米劍

【摘要】目的：對不同方法檢測抗鏈球菌溶血素O進(jìn)行比較研究。方法：選取我院2013年2月2014年3月間收治的80例鏈球菌感染患者，分別用溶血抑制法、乳膠凝集試驗(yàn)及自動(dòng)化透射比濁法檢測患者的血清ASO，對ASO增高率進(jìn)行分析比較。結(jié)果：溶血抑制法檢測的ASO增高率為30%，乳膠凝集試驗(yàn)檢測的ASO增高率為37.5%，自動(dòng)化透射比濁法檢測的ASO增高率為43.75%，三組數(shù)據(jù)之間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。結(jié)論：ASO較低或較高水平增高時(shí)，溶血抑制法與乳膠法容易出現(xiàn)誤差，而比濁法檢測ASO的敏感性較佳，結(jié)果重復(fù)性好，檢測ASO比較準(zhǔn)確，值得于臨床推廣應(yīng)用。

【關(guān)鍵詞】不同方法，檢測，抗鏈球菌溶血素O，比較研究

【中圖分類號(hào)】R4 【文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼】B 【文章編號(hào)】1671-8801（2015）01-0112-02

溶血性鏈球菌的感染與急性腎小球腎炎、急性風(fēng)濕熱、風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、風(fēng)濕性心臟病等都有關(guān)[1]。目前，常用來檢測感染溶血性鏈球菌的方法主要有溶血抑制法、乳膠凝集試驗(yàn)及自動(dòng)化透射比濁法等。這三種方法的檢測原理各不相同，結(jié)果也存在差異[2]。為了進(jìn)一步研究三種方法檢測的臨床價(jià)值，我院對2013年2月2014年3月間收治的80例鏈球菌感染患者采取不同方法檢測抗鏈球菌溶血素O進(jìn)行比較研究，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料

選取我院2013年2月2014年3月間收治的80例鏈球菌感染患者，男45例，女35例，年齡9-73歲，平均年齡（42.6±5.8）歲。其中20例急性腎小球腎炎患者，35例游走性關(guān)節(jié)疼痛伴發(fā)熱患者，25例風(fēng)濕熱患者，所有患者均已了解治療方案并簽署了知情同意書，自愿接受檢測安排。抽取患者4 mL空腹靜脈血，分離血清備用，分離血清后-30℃凍存。

1.2方法

溶血抑制法檢測：溶血素來自上海醫(yī)化所，進(jìn)行溶血抑制法檢測；乳膠凝集試驗(yàn)檢測法：將ASO膠乳靈敏度調(diào)整為200IU/ml，超過該滴度便按出現(xiàn)可見的凝集顆粒原理測定，具體 操作方法依據(jù)說明書實(shí)行；自動(dòng)化透射比濁法檢測法：（1）精密度評價(jià)：ASO質(zhì)控品、校準(zhǔn)品，樣品為高濃度血清標(biāo)本，分別重復(fù)測定50次，再計(jì)算均值與變異系數(shù)；（2）定標(biāo)穩(wěn)定性評價(jià)：于第0天定標(biāo)同時(shí)測定質(zhì)控品、校準(zhǔn)品、高濃度血清標(biāo)本，在接下來的3個(gè)月內(nèi)，繼續(xù)用該試劑進(jìn)行檢測，與第0天結(jié)果相比；（3）復(fù)溶后校準(zhǔn)品的穩(wěn)定性評價(jià)：用蒸餾水復(fù)溶凍干校準(zhǔn)品后置于2-8℃，連續(xù)以此標(biāo)本測定2個(gè)月，密切關(guān)注測定值變化；（4）線性測定范圍評價(jià)：凍干校準(zhǔn)品被不同量蒸餾水稀釋為12個(gè)濃度水平，按照不準(zhǔn)確度以確定線性測定范圍；（5）抗干擾性評價(jià)：以遞增方式將干擾物質(zhì)加入血清標(biāo)本，游離膽紅素、血紅蛋白、結(jié)合膽紅素、類風(fēng)濕因子及三酰甘油加入的最高濃度依次為0.18g/L、5.0g/L、0.21g/L、416 Iu/m1、12.82g/L，濁度在660nm處的最高吸光度是0.18。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

數(shù)據(jù)均通過SPSS19.0軟件處理，計(jì)量資料用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用卡方檢驗(yàn)，當(dāng)P<0.05時(shí)表示數(shù)據(jù)間比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 不同方法檢測ASO增高率情況的比較

溶血抑制法檢測的ASO增高率為30%，乳膠凝集試驗(yàn)檢測的ASO增高率為37.5%，自動(dòng)化透射比濁法檢測的ASO增高率為43.75%，三組間數(shù)據(jù)比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。具體見下表1。

表1 不同方法檢測ASO增高率情況的比較

檢測方法 例數(shù) ASO增高率（%）

溶血抑制法 80 24 30

乳膠凝集試驗(yàn) 80 30 37.5

自動(dòng)化透射比濁法 80 35 43.75

X2 3.25

P >0.05

3 討論

鏈球菌溶血素O為A族溶血性鏈球菌代謝產(chǎn)物之一，是一種有溶血活性的蛋白質(zhì)，具備抗原性[3-4]。在人體中A族溶血性鏈球菌作為正常菌群存在，正常情況下人體內(nèi)抗鏈球菌溶血素O（ASO）有一定的基礎(chǔ)值。通常當(dāng)機(jī)體被感染A群溶血性鏈球菌后3周內(nèi)，血清中就會(huì)出現(xiàn)ASO[5]，滴度直到病愈后幾個(gè)月月到半年內(nèi)才可以降為正常水平。所以ASO增高能夠作為機(jī)體感染A群溶血性鏈球菌的標(biāo)志。在臨床上我們通常觀察到有的AS患者出現(xiàn)不同程度的ASO增高，這些患者一般是難治性的AS。感染鏈球菌后[6]，該細(xì)胞壁上的胞漿及其分泌的蛋白質(zhì)或者M(jìn)蛋白發(fā)揮抗原作用，與免疫球蛋白相互結(jié)合后，成為免疫復(fù)合物，沉積在腎小球基底膜從而損傷了腎小球?yàn)V過膜。鏈球菌有些抗原具有陽性電荷，能夠利用電荷反應(yīng)同腎小球結(jié)構(gòu)相互結(jié)合形成原位種植抗原，再結(jié)合免疫球蛋白后成為原位免疫復(fù)合物，從而激活補(bǔ)體，導(dǎo)致腎小球內(nèi)系膜細(xì)胞及皮質(zhì)細(xì)胞增生，吸引單核細(xì)胞與中性粒細(xì)胞浸潤導(dǎo)致病變。測定抗鏈球菌溶血素O抗體，對診斷急性腎小球腎炎有十分重要的意義。有70-80%的急性腎小球腎炎患者能夠因抗鏈球菌溶血素O抗體增高滴度。

以前多選擇溶血抑制法檢測ASO，該方法按照還原劑助O溶血素可以溶解紅細(xì)胞的特點(diǎn)，觀察ASO中和O溶血素溶血效果，定量檢測ASO，雖然方法敏感，但是操作比較煩瑣，影響試驗(yàn)因素多，結(jié)果重復(fù)性不佳[7]。近幾年來，國外通常選擇使用比濁法，其操作自動(dòng)化，穩(wěn)定的試劑，定量的結(jié)果，我國也正在逐漸引用，但因試驗(yàn)費(fèi)用、儀器設(shè)備經(jīng)常受到限制。現(xiàn)在比較普遍的方法是乳膠凝集試驗(yàn)，其敏感性差，只可以定性，影響的因素較多，對觀察病情與療效不利。本次研究我院同時(shí)采用了上述三種方法檢測80份樣本，結(jié)果顯示溶血抑制法檢測的ASO增高率為30%，乳膠凝集試驗(yàn)檢測的ASO增高率為37.5%，自動(dòng)化透射比濁法檢測的ASO增高率為43.75%，三組數(shù)據(jù)之間比較無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。檢測的敏感性：自動(dòng)化透射比濁法>乳膠凝集試驗(yàn)檢測>溶血抑制法溶血法。值得注意的是，ASO水平較高抗體過剩時(shí)，溶血抑制法與乳膠法常規(guī)操作會(huì)呈假陰性，容易出現(xiàn)漏檢、誤檢。故由此可知，上述三種方法相比，可見比濁法檢測ASO的敏感性較佳，結(jié)果重復(fù)性好，檢測ASO比較準(zhǔn)確，值得推廣。

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