魏小果

甘肅省人民醫(yī)院消化科，甘肅 蘭州 730000

甘露消毒丹對四氯化碳所致急性肝損傷大鼠的影響

魏小果

甘肅省人民醫(yī)院消化科，甘肅 蘭州 730000

目的：探討甘露消毒丹對CCL4所致急性肝損傷的治療效果及作用機制。方法：將SD大鼠50只隨機分為正常組和藥物組（低、中、高劑量組），每組10只；選用甘露消毒丹對CCL4所致濕熱型急性肝損傷大鼠模型進行干預，檢測生化、免疫、病理、細胞通路等指標。結果：造模后48h模型組大鼠ALT、AST、TB含量明顯升高，與正常組相比差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）；藥物各組與模型組比較，ALT、AST、TB降低，其差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05）。結論：甘露消毒丹具有一定的保肝降酶作用，能顯著改善急性肝損傷大鼠肝組織的病理變化，減輕肝細胞病變程度。

急性肝損傷；甘露消毒丹；四氯化碳

甘露消毒丹是解毒的經(jīng)典驗方，有關其對急性肝損傷的療效雖有一定研究，但多數(shù)局限于臨床癥狀的改善，動物模型研究較少。本研究通過大鼠濕熱模型的建立，探討甘露消毒丹對四氯化碳所致急性肝損傷的治療效果及作用機制。為保肝藥物的篩選提供新的研究思路。

1 材料與方法

1.1 分組 S D大鼠50只，雌雄各半，體質量160～200 g，實驗室動物許可證號S C X K（甘）2004-007，分籠喂養(yǎng)，以D P S軟件（D P S V.8.01版）生成隨機序列號，稱重，按隨機序列號分組，以苦味酸鈉標記，分為正常組（A組）、模型組（B組）、甘露消毒丹低劑量藥物組（C組）、甘露消毒丹中劑量藥物組（D組）、甘露消毒丹高劑量藥物組（E組），每組10只。

1.2 動物模型的建立及給藥 參照文獻[1-2]方法，每只大鼠尾靜脈注射B C G l m g（含1.0×106個活菌/m g)，第11天后由尾靜脈注射LP S30μg／k g制作免疫模型[3]。

先將甘露消毒丹（按《溫熱經(jīng)緯》卷五配伍組成及比例）免煎劑配成每1m L含生藥2.5 g的溶液（原液），按照大鼠每公斤體質量1 g、5 g、25 g分別計算低、中、高劑量藥物組每只大鼠所需原液

量，再以0.9%N S配成總量為2.5m L的溶液灌胃，造模當天開始給藥，每日1次。正常組與模型組給予等量生理鹽水灌胃。

1.3 標本采集和處理 24 h后處死大鼠，股動脈取血，沿腹正中線剖腹，取肝臟組織，去肝臟筋膜，并用肉眼觀察大鼠肝臟的外形、體積、顏色、質地等情況，留取肝組織標本，部分制備肝勻漿，部分以4%多聚甲醛(含0.1%D EPC)固定，作光鏡觀察。1.4 觀察指標及檢測方法 多聚甲醛處理48 h后，股動脈采血，肝素抗凝管接血，以3 000 r p m速度離心10分鐘，取血清200μL，全自動生化儀采用連續(xù)檢測法測定A L T、A S T、T B含量。

1.5 統(tǒng)計學方法 數(shù)據(jù)采用S P SS 19.0統(tǒng)計軟件包進行分析，計量資料以(±s)表示，多組均數(shù)比較采用方差分析，檢驗水準為α=0.05。

2 結果

2.1 對血漿ALT、AST、TB的影響 模型組血清A L T、A S T較正常組明顯升高，T BI L較正常組明顯升高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；與模型組相比，甘露消毒丹低、中、高劑量給藥組均可顯著抑制A L T、A S T、T BI L活力的升高（P＜0.01），表明甘露消毒丹免煎劑可改善B C G/LP S所致大鼠急性肝損傷，見表1。

表1 各組大鼠血清轉氨酶的變化情況(±s,n=10）

表1 各組大鼠血清轉氨酶的變化情況(±s,n=10）

注：與正常對照組比較，▲▲表示P＜0.01，與模型組比較，**表示P＜0.01。

組別A組B組C組D組E組TBIL/（μmol·L-1）0.37±0.31 8.87±5.84▲▲0.59±0.50**0.65±0.48**0.75±0.40**劑量/（g·kg-1）--1 5 2 5用藥天數(shù)/d 11 11 11 11 11 ALT/（U·L-1）70.43±8.44 702.83±571.28▲▲49.33±5.78**55.33±8.85**54.86±20.57**AST/（U·L-1）301.57±66.22 2119.5±1015.27▲▲188.5±39.21**234.83±35.54**235.86±55.11**

2.2 對血漿SOD、MDA的影響 與正常對照組比較，模型組動物肝臟中MDA含量明顯增高，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.01）；與模型組比較，藥物各組MDA含量均有降低，差異有統(tǒng)計學意義（P＜0.05），且以藥物組高劑量組降低最為明顯；藥物組各組S OD活性比較無明顯差異，見表2。

表2 各組血漿中MDA含量和SOD活性比較(±s,n=10）

表2 各組血漿中MDA含量和SOD活性比較(±s,n=10）

注：與正常對照組比較，▲表示P＜0.05，△表示P＞0.05；與模型組比較，■表示P＜0.05，□表示P＞0.05。

組別A組B組C組D組E組劑量/（g·kg-1）SOD(NU/mgprot) 149.29±17.64 135.77±19.49△136.4±23.47□120.41±6.30□131.16±15.73□--1 5 2 5用藥天數(shù)/d 11 11 11 11 11 MDA(nmol/mgprot) 127.1±34.90 156.6±16.11▲105.7±20.19■106.8±32.44■97.94±12.08■

3 討論

A L T主要存在于肝細胞漿中，A S T存在于肝細胞胞漿和線粒體中，肝細胞膜通透性增加或破損，胞漿內(nèi)A L T、A S T釋放入血，使血清中A L T、A S T升高；血清A L T水平的高低可靈敏反映肝細胞變性、壞死的程度[4]。本研究顯示模型組血清A L T、A S T、T BI L含量與正常組相比明顯增高(P＜0.01），表明造模成功。甘露消毒丹免煎劑低、中、高劑量組對四氯化碳損傷大鼠的A L T、A S T、T BI L均有明顯改善作用(P＜0.01），由此推斷不同劑量的甘露消毒丹免煎劑對肝細胞膜的損傷、肝細胞變性或壞死有一定的抑制作用。MDA是脂質過氧化的最終產(chǎn)物，可破壞細胞膜結構，導致細胞腫脹、壞死，其含量高低可反映氧化損傷程度，低、中、高劑藥物組均能降低肝損傷大鼠血清MDA含量(P＜0.05)，可能與甘露消毒丹能夠降低MDA含量，保護肝細胞膜性結構，從而改善肝細胞能量代謝有關。S OD是氧自由基的清除劑，可抑制自由基啟動的脂質過氧化反應，肝細胞受到自由基攻擊時，S OD可因其過度消耗而減少。本研究中模型組血清S OD含量與正常組相比有所降低，藥物組血清S OD含量的變化不明顯，原因有待進一步探討。而甘露消毒丹免煎劑低、中、高劑量治療組組間各指標差異均無統(tǒng)計學意義（P＞0.05），無明顯的量效關系，也無法通過轉氨酶及氧化學指標評判哪組療效更好[5]。

綜上所述，甘露消毒丹免煎劑能夠減輕肝損傷，有保護肝細胞的作用。其作用機制可能與減少脂質過氧化有關，但對S OD的影響并不顯著。

此實驗中仍然存在不完善不成熟的地方，樣本量較小，又為普通級大鼠，大鼠之間的異質性較大，對藥物的反應性的個體差異較大，因而使數(shù)據(jù)間的離散度較大，影響了最終統(tǒng)計結果，使得數(shù)據(jù)有下降的趨勢但無統(tǒng)計學差異。

[1] 連粵湘，龍曉英，吳婉芬，等.雙草退黃沖劑1號治療急性黃疽型肝炎深度黃疸的臨床與實驗研究[J].中國中西醫(yī)結合雜志，2001,21(9)：649-651.

[2] 孫玉芹,高天蕓,周娟，等.川芎嗪對小鼠急性肝損傷性脂肪肝保護作用的研究[J].中國臨床藥理學與治療學，2007，12 (5)：540-543.

[3] 謝春英.溪黃草提取物預防大鼠急性肝損傷的實驗研究[J].中藥材，2007，30（12）：1582-1583.

[4] 顧立，李萬平，黃愛萍.護肝解毒沖劑對大鼠急性肝損傷的保護作用[J].瀘州醫(yī)學院學報2008；31（6）：523-625.

[5] 吳澤明，孫暉，呂海濤，等.代謝物組學研究進展及其在中醫(yī)藥研究中的應用展望[J].世界科學技術：中醫(yī)藥現(xiàn)代化，2007，9（2）:99-103.

Influenceof GanLu XiaoDu Pelleton Ratsw ith Phenoxin-induced Acute Liver Injury

WEIXiaoguo
Gastroenterology Departmentof Gansu Provincial Hospital,Lanzhou 730000,China

Objective:To explore therapeutic effectsof GanLu XiaoDu pelleton CCL4-induced acute liver injury and itsmechanism of liver protection.Methods:Fifty SD ratswere random ly allocated to the normal group and the herbalgroups(low,moderate and high dosagesgroups),ten ratseach group;ratw ith acute liver injury of heatdampness pattern were intervened w ith GanLu XiaoDu pellet to detect the indexesof biochem istry,immune,pathology and cellular pathway.Results:In 48 hours after establishing themodels,the contents of ALT,AST and TB in rats of the modelgroup increased notably,the differencehad statisticalmeaning comparedw ith the normalgroup(P＜0.05);The comparisons among the herbalgroups and themodelgroup showed that the contents of ALT,AST and TB decreased, the difference indicated statisticalmeaning(P＜0.05).Conclusion:GanLu XiaoDu pelletpossesses the functions of protecting liver and lowering transaminase to a certain degree;it could improve pathological changes of liver tissue notably and abate liver injury of the ratesw ith acute liver injury.

acute liver injury;GanLu XiaoDu pellet;phenoxin

R285

A

1004-6852(2015)07-0017-03

2014-10-25

魏小果（1973—），女，副主任醫(yī)師。研究方向：消化系統(tǒng)疾病的診治。