羅文英,吳顯勁,麥 奇,林 湛,許藍(lán)月(廣東醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科,廣東湛江 524001)
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·論 著·
2012~2014年尿液標(biāo)本病原菌的分布特征及耐藥性分析*
羅文英,吳顯勁,麥 奇,林 湛,許藍(lán)月(廣東醫(yī)學(xué)院附屬醫(yī)院檢驗(yàn)科,廣東湛江 524001)
目的 探討該院尿路感染患者的臨床分布和耐藥性特征,為臨床診治尿路感染提供參考依據(jù)。方法 收集2012~2014年該院住院或門診患者的尿液標(biāo)本中分離培養(yǎng)獲得的菌株數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。結(jié)果 該院尿路感染患者不同年份男女性別比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。以泌尿外科、腎病內(nèi)科、神經(jīng)內(nèi)科、顱腦外科居多,致病菌主要以革蘭陰性菌為主,分離菌以大腸埃希菌居首位。腸桿菌科細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類藥物厄他培南、亞胺培南的耐藥率最低,其耐藥率為0.0%~25.9%,但在2014年耐藥率相對(duì)于前2年均有升高表現(xiàn)。有些致病菌在2014年的耐藥率低于2012、2013年。結(jié)論 該院尿路感染患者呈逐年遞增趨勢,每年感染菌株種類有所不同,開展耐藥機(jī)制研究對(duì)臨床合理、規(guī)范用藥及防治泛耐藥或全耐藥菌株很有幫助。
尿路感染; 細(xì)菌培養(yǎng); 耐藥
尿路感染是臨床常見的感染性疾病之一,由于廣譜抗菌藥的廣泛使用和臨床抗菌藥物的不合理應(yīng)用,尿路感染病原菌的耐藥性也越來越顯著,導(dǎo)致尿路感染治愈難度加大。為了解本院尿液標(biāo)本的臨床分布特征和耐藥性變遷,為臨床診治尿路感染提供參考依據(jù),回顧性分析本院2012~2014年尿液標(biāo)本病原菌的臨床分布特征和耐藥性特征,現(xiàn)將有關(guān)情況報(bào)道如下。
1.1 材料 收集2012~2014年本院住院或門診患者的尿液標(biāo)本中分離培養(yǎng)獲得的菌株,剔除同一患者同一部位重復(fù)分離菌株。
1.2 標(biāo)本采樣及菌株鑒定 嚴(yán)格按照《全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》3版及《臨床微生物尿道感染實(shí)驗(yàn)室操作規(guī)范》進(jìn)行[1]。
1.3 儀器與試劑 應(yīng)用法國生物梅里埃公司VITEK2 COMPACT全自動(dòng)細(xì)菌鑒定及藥敏分析系統(tǒng)進(jìn)行菌株鑒定及藥敏試驗(yàn),部分手動(dòng)藥敏試驗(yàn)采用K-B紙片擴(kuò)散法,參照美國臨床實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化委員會(huì)2011~2013年版標(biāo)準(zhǔn)判斷藥敏試驗(yàn)結(jié)果。念珠菌采用顯色平板鑒定和K-B法藥敏試驗(yàn)。藥敏紙片購自英國Oxoid公司,哥倫比亞血瓊脂平板購自江門市凱琳公司,M-H瓊脂平板購自上??片敿喂荆湍妇b定試劑盒(比色法) 購自華鑫科技有限公司。
1.4 質(zhì)量控制 以金黃色葡萄球菌ATCC 25923、大腸埃希菌ATCC 25922及銅綠假單胞菌ATCC27853進(jìn)行質(zhì)量控制。
1.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 所有數(shù)據(jù)用WHONET5.6軟件及SPSS13.0進(jìn)行分析,計(jì)數(shù)資料以率表示,組間比較采用χ2檢驗(yàn),以P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
2.1 一般資料 2012~2014年尿液標(biāo)本分離病原菌的性別分布狀況顯示,2012年男74例,女54例;2013年男211例,女239例;2014年男791例,女720例。不同年份之間性別分布數(shù)經(jīng)χ2檢驗(yàn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ2=6.309,P=0.043)。2012、2013、2014年平均年齡分別為60.92、60.02、61.90歲,最小年齡分別為0、1、1歲,最大年齡分別為92、93、95歲。
2.2 不同科室病原菌分布情況 2012~2014年病原菌在不同科室的分布情況顯示,不同年份不同科室間分離菌株經(jīng)非參數(shù)檢驗(yàn)具有明顯差異(χ2=128.362,P=0.000)。3年共分離病原菌2 748株,泌尿外科分離病原菌最多(704株,構(gòu)成比為25.62%),腎病內(nèi)科其次(256株,構(gòu)成比為9.32%),神經(jīng)內(nèi)科第3(233株,構(gòu)成比為8.48%),顱腦外科第4(218株,構(gòu)成比為7.93%)。
2.3 病原菌的分布特征 2012~2014年尿液標(biāo)本不同年份分離病原菌的變化趨勢顯示,3年從臨床送檢的尿液標(biāo)本中共分離培養(yǎng)出2 748株病原菌,其中革蘭陰性(G-)桿菌合計(jì)2 342株(構(gòu)成比為85.23%),革蘭陽性(G+)球菌合計(jì)307株(構(gòu)成比為11.17%),白色念珠菌合計(jì)為99株(構(gòu)成比為3.23%)。主要菌株株數(shù)及構(gòu)成比為:大腸埃希菌1 359株(構(gòu)成比為49.45%);肺炎克雷伯菌355株(構(gòu)成比為12.92%);銅綠假單胞菌212株(構(gòu)成比為7.71%),糞腸球菌172株(構(gòu)成比為6.26%),奇異變形桿菌135株(構(gòu)成比為4.91%),鮑曼不動(dòng)桿菌145株(構(gòu)成比為5.28%),屎腸球菌94株(構(gòu)成比為3.42%),白色念珠菌99株(構(gòu)成比為3.60%),陰溝腸桿菌56株(構(gòu)成比為2.04%),摩根菌摩根亞種34株(構(gòu)成比為1.24%),弗勞地檸檬酸桿菌32株(構(gòu)成比為1.16%),金黃色葡萄球菌27株(構(gòu)成比為0.98%),表皮葡萄球菌14株(構(gòu)成比為0.51%),黏質(zhì)沙雷菌黏質(zhì)亞種14株(構(gòu)成比為0.51%)。2014年病原菌分離數(shù)量均高出其他2年每年分離菌株數(shù)。黏質(zhì)沙雷菌黏質(zhì)亞種僅在2014年分離出。弗勞地檸檬酸桿菌及白色念珠菌僅在2013、2014年分離出,奇異變形桿菌及陰溝腸桿菌在2012年未分離出。
2.4 產(chǎn)ESBLs細(xì)菌檢出率 2012~2014年大腸埃希菌與肺炎克雷伯菌產(chǎn)超廣譜β-內(nèi)酰胺酶(ESBLs)菌株檢出情況顯示,2012年290株大腸埃希菌檢出產(chǎn)ESBLs菌104株,檢出率為35.86%;89株肺炎克雷伯菌檢出產(chǎn)ESBLs菌32株,檢出率為35.96%。2013年258株大腸埃希菌檢出產(chǎn)ESBLs菌129株,檢出率為50.00%;64株肺炎克雷伯菌檢出產(chǎn)ESBLs菌45株,檢出率為70.31%。2014年811株大腸埃希菌檢出產(chǎn)ESBLs菌413株,檢出率為50.92%;202株肺炎克雷伯菌檢出產(chǎn)ESBLs菌104株,檢出率為51.49%。
2.5 主要病原菌的藥敏結(jié)果 尿液培養(yǎng)主要分離細(xì)菌的耐藥率見表1~3。
表1 主要腸桿菌科對(duì)常用抗菌藥物的耐藥率(%)
注:-表示未檢測。
表2 主要非發(fā)酵菌對(duì)常用抗菌藥物的耐藥率(%)
注:-表示未檢測。
表3 主要G+菌對(duì)常用抗菌藥物的耐藥率(%)
注:-表示未檢測。
正常尿液是無菌的,尿路感染病原菌常于患者機(jī)體免疫力低下時(shí)侵入泌尿生殖系統(tǒng)引起原發(fā)或繼發(fā)性尿路感染。本研究分離出2 748株病原菌,病房以泌尿外科分離病原菌最多(共704株,構(gòu)成比為25.62%),腎病內(nèi)科其次(共256株,構(gòu)成比為9.32%),神經(jīng)內(nèi)科第3(共233株,構(gòu)成比為8.48%),顱腦外科第4(共218株,構(gòu)成比為7.93%)。由此可見,尿路感染患者主要來自于泌尿外科手術(shù)患者、長期臥床需要導(dǎo)尿患者或者原發(fā)性尿路感染患者,這與相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道相符[2-3]。因此,對(duì)于外科手術(shù)患者或需要長期導(dǎo)尿患者,需定時(shí)清潔消毒導(dǎo)尿工具,以防發(fā)生繼發(fā)性院內(nèi)感染。本研究中,2012~2014年尿液分離標(biāo)本性別分布差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),男性稍高于女性,這與其他文獻(xiàn)報(bào)道女性高于男性有所不同,考慮可能本院尿路感染原發(fā)性感染患者較少,主要為繼發(fā)性感染患者所致[4-5]。
2012~2014年分離病原菌主要以G-桿菌為主,構(gòu)成比為85.23%,G+球菌構(gòu)成比為11.17%,白色念珠菌構(gòu)成比為3.23%。弗勞地檸檬酸桿菌及白色念珠菌僅在2013年及2014年分離出,奇異變形桿菌及陰溝腸桿菌在2012年未分離出,隨著時(shí)間變化,本院尿路感染患者致病菌也發(fā)生了改變。尿路分離菌以大腸埃希菌排在首位,與文獻(xiàn)[6-7]報(bào)道類似。排在第2、3位的為肺炎克雷伯菌、銅綠假單胞菌,與文獻(xiàn)[4-5]報(bào)道又有所區(qū)別??梢?,本院尿路感染患者大多以快速生長G-桿菌為主。糞腸球菌與鮑曼不動(dòng)桿菌分別位居第4、5位。目前國內(nèi)文獻(xiàn)大多限于尿路感染患者病原菌的臨床分布情況,但對(duì)于尿路致病菌的致病機(jī)制報(bào)道較少,尚有待于進(jìn)一步探討。本研究中分離菌株逐年增加,一方面可能由于本院住院患者逐年增加,另一方面可能由于臨床醫(yī)生對(duì)合理用藥認(rèn)識(shí)水平增加,尿液標(biāo)本送檢率增加所致。2012年尿路標(biāo)本中未分離出白色念珠菌,真菌分離率逐年升高,主要為白色念珠菌,對(duì)于日益增多的真菌感染,考慮主要原因是由于廣譜抗菌藥物大量使用,造成人體菌群失調(diào),免疫力下降,條件致病菌大量繁殖所致,本研究中真菌對(duì)常用抗真菌藥物仍有很高的敏感性。
本院根據(jù)藥敏報(bào)告,若菌株對(duì)藥物耐藥率大于75.0%,建議臨床對(duì)此菌感染不宜選用上述各類抗菌藥物;若菌株對(duì)藥物耐藥率超過50.0%,提示應(yīng)參照藥敏結(jié)果選用;若耐藥率超過40.0%,提示要慎重經(jīng)驗(yàn)用藥;耐藥率超過30.0%,提示預(yù)警信號(hào)。大腸埃希菌、肺炎克雷伯菌、奇異變形桿菌對(duì)哌拉西林/他唑巴坦、頭孢吡肟、頭孢他啶、妥布霉素耐藥率均小于30.0%。腸桿菌科細(xì)菌對(duì)碳青霉烯類藥物厄他培南、亞胺培南、美羅培南的耐藥率最低,但在2014年耐藥率相對(duì)于前3年均有升高表現(xiàn),這與國內(nèi)外報(bào)道相符[8-10]。腸桿菌科細(xì)菌碳青霉烯類藥物耐藥的主要機(jī)制是產(chǎn)碳青霉烯酶,碳青霉烯酶能水解大部分β-內(nèi)酰胺類,對(duì)碳青霉烯類藥物水解率高,主要檢測方法有改良Hodge試驗(yàn),是檢測腸桿菌科細(xì)菌產(chǎn)碳青霉烯酶的表型方法,能檢測到活性較低的碳青霉烯酶,但該方法存在假陽性。而PCR方法則可更加準(zhǔn)確地確證其產(chǎn)酶類型。及時(shí)開展耐碳青霉烯類菌株的耐藥表型與基因型檢測,對(duì)指導(dǎo)臨床合理使用抗菌藥物、延緩細(xì)菌耐藥表型產(chǎn)生、有效控制耐藥菌株播散具有十分重要的臨床意義,本實(shí)驗(yàn)室有待于開展此類研究。本實(shí)驗(yàn)室在2014年對(duì)大腸埃希菌及陰溝腸桿菌提供了替加環(huán)素手動(dòng)藥敏試驗(yàn),敏感率100.0%,它是一種新型靜脈注射用甘氨酰四環(huán)素類抗菌藥物。本研究中,大腸埃希菌及肺炎克雷伯菌產(chǎn)ESBLs菌株逐年增多,可能為此類菌株對(duì)β-內(nèi)酰胺酶類藥物耐藥的原因之一,對(duì)于ESBLs菌株的出現(xiàn)“應(yīng)避免長期應(yīng)用第3代頭孢菌素或同類間頻繁更換”以減少細(xì)菌對(duì)ESBLs類抗菌藥物耐藥性的產(chǎn)生。本研究非發(fā)酵菌中,銅綠假單胞菌2012~2014年對(duì)氨芐西林/舒巴坦、哌拉西林/他唑巴坦類藥物耐藥率小于30.0%,對(duì)頭孢吡肟、舒普深、妥布霉素、左氧氟沙星、阿米卡星及碳青霉烯類藥物耐藥率較低,但在2012~2014年相繼出現(xiàn)有耐藥率大于30.0%情況,提示要慎重使用此類藥物。鮑曼不動(dòng)桿菌對(duì)大多數(shù)藥物耐藥率超過75.0%,提示鮑曼不動(dòng)桿菌大多為全耐或泛耐菌株。為了給臨床提供更多藥物選擇,本院微生物室在2014年進(jìn)行了舒普深、替加環(huán)素藥敏試驗(yàn),耐藥率均小于30.0%。糞腸球菌對(duì)氨芐西林、呋喃妥因、利奈唑胺、青霉素G、萬古霉素類藥物耐藥率均小于30.0%,尤其對(duì)利奈唑胺、青霉素G、萬古霉素類藥物敏感率為100.0%。屎腸球菌對(duì)利奈唑胺、奎奴普丁/達(dá)福普汀、替加環(huán)素、萬古霉素耐藥率小于30.0%。本研究中,有些致病菌在2014年的耐藥率低于2012、2013年,考慮可能與本院加強(qiáng)耐藥監(jiān)測、臨床不斷規(guī)范抗菌藥物使用有關(guān)。
總之,本院尿路感染患者逐年增加,尿路感染主要致病菌是大腸埃希菌,每年感染菌株種類也有所不同,及時(shí)開展耐藥機(jī)制研究對(duì)臨床合理規(guī)范用藥,防治泛耐藥或全耐藥菌株很有幫助。
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Distribution characteristics and drug resistance analysis of pathogenic bacteria in urine specimens during 2012-2014*
LUOWen-ying,WUXian-jing,MAIQi,LINZhan,XULan-yue
(DepartmentofClinicalLaboratory,AffiliatedHospitalofGuangdongMedicalCollege,Zhanjiang,Guangdong524001,China)
Objective To explore the clinical distribution and drug resistance characteristics of the patients with urinary tract infection in our hospital to provide the reference basis for clinical diagnosis and therapy of urinary tract infection.Methods The data of bacterial strains isolated from urinary specimens in hospitalized patients or outpatients from January 2012 to December 2014 were collected and statistically analyzed.Results The urinary tract infection in our hospital had statistical differences among different ages of male and female patients(P<0.05).The majority were in the departments of urology surgery,nephrology,neurology and craniocerebral surgery.Gram-negative bacteria and Escherichia coli were the main pathogenic bacteria.The resistance of Escherichia coli against ertapenem and imipenem was lowest,its resistance rates ranged 0.0%-25.9%.The drug resistance rate in 2014 presented an upward trend compared with the past two years.The drug resistance rate of some pathogenic bacteria in 2014 was lower than that in 2012 and 2013.Conclusion The patients with urinary tract infection in our hospital show an increasing trend year after year.The infection strains every year are different.Conducting the study of resistance mechanism is very helpful for the clinical reasonable and standard medication and prevention and treatment of pan-drug resistant strains.
urinary tract infection; bacterial culture; drug resistance
國家自然科學(xué)基金資助項(xiàng)目(81301478);廣東醫(yī)學(xué)院博士啟動(dòng)課題(XB1325)。
羅文英,女,博士,主管技師,主要從事病原菌致病機(jī)制及耐藥機(jī)制研究。
10.3969/j.issn.1672-9455.2015.18.002
A
1672-9455(2015)18-2650-04
2015-03-15
2015-04-24)