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        不同檢測方法在檢查梅毒螺旋體抗體中的應(yīng)用價值研究

        2015-05-25 11:52:58趙肖云謝乃亮鐘美華莫帆
        關(guān)鍵詞:螺旋體梅毒靈敏度

        趙肖云,謝乃亮,鐘美華,莫帆

        (1.右江民族醫(yī)學(xué)院檢驗學(xué)院2012級檢驗醫(yī)學(xué)本科,廣西 百色 533000 E-mail:zhaoxiaoyunyy@163.com;2.廣西梧州市人民醫(yī)院,廣西 梧州 543000)

        梅毒是一種由梅毒螺旋體(treponema pallidum,TP)引起的慢性傳染性疾病。95%的梅毒患者是通過性傳播和血液傳播,極少數(shù)可通過物品傳播。TP通過黏膜或者破損的皮膚進(jìn)入人體后,經(jīng)淋巴系統(tǒng)及血液播散至全身,幾乎可以侵犯全身各臟器和組織,引起人體所有的器官和組織的病變,對人體危害重,傳染性強,且患者感染后的臨床表現(xiàn)極為復(fù)雜,部分患者可多年無癥狀而呈潛伏狀態(tài),嚴(yán)重危險公共衛(wèi)生安全[1]。目前,血清學(xué)試驗是實驗室診斷梅毒的主要方法,每一種檢測方法都有其特殊的診斷價值,而檢測方法的優(yōu)劣關(guān)系到結(jié)果的準(zhǔn)確性,影響患者的診斷與治療[2]。為進(jìn)一步了解甲苯胺紅不加熱血清試驗(TRUST)、梅毒螺旋體明膠凝集試驗(TPPA)、梅毒酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA-TP)三種檢測方法在檢查梅毒螺旋體抗體中的應(yīng)用價值,本研究分別對TRUST、TPPA、ELISA-TP三種檢測方法進(jìn)行比較,現(xiàn)報告如下。

        1 資料和方法

        1.1 標(biāo)本來源 收集2013年1月~2014年6月我院收治的90例經(jīng)臨床確診為梅毒感染患者的90份血清標(biāo)本,另隨機抽取非梅毒患者的90份血清標(biāo)本,共180份血清標(biāo)本為研究對象。

        1.2 檢測設(shè)備

        1.2.1 檢測試劑 TRUST試劑購自上海榮盛生物藥業(yè)有限公司,TPPA試劑購自日本富士瑞必歐株式會社,ELISA-TP試劑購自上??迫A生物工程股份有限公司。

        1.2.2 檢測儀器 上??迫AKR13st-360酶標(biāo)儀,恒溫箱,振蕩器。

        1.3 檢測方法 以上各試驗操作步驟及結(jié)果判斷均嚴(yán)格按照試劑盒所附說明書進(jìn)行。

        1.4 檢測指標(biāo) 計算三種檢測方法的陽性率,同時分別計算TRUST、TPPA、ELISA-TP三種檢測方法的靈敏度、特異度和Youden指數(shù)。靈敏度=真陽性數(shù)/(真陽性數(shù)+假陰性數(shù))×100%,特異度=真陰性數(shù)/(真陰性數(shù)+假陽性數(shù))×100%,Youden指數(shù)=(靈敏度+特異度)-1。

        1.5 統(tǒng)計學(xué)方法 數(shù)據(jù)的分析采用SPSS 18.0統(tǒng)計軟件,計數(shù)資料的組間比較采用χ2檢驗,三組間的兩兩比較采用Bonferroni法調(diào)整檢驗水準(zhǔn),以P<0.0167為差異具有統(tǒng)計學(xué)意義。

        2 結(jié)果

        2.1 三種檢測方法檢測血清學(xué)標(biāo)本結(jié)果比較 研究結(jié)果表明,三種檢測方法在檢測梅毒患者的90份血清標(biāo)本時,TRUST檢測的陽性率為83.33%,TPPA為95.56%,ELISA-TP為98.89%,三種方法比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。TRUST檢測的陽性率與TPPA比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=7.120,P=0.008),與ELISA-TP比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=13.445,P<0.001)。TPPA 檢測的陽性率與ELISA-TP比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=1.851,P=0.174)。三種檢測方法在檢測非梅毒患者的90份血清標(biāo)本時,TRUST檢測的假陽性率為7.78%,TPPA為1.11%,ELISA-TP為2.22%,三種方法比較差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。TRUST檢測的假陽性率與TPPA比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=2.854,P=0.091),與ELISA-TP比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=1.410,P=0.235)。TPPA 檢測的陽性率與ELISA-TP比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(χ2=0.339,P=0.560),見表1。

        表1 三種檢測方法檢測血清學(xué)標(biāo)本結(jié)果比較 (n,%)

        2.2 三種檢測方法檢測血清學(xué)標(biāo)本的靈敏度和特異度比較 研究結(jié)果顯示,三種檢測方法中靈敏度最高的 為 ELISA - TP(98.89%),其 次 為 TPPA(95.56%),最后為 TRUST(83.33%);特異度最高的為TPPA(98.89%),其次為 ELISA-TP(97.78%),最低為 TRUST(92.22%);Youden指數(shù)最高的為ELISA-TP(0.97),其次為 TPPA(0.94),最后為TRUST(0.78),見表2。

        表2 三種檢測方法檢測血清學(xué)標(biāo)本的靈敏度和特異度比較

        3 討論

        近年來,國內(nèi)外梅毒的發(fā)病率一直居高不下,且和艾滋病的傳播途徑相同,可大大增加感染和傳播艾滋病的危險,是一個全球關(guān)注的公共衛(wèi)生問題。目前,梅毒的血清學(xué)檢查已列入我國獻(xiàn)血員和臨床患者輸血前、手術(shù)前以及各種創(chuàng)傷性檢查的常規(guī)項目[3],因此選擇一種靈敏度高、特異度強、方便快捷的檢測方法,對于梅毒的診斷及治療具有重要意義。

        TP于1905年由Schaudinn和Hoffmann發(fā)現(xiàn),是小而纖細(xì)的螺旋狀微生物,因其透明不染色,故又稱蒼白螺旋體。TP含有很多抗原物質(zhì),多數(shù)為非特異性(如心磷脂),少數(shù)為特異性(如TP抗原),一旦侵入人體后,可在機體產(chǎn)生兩種抗體,一種為非特異性抗體,另一種為特異性抗體(即抗TP抗體)[4]。

        臨床上常采用TRUST檢測非特異性抗體,即用心磷脂做抗原,檢測血清中的抗心磷脂抗體,該方法操作簡便快捷,可用于大量人群的篩查[5],但由于非特異性抗體通常出現(xiàn)較晚,在一期梅毒時多呈陰性,對于梅毒的早期篩查易造成假陽性,且該抗體還可多見于其它疾病,如類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、紅斑狼瘡等自身免疫性疾病以及腫瘤性疾病,特異性不高[6]。故在本次研究中采用TRUST進(jìn)行檢測時,TRUST檢測出梅毒患者的陽性率明顯低于TPPA和ELISA-TP,檢測非梅毒患者的假陽性率明顯高于TPPA和ELISA-TP,靈敏度和特異度不高,Youden指數(shù)也明顯低于TPPA和ELISA-TP。

        本研究結(jié)果顯示,ELISA-TP檢測梅毒患者血清標(biāo)本陽性率高達(dá)98.89%,TPPA達(dá)95.56%。原因在于,TPPA和ELISA-TP均為梅毒螺旋體抗原血清實驗,臨床上主要用于檢測特異性抗體,實驗敏感性及特異性均較高,而TPPA的工作原理是將從感染TP的家兔睪丸中提取的TP純化,并以超聲粉碎后作為抗原,以明膠顆粒作為載體,若抗體過多時,抗原抗體的結(jié)合不能形成大的復(fù)合物,抑制可見的反應(yīng)出現(xiàn),造成靈敏度不高。若想避免該現(xiàn)象,需將標(biāo)本多步稀釋,操作繁瑣,成本較高[7]。研究表明,TPPA檢測非梅毒患者血清標(biāo)本假陽性率僅為1.11%,ELISA-TP為2.22%,均低于TRUST的7.78%。由于ELISATP易受標(biāo)本溶血、細(xì)菌污染、標(biāo)本存放過久等因素影響[8],呈假陽性的概率明顯大于 TPPA,卻又低于TRUST。研究結(jié)果顯示,Youden指數(shù)最高的為ELISA-TP(0.97),其次為 TPPA(0.94),最后為TRUST(0.78)。說明,在本次研究中ELISA-TP的實驗效果更好,真實性更強。但鑒于特異性抗體對機體無保護作用,經(jīng)足量抗梅毒治療后仍持續(xù)存在,甚至終身,故TPPA和ELISA-TP檢測結(jié)果不能用于觀察療效、復(fù)發(fā)及再感染評估。

        綜上所述,TPPA和ELISA-TP的靈敏度、特異度以及Youden指數(shù)均高于TRUST,更適合用作臨床診斷梅毒的實驗室檢測方法,但每種檢驗方法均有各自的特點,臨床工作者需根據(jù)患者實際情況,選擇正確的優(yōu)化組合進(jìn)行檢測,提高檢出率與診斷正確率。

        [1] 胥國強,康清秀,蒲澤宴,等.4種方法檢測梅毒螺旋體抗體結(jié)果的比較及應(yīng)用評價[J].國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2011,32(16):1869-1870.

        [2] 王碧玉,曾自如.膠體金法、酶聯(lián)免疫吸附試驗和明膠顆粒凝集試驗檢測血清梅毒抗體的結(jié)果比較[J].右江民族醫(yī)學(xué)院學(xué)報,2011,33(2):210-211.

        [3] 劉靜,劉婕,鞏瑜,等.5種血清學(xué)方法檢測梅毒螺旋休抗體的評價[J].現(xiàn)代檢驗醫(yī)學(xué)雜志,2014,29(4):103-105.

        [4] 顧友祥,姜俊.多種梅毒抗體檢測方法的比較[J].檢驗醫(yī)學(xué)與臨床,2012,9(4):391-392.

        [5] 楊曉東,吳大富,饒麗華,等.三種梅毒抗體檢測方法在臨床應(yīng)用中的評價[J].山西醫(yī)藥雜志,2014,43(22):2691-2692.

        [6] 汪偉,魯懷偉.梅毒4種檢測方法的比較[J].安徽醫(yī)學(xué),2013,34(2):193-194.

        [7] 陳云,王厚照,張玲,等.梅毒螺旋體抗體三種檢測方法的價值比較[J].臨床軍醫(yī)雜志,2012,40(5):1197-1198.

        [8] 馬連學(xué),李艷菊.梅毒螺旋體抗體三種血清學(xué)方法應(yīng)用評價[J].中國實驗診斷學(xué),2010,14(1):116-117.

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