張海鵬,梁鵬鋒,苗 峰(.陜西省中醫(yī)醫(yī)院普外科，西安 7000;.陜西省渭南市中心醫(yī)院普外科 74000;.陜西省西安市兒童醫(yī)院新生兒外科 70056)

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·論 著·

PTEN、p53和Survivin表達在胃癌組織中的意義

張海鵬1,梁鵬鋒2,苗 峰3(1.陜西省中醫(yī)醫(yī)院普外科，西安 710003;2.陜西省渭南市中心醫(yī)院普外科 714000;3.陜西省西安市兒童醫(yī)院新生兒外科 710056)

目的 探討PTEN、p53和Survivin表達在胃癌組織中的臨床意義。方法 選擇2010～2013年陜西省中醫(yī)醫(yī)院收治的60例胃癌患者的胃癌標本作為A組，選擇同期于陜西省中醫(yī)醫(yī)院手術切除吻合口切緣處的正常胃黏膜60例作為B組，另取不典型增生胃黏膜石蠟標本65例作為C組，采用免疫組織化學鏈霉親和素方法檢測Survivin、PTEN和p53基因在3組中的表達情況。結果 胃癌組織中的Survivin、p53基因陽性率高于其他兩組，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；Survivin基因的陽性表達和p53陽性呈正相關(P<0.05)，和PTEN陰性率呈負相關(P<0.05)；統(tǒng)計結果顯示，3種基因在胃癌不同病理指標中的陽性表達差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。結論 Survivin、PTEN和p53基因異常表達和胃癌發(fā)生有密切的關系，其中PTEN與p53基因是判斷胃癌生物學行為的重要指標，Survivin、PTEN、p53基因在胃癌發(fā)生及發(fā)展中有著相互協(xié)同的作用。

Survivin基因； PTEN基因； p53基因； 胃癌

胃癌是世界上發(fā)病率較高的癌癥，中國是一個胃癌高發(fā)國家，依據目前的研究結果，胃癌病因學、發(fā)病機制和胃癌的轉移機制等尚仍未完全研究清楚[1-2]。本研究通過免疫組化法檢測胃癌標本、不典型增生胃黏膜以及正常胃黏膜的Survivin、張力蛋白同源物基因(PTEN)和p53的表達情況，并進行比較，同時分析各基因表達和患者的一般情況、腫瘤的浸潤深度及分化程度等參數的相關性，進一步闡明在胃癌的發(fā)生、發(fā)展中的具體分子調控機制，從而有利于判斷胃癌預后及為相應的治療提供重要的理論依據，現(xiàn)將情況報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選擇2010～2013年陜西省中醫(yī)醫(yī)院收治的60例胃癌患者的胃癌標本作為A組，選擇同期于陜西省中醫(yī)醫(yī)院手術切除吻合口切緣處的正常胃黏膜60例作為B組，另取不典型增生胃黏膜石蠟標本65例作為C組。A組中男38例，女22例，年齡48～75歲，平均(53.5±2.8)歲。B組中男34例，女26例，年齡46～77歲，平均(52.8±2.7)歲。C組中男35例，女30例，年齡46～78歲，平均(54.5±3.6)歲。所有標本均在術后用40 g/L甲醛進行固定處理，并使用石蠟包埋。3組患者在性別、年齡等一般資料方面差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2 方法 兔抗人PTEN、山羊抗人Survivin相關性抗體、p53相關性抗體，山羊抗兔及兔抗山羊SABC試劑盒和DAB顯色液均于博士德生物工程有限公司購買。標本進行常規(guī)的脫蠟水化之后，置于0.01 mol/L的枸櫞酸緩沖液中進行微波抗原修復，并在室溫下進行冷卻。按照SABC試劑盒的說明書進行相關的操作，其中DAB顯色及蘇木素的復染使用已知陽性片與PBS分別進行陽性與陰性的對照。

1.3 評價指標 (1)Survivin基因陽性表達判斷：染色陽性信號棕黃色顆粒，大部分在細胞質，偶在細胞核。其中每張切片檢測5個視野，染色強度高于背景則為陽性，陽性細胞數小于10%為(+)，10%～60%為(++)，高于60%則為(+++)，染色強度和背景之間無明顯差異則為(-)。(2)PTEN基因的陽性表達判斷：染色陽性呈棕黃色顆粒，于細胞質內，同樣每張切片檢測5個視野，陽性細胞小于10%為(-)，陽性細胞10%～40%則為(+)，介于40%～70%為(++)，高于70%則為(+++)。(3)突變型p53基因陽性表達判斷：染色陽性呈棕黃色顆粒，在細胞核內。每張切片檢測5個視野，其中陽性細胞數小于5%則為(-)，5%～25%則為(+)，25%～50%則為(++)，高于50%為(+++)。

1.4 統(tǒng)計學處理 采用SPSS18.0統(tǒng)計軟件進行統(tǒng)計學分析，采用等級秩和檢驗及χ2檢驗，以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。

2 結 果

2.1 各組中Survivin基因、PTEN基因、突變型p53基因表達情況比較 胃癌組織中的Survivin基因、p53基因陽性率高于其他兩組，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。見表1。

表1 各組中Survivin基因、PTEN基因、突變型p53基因表達情況比較

2.2 Survivin基因、p53基因和PTEN表達之間的相關性 Survivin基因的陽性表達和p53陽性關系密切呈正相關(P<0.05)；和PTEN陰性率呈負相關(P<0.05)，具體見表2。

表2 Survivin基因、p53基因和PTEN表達之間的相關性

表3 胃癌各病理指標和Survivin基因、PTEN基因、p53 基因陽性表達之間的關系[n(%)]

注：與中、高分化胃癌相比，aP<0.05；與浸潤至漿膜層外胃癌相比，bP<0.05；與無臟器轉移胃癌相比，cP<0.05；與無淋巴結轉移胃癌相比，dP<0.05。

2.3 胃癌各病理指標和Survivin基因、PTEN基因、p53基因陽性表達之間的關系 統(tǒng)計結果顯示，3種基因在胃癌不同病理指標中的陽性表達差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)，具體見表3。

3 討 論

已有研究表明，腫瘤細胞不僅存在增殖及分化方面的異常，還具有凋亡的異常，并且在細胞凋亡抑制方面，和惡性腫瘤發(fā)生、發(fā)展之間具有較為密切的關系。Survivin基因屬于一種凋亡抑制基因，在人體的生理狀態(tài)之下，通過細胞凋亡的發(fā)生，對體內衰老的及異常的細胞進行清除，對人體內的組織動態(tài)平衡的保持具有積極的作用。研究表明在多步驟的腫瘤發(fā)生早期，多種因素均具有凋亡抑制作用，這樣在促進細胞繼續(xù)增殖方面就產生了有利的條件，同時有利于異?；蜻M一步積聚和表達，使細胞更加趨于惡性轉化，對腫瘤發(fā)生和發(fā)展產生了積極的作用[3-6]。本研究中Survivin基因在胃癌中的陽性表達率為75.00%，在不典型增生胃黏膜中陽性表達率為40.00%，而在正常的胃黏膜中則不表達，結果提示Survivin基因表達在胃癌惡性轉化早期及進展期較為活躍，Survivin基因和胃癌發(fā)生、發(fā)展具有密切的關系，Survivin基因在胃癌組織和不典型增生癌前病變中異常的表達抑制了異常突變細胞凋亡的發(fā)生，擾亂細胞的生長及凋亡，從而促使了細胞逃離生長監(jiān)控，加劇了腫瘤細胞的生長。PTEN基因是一種抑癌基因，關于PTEN蛋白的表達有較多的研究，結果認為PTEN等位基因失活可通過PTEN蛋白的表達丟失來反映，可以用免疫組織化學方法進行相應的評估。

p53基因蛋白在17號染色體的短臂上，蛋白產物定位在細胞核中，屬于一種含有393個氨基酸的核蛋白，野生型p53的作用是抑制細胞的過度增殖，同時誘導細胞的凋亡，協(xié)調細胞凋亡和增殖的速度，同時具有防止細胞異常蓄積及惡性生長的作用，p53基因突變之后，其表達就失去了抑制細胞增殖的作用，從而導致細胞增殖過度。p53基因是迄今為止發(fā)現(xiàn)的和胃癌關系最為密切的一種腫瘤抑制基因。p53缺失或者發(fā)生突變已經被證實和胃癌發(fā)生、發(fā)展具有密切關系[7-12]。本研究結果顯示，胃癌組織中的Survivin基因、p53基因陽性率高于其他兩組，差異具有統(tǒng)計學意義(P<0.05)；Survivin基因的陽性表達和p53陽性關系密切(P<0.05)，呈正相關，和PTEN陰性率呈負相關(P<0.05)；統(tǒng)計結果顯示，3種基因在胃癌不同病理指標中的陽性表達差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。研究結果顯示，胃癌中PTEN和突變型p53的表達呈負相關關系。胃癌發(fā)生是一個關于多種癌基因激活及抑癌基因失活過程的協(xié)調作用，PTEN與p53基因在胃癌組織中表達關系說明兩者對胃癌發(fā)生、發(fā)展具有協(xié)同的作用。本研究同時發(fā)現(xiàn)胃癌組織中Survivin基因表達和PTEN基因表達具有負相關的關系，由此可見兩者在胃癌發(fā)病過程中也具有協(xié)同的作用。

綜上所述，Survivin、PTEN 和p53基因異常表達和胃癌發(fā)生有密切的關系，其中PTEN與p53基因是判斷胃癌生物學行為的重要指標，Survivin、PTEN、p53基因在胃癌發(fā)生及發(fā)展中有著相互協(xié)同的作用。

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Clinical significance of PTEN,p53 and Survivin expression in gastric carcinoma

ZHANGHai-peng1,LIANGPeng-feng2,MIAOFeng3

(1.DepartmentofSurgery,ShaanxiProvincialHospitalofTraditionalChineseMedicine,Xi′an,Shaanxi710003,China;2.DepartmentofGeneralSurgery,WeinanMunicipalCentralHospital,Weinan,Shaanxi714000,China;3.DepartmentofNeonatalSurgery,Xi′anMunicipalChildren′sHospital,Xi′an,Shaanxi710056,China)

Objective To investigate the expression and clinical significance of PTEN,p53 and Survivin in gastric carcinoma tissue.Methods The gastric carcinoma samples in 60 cases of gastric carcinoma in the 2010 and 2013 in Shaanxi Provincial Hospital of Traditional Chinese Medicine were selected as the group A,at the same period 60 samples of normal gastric mucosa in anastomosis stoma incisal edge in this hospital as the group B and 65 paraffin samples of atypical dysplasia gastric mucosa as the group C.The immunohistochemical streptavidin-biotin method was adopted to detect the expression of Survivin,PTEN and p53 gene in these three groups.Results The positive rate of Survivin and p53 gene in the gastric cancer tissue were higher than the that in the other two groups,the difference was statistically significant(P<0.05);the positive expression of Survivin gene was closely related with the p53 positive(P<0.05),showing the positive correlation,and the negative correlated with PTEN negative rate (P<0.05);the statistic results showed that the positive expression of three genes had statistical difference among different pathological indicators of gastric cancer (P<0.05).Conclusion The abnormal expression of Survivin,PTEN and p53 gene has the close relation with gastric cancer occurrence,in which PTEN and p53 gene are the important indicator for judging the biological behavior of gastric cancer,Survivin,PTEN and p53 gene have a mutual synergistic effect in the occurrence and development of gastric carcinoma.

Survivin gene; PTEN gene; p53 gene; gastric carcinoma

張海鵬,男,本科，主治醫(yī)師，主要從事肝膽胃腸方面的臨床工作。

10.3969/j.issn.1672-9455.2015.18.020

A

1672-9455(2015)18-2700-03

2015-04-15

2015-05-07)