達(dá)雪娟

摘 要：雞馬立克氏?。∕D）是雞的最嚴(yán)重的免疫抑制性疾病和傳染性腫瘤疾病，危害較為嚴(yán)重。本文對MD的診斷與防制進(jìn)行了討論，分析了流行特點(diǎn)和發(fā)病原因，重點(diǎn)對雞馬立克氏病的發(fā)生、臨床癥狀及主要病理變化和實(shí)驗(yàn)室診斷作了較詳細(xì)的描述。通過對發(fā)病原因和流行特點(diǎn)的討論與分析，對于預(yù)防和減輕下一個生產(chǎn)周期內(nèi)疾病的再度發(fā)生及其造成的損失極為重要，同時也為養(yǎng)殖場制定長期而有效的綜合防制措施提供依據(jù)。

關(guān)鍵詞：馬立克氏病；診斷；防制

中圖分類號：S854.4 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：C 文章編號：1001-0769（2015）09-0055-04

雞馬立克氏病是臨床上常見的淋巴組織增生性疾病，以對外周神經(jīng)、性腺、虹膜、各種內(nèi)臟器官、肌肉和皮膚的單個或多個的組織器官發(fā)生單核細(xì)胞浸潤為特征。自1970年Marek報道的外周神經(jīng)和脊神經(jīng)根的單核細(xì)胞浸潤引起的公雞輕癱，是MD的最早記載。在1914年美國報道了該病的暴發(fā)，隨后，荷蘭、英國和其他許多國家也發(fā)現(xiàn)了本病。在上世紀(jì)六七十年代，對本病的研究取得了非凡的成果，其中最大的成果是成功地和有規(guī)律地進(jìn)行了該病的人工傳播。但病原的強(qiáng)細(xì)胞結(jié)合性使病原的分離較困難，直到1967年，英國和美國幾乎同時各自獨(dú)立地在細(xì)胞培養(yǎng)上成功地增殖了病原，從而確定皰疹病毒為該病病原[1]。到目前為止，許多養(yǎng)殖場主要應(yīng)用HVT在出殼24 h內(nèi)接種疫苗，已取得了良好的預(yù)防效果。但也有一些養(yǎng)殖戶對本病的免疫接種沒有足夠重視，在臨床上有的養(yǎng)殖戶未能對雛雞免疫接種或未能及時免疫接種，從而導(dǎo)致臨床上仍有本病的存在[2]。在2014年社會實(shí)踐活動中，發(fā)現(xiàn)了武威市部分農(nóng)戶飼養(yǎng)的蛋肉商品代雜雞，出現(xiàn)跛行、死亡及視力障礙等現(xiàn)象。通過走訪了2個村，80多個農(nóng)戶，共觀察3 000羽雞，其中，發(fā)病的1 140羽，死亡420羽，在剖檢死亡雞只時，同時采集病料送往甘肅畜牧工程學(xué)院進(jìn)一步進(jìn)行了實(shí)驗(yàn)室檢查，最終確定為雞馬立克氏病，現(xiàn)將其報道如下：

1 發(fā)病情況

本次走訪的2個村80多農(nóng)戶，飼養(yǎng)的雞苗大部分來自于私人土法孵化的小雞，發(fā)病雞的年齡多在8周到14周齡之間，調(diào)查的雞群共計(jì)3 000羽，其中出現(xiàn)癥狀的1 140羽，死亡420羽，發(fā)病率為38 %，死亡率為14 %。

2 發(fā)病原因

雞馬立克氏病是由皰疹病毒引起的一種淋巴組織增生性疾病，此病的特點(diǎn)是病雞的外周神經(jīng)、性腺、虹膜、各種臟器、肌肉和皮膚出現(xiàn)單核細(xì)胞浸潤，并伴隨麻痹和產(chǎn)生內(nèi)臟腫瘤，它是一種淋巴瘤性質(zhì)的腫瘤疾病，對養(yǎng)雞業(yè)的發(fā)展危害相當(dāng)嚴(yán)重。自1970年從火雞身上分離出火雞皰疹病毒FC126號病毒株，用以制成疫苗以來，此病得到了較好的控制，對養(yǎng)雞業(yè)的損失大大降低[3]。但近幾年在許多地區(qū)又出現(xiàn)了較大規(guī)模的流行，現(xiàn)就其發(fā)病原因簡述如下：

2.1 疫苗質(zhì)量

疫苗的質(zhì)量在運(yùn)輸和保存過程中出現(xiàn)問題。停電、意外暴曬、超溫保存等，或疫苗受到污染、失效、稀釋液達(dá)不到質(zhì)量要求等。

2.2 疫苗劑量及免疫技術(shù)

疫苗的劑量不足或免疫技術(shù)的錯誤，疫苗的噬斑單位不足；疫苗稀釋后不立即使用或不現(xiàn)配現(xiàn)用，導(dǎo)致疫苗效價降低；稀釋倍數(shù)錯誤，造成注射劑量不足；免疫接種方法、途徑、部位不正確等。

2.3 早期感染及超強(qiáng)毒

早期感染及超強(qiáng)毒的存在環(huán)境消毒不徹底，有野毒和超強(qiáng)毒存在，使雛雞在免疫前感染（早期感染）。另外，皰疹病毒免疫后需2周時間才能達(dá)到免疫高峰，在這段時間也很容易受到MD野毒和超強(qiáng)毒的感染（免疫潛伏期內(nèi)感染）。

2.4 母源抗體

母源抗體的影響親代雞群經(jīng)皰疹病毒疫苗免疫后，其子代如再用同種疫苗免疫，就會受母源抗體影響，降低效價。

2.5 變異病毒的出現(xiàn)

由于病毒的變異，使得火雞皰疹病毒疫苗免疫失敗。

2.6 疫苗保護(hù)率

疫苗本身的保護(hù)率最高可達(dá)85 %～90 %，所以雞群免疫后，仍可能有少部分雞感染、發(fā)病，隨之排毒，如果不經(jīng)常搞好衛(wèi)生消毒，就會造成病毒的傳播。

2.7 某些微生物的影響

由于某些致病性微生物的早期感染，而影響了火雞皰疹病毒的免疫效果。

2.8 雞群免疫系統(tǒng)

也有人認(rèn)為有些雞群免疫系統(tǒng)缺乏或功能不全[4]。

3 主要癥狀

一般病雞精神尚好，并有食欲。病情較重的雞采食減少，精神沉郁，日漸消瘦，被毛粗亂，個別雞站立不穩(wěn)，有的雞下肢麻痹，遇刺激時兩腿前后伸展，呈“劈叉”姿勢。有的病雞一側(cè)或兩側(cè)的翅膀下垂，頭下垂或頭頸歪斜，嗉囊擴(kuò)張，食物時不能后轉(zhuǎn)。但往往由于飲不到水而脫水，吃不到飼料而衰竭；有的病雞表現(xiàn)瞳孔縮小，嚴(yán)重時僅有針尖大小；虹膜邊緣不整齊，呈環(huán)狀或斑點(diǎn)狀，顏色由正常的桔紅色變?yōu)閺浡缘幕野咨省棒~眼狀”。輕者表現(xiàn)對光線強(qiáng)度的反應(yīng)遲鈍，重者對光線失去調(diào)節(jié)能力，最終失明或被其他雞只踐踏，最后均以死亡而告終。

4 病理變化

剖檢時，部分病雞的背部、頸部、翅膀等皮膚上常有大如蠶豆、小如麥粒的結(jié)節(jié)，除發(fā)現(xiàn)部分病死雞皮膚上有大小不一的腫瘤結(jié)節(jié)外，所有病死雞消瘦。生前有神經(jīng)癥狀的雞剖檢時，發(fā)現(xiàn)坐骨神經(jīng)、臂神經(jīng)等均有不同程度的炎癥，導(dǎo)致其粗大（是原來的2～3倍），表面橫紋消失。有的病死雞肝臟、脾臟等器官上常有大如豆粒、小如米粒，邊緣不整齊灰白色的結(jié)節(jié)。切面呈脂肪樣但肝臟異常腫大，比正常大5～6倍，正常肝小葉結(jié)構(gòu)消失，表面呈粗糙或顆粒性外觀。有的甚至整個卵巢被腫瘤組織代替，呈花菜樣腫大，腺胃外觀有的變長，有的變圓，胃壁明顯增厚或薄厚不均，切開后腺乳頭消失，黏膜出血、壞死。通過該病的發(fā)生及癥狀和剖檢觀察，初步診斷為雞馬立克氏病[5]。為進(jìn)一步確診，采病雞羽毛（盡量多帶毛囊髓）12份，送往甘肅畜牧工程學(xué)院化驗(yàn)室做瓊脂擴(kuò)散沉淀反應(yīng)。

5 診斷

5.1 臨診診斷

根據(jù)發(fā)病年齡主要發(fā)生于8周齡～14周齡的雞。臨床上有的表現(xiàn)為典型的“劈叉”姿勢，頭下垂及頭頸歪斜，有的一只眼虹膜正常色素消失，呈同心環(huán)狀或斑點(diǎn)狀的灰白色，腹瀉等癥狀，部檢時見到有的雞出現(xiàn)一側(cè)坐骨神經(jīng)、臂神經(jīng)等明顯增粗，呈淡黃色，在放大鏡下觀察，神經(jīng)表面橫紋消失，有的病雞肝、脾、卵巢等器官出現(xiàn)腫瘤結(jié)節(jié)或彌漫性腫大，初步診斷為雞馬立克氏病，為進(jìn)一步確診，無菌采取了病雞肝、脾、卵巢等器官，送甘肅畜牧工程學(xué)院化驗(yàn)室進(jìn)行確診。

5.2 實(shí)驗(yàn)室診斷

5.2.1 細(xì)菌學(xué)檢查

取送檢肝、脾、卵巢等器官，進(jìn)行了組織觸片，自然干燥后，用酒精燈火焰固定，利用革蘭氏染色法和美藍(lán)染色法兩種方法染色，顯微鏡檢查，其結(jié)果為細(xì)菌學(xué)檢查陰性（即沒有看到任何可疑細(xì)菌）[6]。同時將其接種于普通肉湯培養(yǎng)基、普通瓊脂平板培養(yǎng)基和鮮血瓊脂培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)，37 ℃ 48 h，肉湯未發(fā)生變化（即無菌膜、菌環(huán)形成、清亮度未變、管底也無沉淀物形成）；普通瓊脂平板和鮮血瓊脂平板上無菌落形成。也就是細(xì)菌分離培養(yǎng)呈陰性。

5.2.2 血清學(xué)試驗(yàn)

將送檢羽毛剪下含有羽髓的部分，加少量生理鹽水后充分?jǐn)D壓，得到羽髓懸液用作被檢抗原（標(biāo)準(zhǔn)抗原和陽性血清由哈爾濱獸醫(yī)研究所制備）[7]。采用瓊脂凝膠沉淀實(shí)驗(yàn)（AGP）對MD被檢抗原進(jìn)行檢測，用含8 %NaCl、pH 7.2的PBS和1 %瓊脂糖制備凝膠板，然后按七孔法打孔（共做三組），反應(yīng)板孔徑為5 mm，孔間距為3 mm，瓊脂凝膠板厚度為3 mm，中央孔加標(biāo)準(zhǔn)陽性血清，周圍孔1.4孔加標(biāo)準(zhǔn)抗原，其條孔各加1份被檢抗原，加樣時將孔加滿但不能溢出。加樣后將瓶倒置于37 ℃溫箱中待其反應(yīng)，48 h后取出。結(jié)果標(biāo)準(zhǔn)抗原和8份待檢抗原與陽性血清孔之間出現(xiàn)明顯的灰白色沉淀線，說明8份被檢抗原中含有MD病毒，確診為雞馬立克氏病[8]。

6 防制措施

6.1 免疫接種

本病是由病毒引起的腫瘤性疾病，一旦發(fā)生沒有任何措施可以制止它的流行和蔓延，更沒有特效的治療藥物。因此防制該病的關(guān)鍵是做好切實(shí)的免疫。

目前雞馬立克氏病疫苗使用最普遍的是火雞皰疹病毒（HVT）苗，在雞1日齡時進(jìn)行免疫接種。使用HVT苗應(yīng)注意以下幾方的問題。

6.1.1 疫苗的質(zhì)量必須合格

出廠的產(chǎn)品標(biāo)簽或說明書明確標(biāo)出每頭份疫苗所含的蝕斑單位。當(dāng)大批量購買時，應(yīng)抽樣送獸藥監(jiān)察部門進(jìn)行檢查，測定疫苗的蝕斑單位和疫苗的穩(wěn)定性。指標(biāo)不合格不使用。疫苗經(jīng)銷單位進(jìn)貨時也應(yīng)抽樣送檢，對用戶負(fù)責(zé)。現(xiàn)在有的進(jìn)口苗每頭份含蝕斑單位是l 000。國產(chǎn)苗和有的進(jìn)口苗為適應(yīng)雞現(xiàn)狀，提高了蝕斑量，每頭份含2 000蝕斑單位以上或更高。因?yàn)橐呙缥g斑量直接關(guān)系到免疫的質(zhì)量。

6.1.2 HVT苗

HVT苗是凍干苗，出售疫苗時還配有專門的稀釋液應(yīng)清亮透明，質(zhì)量不合格的不能使用。凍干苗稀釋后應(yīng)在l h內(nèi)用完，否則疫苗的蝕斑量將明顯下降，降低了疫苗的保護(hù)作用，也是造成免疫失敗的原因之一。另外，疫苗稀釋好以后，應(yīng)將其放在冰浴的條件下（即疫苗瓶放在裝有冰塊的容器里），以避免由于溫度高影響疫苗質(zhì)量[9]。

6.1.3 雞接種疫苗后

雞接種疫苗后須經(jīng)15 d以上才能起到對雞的保護(hù)作用，同時應(yīng)該明確指出，HVT苗并不能阻止馬立克氏病強(qiáng)毒株的感染，因此接種疫苗的房間、運(yùn)送雛雞的容器以及育雛舍必須作好徹底的消毒，最大限度地減少環(huán)境中的馬立克氏病病毒，只有這樣才能充分發(fā)揮疫苗的保護(hù)作用。因此環(huán)境中由于馬立克氏病病毒的存在，而發(fā)生雛雞的早期感染同樣是造成免疫失敗的原因之一。

除HVT苗之外還有二價和多價疫苗，這類疫苗的保護(hù)作用高于HVT苗，而且可以保護(hù)雞群免受馬立克氏病超強(qiáng)毒株的感染。防制效果很好，但這類疫苗屬于細(xì)胞結(jié)合性苗，保存和運(yùn)輸時疫苗必須在液氮罐中放置，給現(xiàn)場應(yīng)用帶來了較大的困難，也是目前應(yīng)用不普遍的主要原因。此外，這種疫苗的保管必須認(rèn)真負(fù)責(zé)。如實(shí)地填寫保管，使用記錄。如若因管理不當(dāng)，液氮罐中液氮不足甚至干涸，疫苗失效，給生產(chǎn)帶來的后果非常嚴(yán)重的。

最后，為提高馬立克氏病的免疫效果，還須加強(qiáng)其它疫病的防治工作，減少對該病免疫的干擾，如雞傳染性法氏囊病、雞傳染性貧血、雞白痢沙門氏菌病等，特別是在馬立克氏病疫苗免疫保護(hù)作用尚未建立前，上述疫病的感染、發(fā)生同樣可導(dǎo)致本病的免疫失敗。

加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，減少應(yīng)激因素對雞群的影響，不斷提高獸醫(yī)衛(wèi)生綜合防制水平也是防制雞馬立克氏病的重要措施，不容忽視。

6.2 加強(qiáng)檢疫

包括平時的觀察和血清學(xué)檢疫法，平時觀察包括飼養(yǎng)員和管理技術(shù)人員做好雞的精神狀態(tài)、營養(yǎng)狀況、生長發(fā)育及運(yùn)動等方面的觀察，血清學(xué)檢疫對其隨機(jī)抽樣，采羽毛囊髓做瓊脂擴(kuò)散沉淀反應(yīng)，若發(fā)現(xiàn)陽性再用此法做普檢，將檢出的陽性雞和病雞全部淘汰，尸體銷毀處理。

6.3 定期消毒

消毒應(yīng)從種蛋孵化著手，在嚴(yán)格選購種蛋的基礎(chǔ)上用2 %的福爾馬林溶液或0.1 %的新潔爾滅溶液或0.1 %的高錳酸鉀溶液，對蛋殼洗滌消毒，孵化室及孵化設(shè)備等用甲醛定期熏蒸消毒，有條件時用1 %的敵菲特對雞舍定期帶雞消毒，對環(huán)境用 1 %～2 %的氫氧化鈉或10 %生石灰水消毒[10]。

6.4 把好引種關(guān)

應(yīng)從無本病的地區(qū)、雞場引進(jìn)種蛋或雞苗。引進(jìn)雞苗時，應(yīng)向孵化場家提出對出殼24 h內(nèi)小雞全部用馬立克氏疫苗免疫。

6.5 監(jiān)督和檢查

當(dāng)?shù)刂鞴懿块T應(yīng)加強(qiáng)對雞場、農(nóng)戶綜合性防疫制度及防疫措施執(zhí)行監(jiān)督和檢查。尤其要向農(nóng)戶做好免疫接種的重要性和因果關(guān)系的宣傳。采取全進(jìn)全出的飼養(yǎng)方法，對不同來源、不同日齡的雞分群飼養(yǎng)。

7 討論與分析

（1） 據(jù)史料記載，雞馬立克氏病從20世紀(jì)80年代已侵入該地區(qū)，對養(yǎng)禽業(yè)造成巨大損失。由于對該病的高度重視，采取有效的綜合性防制措施，曾很快控制了該病的發(fā)生與流行，并向凈化趨勢發(fā)展。

（2） 由于農(nóng)戶對該病的防范意識差，對雞苗的選購只問價格不求質(zhì)量，私人孵化盛行，種蛋及孵化設(shè)備消毒不嚴(yán)格，對出殼24 h內(nèi)的幼雛不做該病的主動免疫或延誤對幼雛的主動免疫時間，造成該病又有回升的趨勢?！酢?/p>

參考文獻(xiàn)：（10篇，略）