張旋，林建春，魏鳳香，裴元元

(深圳市龍崗區(qū)婦幼保健院檢驗科，廣東 深圳518172)

新生兒黃疸是新生兒最常見的癥狀，國內(nèi)發(fā)生率高達(dá)30%～50%[1]，且近年來有逐年增高的趨勢[2]，如不及時治療可致嚴(yán)重的并發(fā)癥，產(chǎn)生永久性不可逆的神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥[3]，甚至引起死亡。檢測新生兒膽紅素是診斷新生兒高膽紅素血癥的主要手段之一，準(zhǔn)確有效的測定新生兒膽紅素(NBIL)對兒科醫(yī)生正確進(jìn)行鑒別診斷，盡早采取合理的治療措施，預(yù)防核黃疸發(fā)生有著十分重要的意義。目前，膽紅素的常用檢測有干式化學(xué)和濕化學(xué)兩種方法。本文就不同檢測方法以及同種方法不同試劑新生兒膽紅素檢測值進(jìn)行比較分析。具體如下。

1 資料與方法

1.1 檢測對象 選擇本院臨床申請檢測膽紅素的住院新生兒85例：男46例,女39例，年齡3 h～21天。抽靜脈血2～3 ml，離心后血清分3份，2份在日立7180上分別用2種試劑測定總膽紅素(TB)和直接膽紅素(DB)，方法均是釩酸氧化法;另一份用Vit ros350測定干片TB和結(jié)合膽紅素(Bc)，干片TB為重氮試劑法，干片Bc是媒染劑法。

1.2 儀器與試劑 濕化學(xué)法在日立7180全自動生化儀上分別用2種國產(chǎn)試劑 (寧波美康和上海科華)測定；干式化學(xué)法用強(qiáng)生公司Vitros 350全自動干化學(xué)分析儀測試，試劑為強(qiáng)生公司提供的進(jìn)口配套試劑。

1.3 統(tǒng)計分析 應(yīng)用軟件SPSS 10.0，計算各組數(shù)據(jù)的均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差±s)，組間比較采用 t檢驗，P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 膽紅素結(jié)果統(tǒng)計 檢測所有研究對象的總膽紅素與結(jié)合膽紅素，利用軟件SPSS 10.0計算不同方法檢測指標(biāo)的均值及標(biāo)準(zhǔn)差，結(jié)果見表1。

表1 不同方法試劑膽紅素測量值統(tǒng)計與結(jié)果比較(±s)

表1 不同方法試劑膽紅素測量值統(tǒng)計與結(jié)果比較(±s)

注：表中所列P值為不同組兩兩比較的結(jié)果，*P＜0.05有統(tǒng)計學(xué)意義。

寧波美康(85例) 上?？迫A(85例) 干化學(xué)法(50例) 美康：科華 美康：干化學(xué) 科華：干化學(xué)P值總膽紅素(μmol/L)結(jié)合膽紅素(μmol/L)157.90±66.01 24.64±11.00 149.98±63.98 13.96±7.44 145.52±64.72 1.62±6.10 0.43 0.00*0.29 0.00*0.7 0.00*

2.2 組間比較不同組的總膽紅素、結(jié)合膽紅素兩兩比較，計算各組的膽紅素值是否存在統(tǒng)計學(xué)差異，結(jié)果見表1。

3 討論

因胎兒在宮內(nèi)處于低氧環(huán)境，刺激腎臟產(chǎn)生紅細(xì)胞生成素，生成較多的紅細(xì)胞，出生后隨著自主呼吸的建立，血氧濃度增高，紅細(xì)胞生成素停止產(chǎn)生，且新生兒紅細(xì)胞壽命為70～90d，較成人短，故血中紅細(xì)胞破壞過多，提早釋放出大量膽紅素;同時新生兒肝臟發(fā)育不成熟，肝細(xì)胞攝取未結(jié)合膽紅素能力低下，膽紅素結(jié)合能力不足，由于新生兒腸黏膜內(nèi)含有豐富的β－葡萄糖醛酸苷酶，其活性和含量是成人的10倍，在pH值偏堿的情況下，可將大量結(jié)合膽紅素分解，脫去葡萄糖醛酸基重新轉(zhuǎn)變?yōu)橹苄缘奈唇Y(jié)合膽紅素，迅速從腸黏膜吸收[4]。另外發(fā)生新生兒窒息缺氧酸中毒時還可抑制膽紅素與白蛋白的結(jié)合[5]，進(jìn)一步使未結(jié)合膽紅素增加。因此從理論上說，在多數(shù)情況下，新生兒體內(nèi)膽紅素是以未結(jié)合膽紅素為主，結(jié)合膽紅素含量很少。只有在發(fā)生新生兒敗血癥感染，如細(xì)菌、支原體、衣原體及螺旋體等引起的新生兒重癥感染等情況下才可見結(jié)合膽紅素與未結(jié)合膽紅素均升高。目前國內(nèi)新生兒高膽紅素血癥的診斷大多根據(jù)《兒科學(xué)》第7版中的標(biāo)準(zhǔn)[6]：即血清總膽紅素足月兒＞221μmol/L(12.9mg/dl)，或每日上升＞85μmol/L(5mg/dl)，其中也沒有設(shè)定結(jié)合膽紅素指標(biāo)。英國國家衛(wèi)生醫(yī)療質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)署(National Institute for Health and Clinical Excellence,NICE)在其2010年出版的關(guān)于新生兒膽紅素腦病的高危因素包括有足月兒血清膽紅素>340μmol/L及血清膽紅素水平每小時增速>340μmol/L的診斷標(biāo)準(zhǔn)[7]。國內(nèi)學(xué)界一般認(rèn)為如新生兒膽紅素>306μmol/L、早產(chǎn)兒膽紅素>204～255μmol/L，應(yīng)高度懷疑并發(fā)膽紅素腦病[8]。國內(nèi)有文獻(xiàn)報道不同方法檢測新生兒膽紅素可造成結(jié)果有顯著差異[9]。本研究結(jié)果顯示不僅在方法學(xué)上存在差異，不同試劑也會引起新生兒結(jié)合膽紅素檢測結(jié)果顯著差異。由于強(qiáng)生干片法的試劑片采用了在分布層和試劑層之間加了一層屏蔽層，能有效阻止分布層中潛在的干擾物通過，使得蛋白質(zhì)(包括白蛋白附著的δ-膽紅素和血紅蛋白)、脂類及脂色素停留在分布層而不與試劑層發(fā)生反應(yīng)，使得試劑的抗干擾能力大為增加。就新生兒生理學(xué)及檢測方法學(xué)原理方面而言，干化學(xué)法顯然優(yōu)于常規(guī)濕化學(xué)法。有學(xué)者建議新生兒膽紅素應(yīng)自始至終選擇同一種方法模式檢測，以避免方法學(xué)差異帶來的誤導(dǎo)[10]。本研究旨在說明實驗室不僅在方法學(xué)的選擇上，同時對不同試劑的選擇也應(yīng)及時與臨床醫(yī)生溝通，共同確定最適合本院的檢測方法與試劑。

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[2]Johnson L,Bhutani VK,Karp K,et al.Clinical report from the pilot USA Kernicterus Registry(1992 to 2004)[J].J Perinatol,2009,29(Suppl 1):S25-S45.

[3]劉開珍.新生兒急性膽紅素腦病227例臨床分析[J].臨床兒科雜志,2012,30(9):840-844.

[4]王燕.97例新生兒窒息檢測血糖、總膽紅素結(jié)果意義探討[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué),2011,29(2):199.

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[6]沈曉明.兒科學(xué)[M].北京:人民衛(wèi)生出版社,2008:116.

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[8]劉拯.換血治療G-6-PD缺乏致新生兒膽紅素腦病1例報告[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué),2013,31(3):295-296.

[9]符寶銘.不同方法對新生兒膽紅素測定的比較[J].中國婦幼保健，2011,26(27):4209-4211.

[10]王丹青.應(yīng)用不同方法對新生兒膽紅素檢測的結(jié)果分析[J].安徽醫(yī)學(xué),2004,25(1):22-23.