亚洲免费av电影一区二区三区,日韩爱爱视频,51精品视频一区二区三区,91视频爱爱,日韩欧美在线播放视频,中文字幕少妇AV,亚洲电影中文字幕,久久久久亚洲av成人网址,久久综合视频网站,国产在线不卡免费播放

        ?

        羥基紅花黃色素A提取工藝的探討

        2015-06-03 23:03:48鄒宇牛英才周麗樊麗潘虹馬曉星洪博王曉麗李文靜
        科技創(chuàng)新導(dǎo)報 2015年9期

        鄒宇 牛英才 周麗 樊麗 潘虹 馬曉星 洪博 王曉麗 李文靜

        摘 要:目的 研究并分析羥基紅花黃色素A提取工藝,對該工藝做進(jìn)一步改善與優(yōu)化,使其更好的應(yīng)用于醫(yī)療事業(yè)方面。方法 為使菊科植物紅花內(nèi)的羥基紅花黃色素A含量達(dá)到更好的藥用指標(biāo),對羥基紅花黃色素A提取工藝進(jìn)行進(jìn)一步探究。對于紅花的提取溫度、浸泡時間、提取的溶劑用量多采用正交方法和單因素方法進(jìn)行探究考察。結(jié)果 對于羥基紅花黃色素A的最佳提取方法是用20倍的水將紅花浸泡,然后于12h和4h各提取一次,過濾成液體,并合并過濾。同時,羥基紅花黃色素A的提取在高溫下及其不穩(wěn)定,不易提取,而在低溫下穩(wěn)定性良好,便于提取。結(jié)論 使用浸漬法對羥基紅花黃色素A進(jìn)行提取,操作簡便易懂,合理方便,但要控制好溫度與時間。

        關(guān)鍵詞:提取工藝 操作簡單 羥基紅花黃色素A

        中圖分類號:R284.2 文獻(xiàn)標(biāo)識碼:A 文章編號:1674-098X(2015)03(c)-0083-02

        作為菊科植物的一種,紅花不僅能夠有效通絡(luò)靜脈、活血祛瘀,而且具有鎮(zhèn)痛止痛的功效。因此,該植物在臨床上多用于冠心病、心肌缺血、心絞痛以及腦梗死、糖尿病并發(fā)癥、高血壓、視網(wǎng)膜病變等疾病[1]。是如今全世界范圍內(nèi)研究和關(guān)注的熱點植物。研究發(fā)現(xiàn),紅花中以黃酮醇類化合物為主要成分。而紅花最有效部位以查爾酮類化合物為主。在該化合物中,羥基紅花黃色素A為成分最多、排在首位的元素,該元素不僅具有顯著的藥理效應(yīng),而且為無明顯毒副作用的單體。是現(xiàn)階段最具有開發(fā)價值的新藥之一[2]。常用的提取羥基紅花黃色素A的手段有煎煮法、冷侵法、溫浸法以及滲漉法四大手段,其中煎煮法最為常用也是較為有效的提取方法。但針對羥基紅花黃色素A(HSYA)具有較強(qiáng)的水溶性和熱穩(wěn)定性差等特點,本研究采取浸漬法對羥基紅花黃色素A的提取工藝作進(jìn)一步研究分析,并采取高效液相色譜法(HPLC)測定提取羥基紅花黃色素A的含量,具體如下[3]。

        1 儀器與材料

        1.1 使用儀器

        本次研究選取北京科明雷德科技有限公司供應(yīng)的沃世特Waters2996高效液相色譜儀,該儀器主機(jī)主要參數(shù)為:高精度四元梯度泵、沃世特二極管陣列檢測器以及120位的沃世特自動進(jìn)樣器,外加沃世特Chemstation色譜管理軟件。同時,選用瑞士梅特勒AG135型號的電子天平(精確度達(dá)十萬分之一)[4-5]。

        1.2 所需材料

        本次提取所需材料主要為來自安國以嶺中藥飲片廠的菊科類植物紅花,且該紅花經(jīng)檢驗鑒定為正品;同時,需要南開大學(xué)化工廠生產(chǎn)的大孔樹脂(D-4020型)若干以及上海信帆生物科技有限公司代理的Pharmacia公司葡聚糖凝膠(Sephadex LH--20);同時還需要南開大學(xué)高分子研究所研制的ZTC O型天然澄清劑和一定量的聚酰胺薄膜。羥基紅花黃色素A的對照品自制,即通過向精密秤取的羥基紅花黃色素A中加入25%的甲醇進(jìn)而制成1mL各含0.13mg的混合液[6-7]。

        2 方法與結(jié)果

        2.1 羥基紅花黃色素A含量的測定

        2.1.1 色譜要求

        色譜柱主要選用沃特世symmetry C18(250mm×4.6mm,5μm),其流動相則為甲醇/0.5%磷酸=40∶60;波長檢測為280nm,流速1.0mL/min,進(jìn)樣量10uL以及柱溫30℃[8]。

        2.1.2 制備試取樣溶液

        首先,用天平秤20g紅花,然后將其放入密閉容器;然后向密閉容器內(nèi)加入400ml的蒸餾水置于室溫下12h,于12h后抽濾、定容,定容刻度仍取400mL。最后精密量取已得到的濾液2mL并置于10mL的容量瓶內(nèi)。并加入一定量的蒸餾水使其至定容的刻度,等待檢測其含量。

        2.1.3 線性關(guān)系考察

        精密吸取上述已制得的HYSA的對照溶液2、4、6、8、10以及12μL,并將其注入沃世特2996高效液相色譜儀。觀察并記錄液相色譜儀的顯示圖譜,分別記錄圖形的峰面積以及由該峰面積對樣品溶液的濃度進(jìn)行線性回歸,得到Y(jié)=160 421X-9240的線性方程,相關(guān)系數(shù)r=0.9998即表明,羥基紅花黃色素A在0.026~0.157mg/mL間線性關(guān)系良好[9-10]。

        2.1.4 精密度試驗

        對羥基紅花黃色素A的精密度考察,主要通過重復(fù)精密吸取羥基紅花黃色素A的對照品溶液6次,得到相應(yīng)的峰面積,然后計算其精密度,RSD=0.96%,即精密度良好。

        2.1.5 穩(wěn)定性試驗

        該實驗均通過選取供試品溶液,將其分別在0、2、4、6、8、10h五個時間點進(jìn)行進(jìn)樣處理,得出峰面積,最終計算得出RSD=1.23%,表明穩(wěn)定性良好[11]。

        2.1.6 重現(xiàn)性試驗

        按照穩(wěn)定性的測定方法,測定同一樣品的6份供試品溶液,得出峰面積并計算其含量,得到其平均值為2.16%,RSD=1.68%。

        2.1.7 加樣回收率試驗

        加樣回收率的測定主要是將從供試品取出的9個試樣,依次分別加入2、3、4mL對照品溶液中,按上述供試品溶液的方法制備,同時進(jìn)樣,測定峰面積,最終計算其平均回收率為99.6%,RSD=1.62%。

        2.2 羥基紅花黃色素A提取工藝的確定

        2.2.1 正交設(shè)計表

        本次研究對于羥基紅花黃色素A的提取采用浸漬法進(jìn)行提取,浸漬攪拌速度20r每分鐘,首先對影響浸漬法提取的相關(guān)因素進(jìn)行優(yōu)選分析,包括加水量、浸泡次數(shù)、浸提時間,分別用A、B、C表示。依據(jù)L9(34)正交表進(jìn)行分析研究,每個影響因素的選擇要≧3,具體見表1。

        2.2.2 試驗方法

        依據(jù)上述正交設(shè)計表,制備提取物并將其分為9個實驗小組,并在色譜條件下測定羥基紅花黃色素A的質(zhì)量分?jǐn)?shù)及提取率,見表2。其中,提取率=提取液中HYSA的含量/藥材中羥基紅花黃色素A的含量×100%[12]。

        2.3 結(jié)果

        9組實驗采用控制變量法進(jìn)行,由表2及表3可知,采用浸漬法提取的最佳提取工藝的條件為A3、B2和C2。同時,可知加水量(A)對羥基紅花黃色素A的提取有明顯的影響,因此提取過程中要嚴(yán)格把關(guān)。而浸泡次數(shù)(B)、浸泡時間(C)兩者對提取工藝的影響不大,這也是日常生活中為何提取時將紅花多浸泡一次的原因。最后,我們也不難發(fā)現(xiàn)加20倍的水同時浸泡40min為最優(yōu)提取方案。具體見表2。

        2.4 羥基紅花黃色素A的純化研究

        臨床上常用大孔樹脂對初步提取的羥基紅花黃色素A進(jìn)行純化,本研究選取南開大學(xué)化工廠生產(chǎn)的D-4020型大孔樹脂對羥基紅花黃色素A進(jìn)行提純。這不僅由于大孔樹脂對于羥基紅花黃色素A的吸附率、解析率高,而且有極好的轉(zhuǎn)移率。本研究主要通過靜態(tài)吸附洗脫篩選→動態(tài)吸附量及吸附曲線考察→洗脫溶媒的選擇→驗證實驗等4大流程對采用大孔樹脂對羥基紅花黃色素A進(jìn)行提純的可行性進(jìn)行研究。具體見張靜、陳紅專、王海亮等所發(fā)表文獻(xiàn)[13]。

        3 討論

        藥理研究表明,羥基紅花黃色素A為水溶性物質(zhì),因此,在本次研究中將其溶媒選用蒸餾水,這樣不僅經(jīng)濟(jì)實惠,而且有助于環(huán)境保護(hù)。而且無需考慮其他溶媒的因素?,F(xiàn)階段,對羥基紅花黃色素A的提取有煎煮法、冷侵法、溫浸法等手段。但由于羥基紅花黃色素A的熱穩(wěn)定性差,因此本次研究不選用煎煮法,而選用浸漬法[14]。

        由上述研究結(jié)果可知,影響浸漬法提取羥基紅花黃色素A的因素有浸泡時間,浸泡水量以及浸泡次數(shù)。其中,以浸泡水量為較大的影響因素。由上述結(jié)果可知,在相同浸泡次數(shù)和浸泡時間情況下,在一定范圍內(nèi),浸泡水量越多羥基紅花黃色素A的提取率越高。而在加20倍的水同時浸泡40min的條件為最優(yōu)提取方案,其提取率高達(dá)92.81%。遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于其他條件下浸泡法的提取率。

        對于羥基紅花黃色素A含量的測定,本研究主要采用高效液相色譜法,該方法不僅克服了傳統(tǒng)化學(xué)法不能定量考察的弊端;而且克服了分光光度法及薄層層析法只能測量藥物中總黃色素、紅色素含量的缺點,以及薄層層析法誤差大等缺點。高效液相色譜法用于測量羥基紅花黃色素A的含量便捷、高效、準(zhǔn)確。值得臨床推廣應(yīng)用[15]。

        總之,由于羥基紅花黃色素A具有良好的水溶性以及熱穩(wěn)定性差等特點,因此提取過程中應(yīng)避免長時間高溫處理,選用浸漬法提取工藝能很好控制溫度,同時掌控好侵泡用水量及時間,能夠達(dá)到很高的提取率。而對于它的提純選用大孔樹脂技術(shù)同樣具有上述優(yōu)點,能夠很好保護(hù)羥基紅花黃色素A,避免其被破壞,最終得到純度極高的羥基紅花黃色素A。

        參考文獻(xiàn)

        [1] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典(一部)[S].北京:中國醫(yī)藥科技出版社,2010.

        [2] 王玥,杜守穎,吳清,等.紅花中羥基紅花黃色素A的閃式提取工藝研究[J].時珍國醫(yī)國藥,2012,23(9):2144-2145.

        [3] 牟學(xué)文,田喜蓮.60Co-γ輻照對紅花藥材及醇提取物羥基紅花黃色素A的影響[J].中國藥事,2012,26(3):232-234.

        [4] 唐紅,舒華,周文飛,等.紅花中羥基紅花黃色素A的純化工藝研究[J].廣州化工,2014,42(15):67-69,79.

        [5] 劉紅.羥基紅花黃色素A的提取及含量測定[J].新疆醫(yī)科大學(xué)學(xué)報.2008,31(10):1358-1360.

        [6] OUYANG Z,PAN L L,TANG J M,et al.Studies on pharmaco-kinetics of ferulaic acid,Rhizoma Chuanxiong and Nao desheng capsule in rat[J].China J Chin Mat Med (中國中藥雜志),2010,35(2):226-228.

        [7] 張國霞,王維波,陳德道,等.紅花中羥基紅花黃色素A的加速穩(wěn)定性研究[J].中國實驗方劑學(xué)雜志,2014,15(3):86-88.

        [8] 陳常蓮,胡斯樂.HPLC測定蒙藥德都紅花七味丸中羥基紅花黃色素A的含量[J].中國中藥雜志,2012,37(23):3673.

        [9] 白鳳英.HPLC法測定新紅花-8味丸中羥基紅花黃色素A的含量[J].北方藥學(xué),2012,9(4):2.

        [10] LI J R,SUN M J,CHEN X J,et al.HPLC analysis of the hydroxysafflor yellow A in excretion of rat[J].Pharm Clin Res(藥學(xué)與臨床研究),2009,17(3):191-194.

        [11] 馮旭,湯建明,曹旭,等.羥基紅花黃色素A、紅花提取物及復(fù)方腦得生片中羥基紅花黃色素A在大鼠體內(nèi)的排泄比較研究[J].中國藥學(xué)雜志,2012,47(6):448-454.

        [12] 岳玉蓮,李元,齊小輝,等.新疆紅花黃色素的分離提取與純化的研究[J].食品工業(yè)科技,2012,33(4):343-352.

        [13] 馮俊俐,王巧麗,陳筱云.紅花中羥基紅花黃色素A的提取純化工藝研究[J].中醫(yī)藥學(xué)報,2013,41(6):13-15.

        [14] 柳肖蓮.中藥炮制方法對臨床應(yīng)用療效分析[J].大家健康,2014,8(5):50-51.

        [15] 羅晶,黃宇玫,曾文雪,等.紅花中羥基紅花黃色素A的提取工藝及其熱穩(wěn)定性研究[J].江西中醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2009,21(5):39-42.

        日本一道dvd在线中文字幕 | 18成人片黄网站www| 亚洲欧美精品91| 中文字幕在线观看乱码一区| 亚洲精品一区二区在线播放| 一区二区三区日韩精品视频| 美女视频在线观看亚洲色图| 亚洲一区二区三区无码久久| 成人国产精品999视频| 偷拍自拍一区二区三区| 好看的日韩精品视频在线 | 日本午夜伦理享色视频| 新婚少妇无套内谢国语播放| 玩弄白嫩少妇xxxxx性| 久久婷婷国产剧情内射白浆| 久久99精品波多结衣一区| 免费人妻精品一区二区三区| 色综合久久无码五十路人妻 | 日本一本免费一二区| 被群cao的合不拢腿h纯肉视频| 色欲AV成人无码精品无码| 国产精品亚洲一区二区三区久久| 男人吃奶摸下挵进去啪啪软件| 亚洲一区二区三区成人网站| 精品日韩欧美| 精品少妇人妻av一区二区蜜桃| 狠狠人妻久久久久久综合蜜桃| 全免费a级毛片免费看视频| 亚洲中文字幕乱码一二三区| 国产亚洲精品av一区| 国产无遮挡又黄又爽在线观看| 调教在线播放黄| 亚洲六月丁香色婷婷综合久久| 日韩亚洲一区二区三区四区| 国产深夜男女无套内射| 亚洲一区sm无码| 精品黑人一区二区三区久久hd | 国产亚洲精品成人无码精品网站| 欧美日韩综合在线视频免费看 | 国产美女精品AⅤ在线老女人| 美女脱了内裤洗澡视频|