疹，最嚴重可能引發(fā)敗血癥?？谇粌?nèi)生白斑3例，主要臨床癥狀就是口腔內(nèi)的出現(xiàn)白點有痛感，影響新生兒的進食；嘴角皸裂、咽部鵝口瘡共4例；觀察組新生兒2例均為感染性肺炎病。

因此對于妊娠晚期的產(chǎn)婦應該頻繁地進行檢查，做到早發(fā)現(xiàn)、早治療，保證母嬰的身體健康。如果在妊娠期被檢出念珠菌呈陽性，應該及時進行治療，避免造成新生嬰兒的垂直傳播。妊娠期婦女念珠菌感染中，最多的是白念珠菌，其次是熱帶念珠菌，再次是光滑念珠菌。據(jù)資料顯示，在所有的新生兒出現(xiàn)感染性疾病中，由于自然分娩導致感染所占比重為22%~24%，其中最主要的表現(xiàn)形式是口腔念珠菌的感染[13]。據(jù)醫(yī)學研究者的研究表明，由于產(chǎn)婦陰道分泌物檢測念珠菌呈陽性的，新生兒的皮膚、口腔涂片檢測呈陽性率為7.14%，因此可能導致垂直傳染率為7.14%[14]，本次研究的念珠菌的垂直傳染率為8.82%，基本保持一致。為了研究母嬰是否真正存在垂直傳播，筆者將所篩選的菌株均進行了DNA檢測排序，并采用隨機擴增DNA多態(tài)性分析及染色體核型分析，檢測結果表明，所選的菌株形態(tài)和生化鑒定結果保持一致，因此表明產(chǎn)婦和新生兒所分離出的念珠菌為同一菌株[15]，在對照組發(fā)生感染的9例新生兒中，出現(xiàn)鵝口瘡的嬰兒1例，所占比例為11.1%，因此在以后的臨床治療實踐中，確保新生兒降低對念珠菌的感染，一定要對妊娠晚期的產(chǎn)婦進行陰道抗真菌治療。

本次使用的念珠菌的培養(yǎng)方法采用鹽水直接涂片法進行初次篩選，然后使用直接培養(yǎng)方法進行對念珠菌的確診。鹽水直接涂片法（初篩）7元/例、直接培養(yǎng)法38元/例，每年3000~3500人次，每年增加效益13.5~16.5萬元[15]。通過對孕婦生殖道念珠菌感染與所產(chǎn)新生兒感染性疾病相關性的回顧性調(diào)查分析，了解其中的相關性，并掌握其規(guī)律，提出加強圍產(chǎn)保健對孕婦生殖道念珠菌感染的監(jiān)測，提高新生兒生育、生存質(zhì)量，減少新生兒感染性疾病的發(fā)病率與死亡率，為圍產(chǎn)期保健提供科學的參考依據(jù)，有較高的社會效益和經(jīng)濟效益。

綜上所述，本課題研究有較強的社會及經(jīng)濟效益，課題設計合理，路線明確，步驟清晰，具有相應的人員及設備等條件，而且采用回顧性調(diào)查研究的方法，方法簡捷，數(shù)據(jù)可靠，經(jīng)費節(jié)儉，可操作性強，可行性強。

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