李文超　李曉東

摘 要：本次檢測采用自然沉降法對(duì)空氣中的細(xì)菌進(jìn)行采集，進(jìn)行培養(yǎng)后對(duì)所有培養(yǎng)皿里的生長的菌落數(shù)量進(jìn)行統(tǒng)計(jì)，同時(shí)設(shè)置了四個(gè)地點(diǎn)，分別于兩個(gè)不同時(shí)間段采樣進(jìn)行對(duì)比。結(jié)果表明，空氣中細(xì)菌的數(shù)量在人流高峰時(shí)比人流低峰多，同時(shí)也和環(huán)境的感官衛(wèi)生呈正向關(guān)系。檢測空氣中的細(xì)菌數(shù)量為控制空氣污染提供了參照，同時(shí)也能指導(dǎo)對(duì)空氣污染的治理。

關(guān)鍵詞：細(xì)菌；空氣污染；自然沉降法；基礎(chǔ)培養(yǎng)基

微生物可以通過空氣進(jìn)行擴(kuò)散，空氣中的微生物包括真菌、細(xì)菌、病毒等，這些微生物是空氣污染的重要組成部分。細(xì)菌在空氣中的微生物中占絕大多數(shù)量，空氣中的細(xì)菌主要來自于土壤，水體，各種腐爛的有機(jī)物，人畜呼吸道的飛沫及動(dòng)植物體表的干燥的脫落物，空氣中的細(xì)菌數(shù)量可以反映所在區(qū)域的空氣質(zhì)量，是大氣環(huán)境污染的一個(gè)重要參數(shù)[1]。因此，空氣的清潔程度可以通過測定空氣中的細(xì)菌總數(shù)來評(píng)價(jià)[2]。加強(qiáng)對(duì)空氣中的細(xì)菌數(shù)量的監(jiān)測，對(duì)于預(yù)防和監(jiān)控疾病的傳播起著積極的作用[3]。

1 實(shí)驗(yàn)條件與方法

1.1 實(shí)驗(yàn)材料

牛肉膏、蛋白胨、氯化鈉、瓊脂、蒸餾水、磷酸氫二鈉、紗布、脫脂棉、0.1mol/L氫氧化鈉溶液、0.1mol/L鹽酸溶液。

1.2 實(shí)驗(yàn)儀器與設(shè)備

培養(yǎng)皿、電爐、溶解鍋、恒溫箱、高壓蒸汽滅菌鍋、天平、大、小燒杯、玻璃棒、噴壺、量筒、超凈工作臺(tái)、放大鏡、記號(hào)筆、尺子、藥匙。

1.3 實(shí)驗(yàn)方案

1.3.1 培養(yǎng)基的配置

（1）稱取和配置。用量筒量取蒸餾水，平均分為兩份，一份加熱，再用天平稱取瓊脂加入水中，加熱至瓊脂完全溶解；取另一份蒸餾水加熱稱取牛肉膏，氯化鈉，蛋白胨，加入水中，加熱溶解。然后將兩份溶液混合均勻，倒入兩倍于培養(yǎng)基的容器。在加熱過程中不斷用玻璃棒攪拌，防止焦化。（2）校正pH。配制0.2mol/L酚紅指示劑。 稱取0.1g酚紅，加入乳缽中邊研磨邊加入0.01mol/L NaOH 28.2ml，加蒸餾水500ml。配制1/15mol/L磷酸二氫鈉溶液。稱取磷酸二氫鈉9.47g加水至1000ml于試管中分別取適宜pH適宜量的磷酸二氫鈉，并加入0.5ml酚紅指示劑混勻作標(biāo)準(zhǔn)比色管。取相同口徑試管四支，第1、3支加入培養(yǎng)基5ml，1試管內(nèi)加入0.2g/L酚紅0.25ml，2試管中加入蒸餾水5ml，4管為標(biāo)準(zhǔn)比色管。

（3）澄清、過濾。用兩層紗布，中間夾有薄層吸水棉，趁熱進(jìn)行過濾，直至透明無沉淀。（4）滅菌。將配制好的培養(yǎng)基倒入錐形瓶中，用紗布和牛皮紙將瓶口封緊放入高壓蒸汽滅菌鍋中，103.43kPa（121.3攝氏度）滅菌15-20分鐘，保證滅菌效果，同時(shí)不損傷培養(yǎng)基的有效成分。（5）分裝。將超凈工作臺(tái)打開，一手持培養(yǎng)皿，一手持錐形瓶，開塞前在酒精燈上過火1-2次，迅速倒入10ml，再過火1-2次塞回。培養(yǎng)基不能超過培養(yǎng)皿容積的2/3。（6）檢定。一般性狀的檢定：顏色：不宜太深。澄清度：應(yīng)無絮狀物或沉淀。pH：進(jìn)行第二次檢測與校正。水分：應(yīng)補(bǔ)充失去的水分。無菌檢查：將配制好的培養(yǎng)基放到培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24-48小時(shí)，取出觀察，若無細(xì)菌生長則為合格。

1.3.2 取樣

（1）采樣點(diǎn)分布與采樣時(shí)間。采樣時(shí)間：14：00-15：00 18：00-19：00。（2）采樣方法。采樣方法采用自然沉降法[4]。圖書館和食堂空間采用棋盤式布點(diǎn)，男女生宿舍隨機(jī)抽取采用中心布點(diǎn)。采樣時(shí)應(yīng)注意，采樣點(diǎn)距離地面1.5m，距離墻面大于1m[5]。打開后將皿蓋扣于培養(yǎng)皿下暴露15-30分鐘。

1.3.3 培養(yǎng)

將采樣后的培養(yǎng)皿倒置放在培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)24-48小時(shí)。

1.3.4 數(shù)據(jù)處理

統(tǒng)計(jì)每個(gè)培養(yǎng)皿上的菌落數(shù)進(jìn)行記錄統(tǒng)計(jì)。然后用SPSS19.0對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行方差分析和t檢驗(yàn)，以P<0.05有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。將數(shù)據(jù)代入前蘇聯(lián)奧梅梁斯基公式[6]換算出空氣中細(xì)菌濃度。

3 結(jié)果分析與討論

根據(jù)采樣過程可將實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果進(jìn)行橫向、不同地點(diǎn)同一時(shí)間的分析；縱向、同一地點(diǎn)不同時(shí)間的分析。而根據(jù)X2=2.46，0.5

首先，進(jìn)行橫向比較。根據(jù)實(shí)驗(yàn)所得結(jié)果，兩個(gè)時(shí)間段，四個(gè)地點(diǎn)進(jìn)行比較，細(xì)菌總數(shù)由多到少的順序都為：男生宿舍>女生宿舍>食堂>圖書館。由結(jié)果可得出，室內(nèi)感官衛(wèi)生狀況與細(xì)菌總量呈正向關(guān)系。宿舍相較于食堂與圖書館空間更狹小，人員更擁擠，因此細(xì)菌含量更高。而食堂因?yàn)槭澄锏母瘮?，原材料的堆積，同時(shí)溫度較高，空氣潮濕，更有利于細(xì)菌的繁殖。圖書館則因?yàn)槿肆髁啃∏铱臻g較大，空氣流通好，同時(shí)由于其環(huán)境較為特殊，空氣干燥，濕度較低從而對(duì)于細(xì)菌的生長與繁殖起到了抑制作用，因此細(xì)菌數(shù)量較少。其次，縱向比較。大致以第二時(shí)間段多于第一時(shí)間段。由于第一時(shí)間段采樣的具體時(shí)間為14：00-15：00，第二時(shí)間段為18：00-19：00，這兩個(gè)時(shí)間段分別為人流低峰期和人流高峰期，從而數(shù)據(jù)大體上呈現(xiàn)這種差異性。而同一地點(diǎn)兩個(gè)時(shí)間段P<0.05差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可以得出空氣中細(xì)菌數(shù)量與人流量有很大的關(guān)系。通過本此研究，可以得出校園內(nèi)細(xì)菌數(shù)量以男生宿舍的第二時(shí)間段最多，圖書館的第一時(shí)間段最少?？諝庵械募?xì)菌數(shù)量可以很好的反映此區(qū)域的空氣污染狀況，以便采取相應(yīng)的措施來改善環(huán)境污染狀況。

參考文獻(xiàn)

[1]王春華，謝小保，曾海燕，歐陽友生，等.深圳市空氣微生物污染狀況監(jiān)測分析[J].微生物學(xué)雜志，2008，4.

[2]潘少兵，彭傲，余世金，等.安慶市不同功能區(qū)冬季空氣微生物污染調(diào)查與分析[J].安慶師范學(xué)院學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2013，3.

[3]張韓杰，高 ，王彥美，等.校園內(nèi)不同場所空氣中細(xì)菌污染的調(diào)查[J].科技創(chuàng)新導(dǎo)報(bào)，2008，25.

[4]王玉寅，趙琴，孫寶珍，等.空氣細(xì)菌總數(shù)測定自然沉降法采樣時(shí)間對(duì)結(jié)果的影響[J].中國公共衛(wèi)生檢驗(yàn)雜志，2011，11（1）：94.

[5]張鷹.自制空氣培養(yǎng)采樣架的臨床應(yīng)用探討[J].醫(yī)學(xué)新知雜志，2014，12.

[6]Micheal J. Pelczar，Jr， Royer V. Reid，Eddie Chin Sun Chan. Microbiology（Fourth Edition） McGraw-Hill Book Company，1977：86-87.

作者簡介：李文超（1983-），女，山東煙臺(tái)人，講師，研究方向：醫(yī)學(xué)教育。