向麗

【摘要】目的：分析γ-干擾素釋放實(shí)驗(yàn)在涂陰肺結(jié)核中的診斷作用。方法：研究對(duì)象為來(lái)自2013年1月至2014年12月期間的肺結(jié)核住院病患164例，其中含有涂陰肺結(jié)核108例，分為肺結(jié)核組與涂陰肺結(jié)核組，同時(shí)選取132例其他肺部疾病患者作為對(duì)照組，運(yùn)用γ-干擾素釋放試驗(yàn)來(lái)進(jìn)行檢驗(yàn)外周血淋巴細(xì)胞對(duì)結(jié)核分枝桿菌菌種的特異性分泌蛋白情況。結(jié)果：肺結(jié)核組中γ-干擾素釋放實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性率為89.63%（147/164），涂陰肺結(jié)核組中其陽(yáng)性率為88.89%（96/108），對(duì)照組為19.7%（23/132）。TST陽(yáng)性率中，肺結(jié)核組為68.29%（112/164），涂陰肺結(jié)核組為71.30%（77/108），對(duì)照組為20.45%（27/132）。結(jié)論：運(yùn)用γ-干擾素釋放實(shí)驗(yàn)可以得到較快、特異性與敏感性高的的涂陰肺結(jié)核的檢查情況，對(duì)于疑似肺結(jié)核的病患檢測(cè)具有較高價(jià)值。

【關(guān)鍵詞】肺結(jié)核；γ-干擾素釋放試驗(yàn)；診斷價(jià)值

【中圖分類號(hào)】R-0 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】1671-8801（2015）01-0429-02

肺結(jié)核病患的及時(shí)治療干預(yù)依賴與有效的診斷，而臨床上涂陰肺結(jié)核病患卻因?yàn)樘低科?xì)菌檢測(cè)為陰性而存在診斷困難，痰培養(yǎng)方式的診斷敏感性低、檢測(cè)周期長(zhǎng)都是相關(guān)困難因素。而γ-干擾素釋放試驗(yàn)已經(jīng)成為臨床上肺結(jié)核的有效診斷方式，廣泛的應(yīng)用于全球范圍。該方式利用肺結(jié)核病患為周血單核細(xì)胞所具有的結(jié)核特異效應(yīng)T淋巴細(xì)胞，在結(jié)核桿菌特異抗原刺激之后分泌INF-γ而開(kāi)展的試驗(yàn)方式，其特異性和靈敏度較高[1-2]。

1 資料與方法

1.1 一般資料

研究對(duì)象為來(lái)自2013年1月至2014年12月期間的肺結(jié)核住院病患164例，其中含有涂陰肺結(jié)核108例，分為肺結(jié)核組與涂陰肺結(jié)核組，同時(shí)選取132例其他肺部疾病患者作為對(duì)照組。結(jié)核病患者納入標(biāo)準(zhǔn)為：（1）年齡在18-65歲范圍內(nèi)；（2）臨床癥狀為咳痰、咳嗽，X線胸片或則胸部CT表現(xiàn)有肺部陰影。排除了妊娠期病患。肺結(jié)核診斷主要依靠臨床癥狀、痰檢、影像檢查資料同時(shí)參照相關(guān)診斷標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。涂陰肺結(jié)核的診斷標(biāo)準(zhǔn)為：（1）有肺結(jié)核臨床癥狀和X線胸片的典型表現(xiàn)；（2）抗結(jié)核治療干預(yù)有效；（3）排除了其他非結(jié)核性肺病者；（4）痰涂片細(xì)菌檢測(cè)為陰性；（5）通過(guò)肺部或支氣管組織病理檢查確診為結(jié)核性病變者。其他肺部疾病納入主要包括支氣管擴(kuò)張、肺癌、慢阻肺、肺炎等。

1.2 方法

所有入選人員均進(jìn)行了痰涂片、痰培養(yǎng)、痰結(jié)核分枝桿菌DNA檢測(cè)，入院第二天進(jìn)行血T-SPOT檢測(cè)以及血清結(jié)核抗體檢測(cè)，以及結(jié)核菌素皮膚試驗(yàn)。

全血T-SPOT試驗(yàn)運(yùn)用試劑盒，抽全血6ml，如果屬于白細(xì)胞量低或者免疫力低者抽取8-10ml，裝入肝素抗凝管中。在6h內(nèi)進(jìn)行外周血單個(gè)核細(xì)胞，運(yùn)用無(wú)血清培養(yǎng)液重懸細(xì)胞將細(xì)胞濃度調(diào)節(jié)到2.5×106/ml，配置成標(biāo)準(zhǔn)的溶液。加入50μl無(wú)血清培養(yǎng)液與加入植物血凝索作為兩組對(duì)照，結(jié)核分枝桿菌的特異抗原A與B于其檢測(cè)孔與陰性、PHA對(duì)照孔。每份標(biāo)本添加含有2.5×105PBMCs的100μl標(biāo)準(zhǔn)溶液到對(duì)照孔與檢測(cè)孔中。拍干之后添加底物顯色溶液，在室溫下進(jìn)行7min孵育。運(yùn)用離子水或蒸餾水進(jìn)行洗滌拍干。將放大鏡做每孔顏色斑點(diǎn)計(jì)數(shù)，依據(jù)抗原A或B孔的反應(yīng)做結(jié)果判斷：（1）無(wú)反應(yīng)性對(duì)照孔的點(diǎn)數(shù)在0-5范圍，如果抗原A或B斑點(diǎn)減去無(wú)反應(yīng)對(duì)照孔點(diǎn)數(shù)在6及以上則為有反應(yīng)性樣本，則為陽(yáng)性；（2）當(dāng)無(wú)反應(yīng)對(duì)照孔點(diǎn)數(shù)在6及以上，而有反應(yīng)性樣本是其2倍及以上，則為陽(yáng)性。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析

將采集到的數(shù)據(jù)通過(guò)spss17.0統(tǒng)計(jì)學(xué)做分析處理，將計(jì)數(shù)資料運(yùn)用卡方來(lái)檢驗(yàn)，計(jì)量資料運(yùn)用t來(lái)檢驗(yàn)，同時(shí)以p<0.05作為組間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義的標(biāo)準(zhǔn)。

2 結(jié)果

表1：肺結(jié)核組與對(duì)照組T-SPOT與TST的檢驗(yàn)情況

注：兩組對(duì)比，P<0.05。

表2：涂陰肺結(jié)核與對(duì)照組T-SPOT與TST的檢驗(yàn)情況

注：兩組對(duì)比，P<0.05。

肺結(jié)核組中γ-干擾素釋放實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性率為89.63%（147/164），涂陰肺結(jié)核組中其陽(yáng)性率為88.89%（96/108），對(duì)照組為19.7%（23/132）。TST陽(yáng)性率中，肺結(jié)核組為68.29%（112/164），涂陰肺結(jié)核組為71.30%（77/108），對(duì)照組為20.45%（27/132）。具體情況如表1所示。

3 討論

γ-干擾素釋放試驗(yàn)在結(jié)核病中的運(yùn)用相關(guān)數(shù)據(jù)還在不斷的積累，其技術(shù)存在的局限性也在逐步被人們注意到。γ-干擾素釋放試驗(yàn)的結(jié)果受到多種因素的干擾，如病患年齡、癌癥化療、營(yíng)養(yǎng)不良、感染等情況。結(jié)核感染的重要參考指標(biāo)之一——TST，接種卡介苗與肺結(jié)核分支桿菌會(huì)影響其特異性，而結(jié)果的判讀又受到檢測(cè)人員水平的差異影響。有相關(guān)數(shù)據(jù)顯示，T-SPOT敏感性高于TST，健康群體中的TST陽(yáng)性率要高于T-SPOT，而T-SPOT不受到卡介苗疫苗的影響。在臨床研究上，TST敏感性與QFT-G有較高的相似性。本研究中，肺結(jié)核組中γ-干擾素釋放實(shí)驗(yàn)陽(yáng)性率為89.63%（147/164），涂陰肺結(jié)核組中其陽(yáng)性率為88.89%（96/108），對(duì)照組為19.7%（23/132）。TST陽(yáng)性率中，肺結(jié)核組為68.29%（112/164），涂陰肺結(jié)核組為71.30%（77/108），對(duì)照組為20.45%（27/132）。可以看出T-SPOT在結(jié)核感染的敏感性要高于TST，同時(shí)有效的在感染與非感染人群中有更高的區(qū)分度。

總體而言，T-SPOT在檢測(cè)的敏感度上，要顯著高于其他檢驗(yàn)方式，無(wú)論是涂陰肺結(jié)核還是常規(guī)肺結(jié)核情況的檢驗(yàn)，其敏感性和特異性更強(qiáng)，檢出是速度也更快，效率更高。

參考文獻(xiàn)：

[1]楊新婷，李琦，賈紅彥.全血γ-干擾素釋放試驗(yàn)在菌陰肺結(jié)核中診斷價(jià)值的臨床觀察[J].中國(guó)臨床醫(yī)生，2013（3）：42-45

[2]陳紅梅，黃移生.γ-干擾素釋放試驗(yàn)在輔助診斷活動(dòng)性肺結(jié)核中的臨床意義[J].中南藥學(xué)，2014（7）：