季乃軍 藍(lán)翔 陳東海 童麗軍 羅偉俊 李付遠(yuǎn) 胡昌盛

醛固酮合成酶基因多態(tài)性與慢性心力衰竭患者血清醛固酮水平的關(guān)系研究

季乃軍 藍(lán)翔 陳東海 童麗軍 羅偉俊 李付遠(yuǎn) 胡昌盛

目的探討醛固酮合成酶（CYP11B2）基因多態(tài)性與慢性心力衰竭(CHF)患者血清醛固酮水平的關(guān)系。方法選擇62例慢性心力衰竭(CHF)患者和30例非心血管疾病患者，采用聚合酶鏈反應(yīng)和限制性酶切方法檢測CYP11B2基因-344C/T多態(tài)性，放射免疫法測定血清醛固酮水平。結(jié)果62例CHF患者中，CYP11B2-344C/T基因多態(tài)性分型為：TT型42例（67.7%），CT型17例（27.4%），CC型3例（4.8%），CHF組與對照組CYP11B2-344C/T基因多態(tài)性分型構(gòu)成比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。根據(jù)NYHA心功能分級，Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ級間的CYP11B2-344C/T基因多態(tài)性分型構(gòu)成比差異亦無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。TT型患者血清醛固酮水平顯著高于CT/CC型患者[(168.3±54.4)ng/L、（119.9±38.1）ng/L，t=3.575，P＜0.01]。結(jié)論CHF患者中，CYP11B2-344C/T基因多態(tài)性TT型血清醛固酮水平顯著增高。

慢性心力衰竭；醛固酮合成酶（CYP11B2）基因；醛固酮

醛固酮合成酶（CYP11B2）基因-344C/T多態(tài)性研究關(guān)注的熱點在高血壓病，也涉及動脈硬化和冠心病等，但較少有慢性心力衰竭（CHF）相關(guān)內(nèi)容。本研究對CHF患者進(jìn)行了CYP11B2基因-344C/T多態(tài)性檢測，并測定了血清醛固酮水平，以探討CHF患者CYP11B2基因多態(tài)性與血清醛固酮水平變化相關(guān)性，現(xiàn)報道如下。

1 資料和方法

1.1 一般資料選擇2008年1月至2010年12月入住我院心臟中心的CHF患者62例（CHF組），其中男性35例，女性27例，年齡36～86（63.22± 17.66）歲。臨床診斷：冠心病26例，擴張型心肌病16例，高血壓心臟病12例，風(fēng)濕性心臟病8例。NYHA心功能分級：Ⅱ級16例，Ⅲ級24例，Ⅳ級22例。選擇同期在本院健康體檢中確認(rèn)為基本健康者30例為對照組，其中男性18例，女性12例，年齡33～85（62.91±16.20）歲。兩組排除標(biāo)準(zhǔn)：已知對血清醛固酮有明確影響的其它疾病，合并嚴(yán)重肝、腎功能損害者，在入選2周內(nèi)使用或可疑使用過對血清醛固酮有影響的藥物或制劑者。兩組性別、年齡比較差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（均P＞0.05）。

1.2 方法

1.2.1 CYP11B2基因-344C/T多態(tài)性測定采用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR）和限制性酶切方法檢測所有患者的CYP11B2基因-344C/T多態(tài)性,按CC、CT和TT 3種基因型分類。

1.2.2 醛固酮水平測定采用放射免疫法測定血清醛固酮水平（放射免疫藥盒由上海生物制品所提供），以GC-1200型γ放射免疫計數(shù)儀計數(shù)，醛固酮的批內(nèi)變異系數(shù)為＜8%，批間變異系數(shù)為＜10%。

1.3 統(tǒng)計學(xué)處理采用SPSS18.0統(tǒng)計軟件，計量資料以表示，組間比較采用t檢驗；計數(shù)資料以百分率表示，組間比較采用χ2檢驗。

2 結(jié)果

2.1 兩組CYP11B2基因-344C/T多態(tài)性檢測結(jié)果見表1。

表1 兩組CYP11B2基因-344C/T多態(tài)性檢測結(jié)果[例（%）]

由表1可見，CHF組與對照組CYP11B2-344C/T基因多態(tài)性分型構(gòu)成比差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2= 3.966，P＞0.05）。不同NYHA心功能分級的CYP11B2-344C/T基因多態(tài)性分型構(gòu)成比差異亦無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=2.482，P＞0.05）。

2.2 TT、CT和CC 3種基因型患者血清醛固酮水平比較由于CC型患者例數(shù)過少，按統(tǒng)計學(xué)常規(guī)處理方式，合并在TC型患者中。TT型（42例）患者血清醛固酮水平（168.3±54.4）ng/L，顯著高于TC/CC型（20例）患者（119.9±38.1）ng/L（t=3.575，P＜0.01）。

3 討論

醛固酮是體內(nèi)最重要的鹽皮質(zhì)激素，主要調(diào)節(jié)水鹽平衡，在高血壓病發(fā)生發(fā)展中起著極其重要的作用，也直接影響心血管系統(tǒng)[1-2]。醛固酮拮抗劑在CHF患者中的應(yīng)用得到了充分的關(guān)注，“金三角”治療的理念被寫入了指南[3-5]。CYP11B2是醛固酮合成的關(guān)鍵酶，其基因多態(tài)性可能影響醛固酮的合成，醛固酮可刺激成纖維細(xì)胞增生促進(jìn)心臟的膠原組織合成，影響左心室結(jié)構(gòu)和功能，進(jìn)而對心血管系統(tǒng)產(chǎn)生病理生理作用。CYP11B2的表達(dá)主要受血管緊張素Ⅱ和血清鉀調(diào)節(jié)，CYP11B2-344C/T基因被認(rèn)為是高血壓病的候選基因，其與高血壓病的相關(guān)性研究較多，特別是TT基因型患者，可能與血壓水平、心室重構(gòu)-心室肥厚等直接相關(guān)[6-7]。醛固酮能直接作用于心臟的鹽皮質(zhì)激素受體，促進(jìn)心室纖維化和心室重構(gòu)，醛固酮也參與了動脈粥樣硬化，影響心血管疾病的病理生理過程，因而從理論上推斷CYP11B2-344C/T基因多態(tài)性也與此相關(guān)[8-9]。目前的研究結(jié)果并不一致，劉冬等[10]Meta分析認(rèn)為無論是高血壓人群或是不同種族人群，CYP11B2-344C/T基因多態(tài)性與左心室肥厚無關(guān)。馬寶新等[11]Meta分析認(rèn)為中國人的CYP11B2基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓左心室肥厚無關(guān)，但還需要更多的研究進(jìn)一步來驗證。Amir等[12]研究認(rèn)為CYP11B2-344C/T基因多態(tài)性是心力衰竭患者發(fā)生心房顫動的獨立危險因素，CC基因型發(fā)生心房顫動的風(fēng)險明顯升高。

范煜東等[13]從心外科手術(shù)中收取心功能不全患者得心肌標(biāo)本，以健康心肌作為對照，用RT-PCR的方法測定心肌組織中CYP11B2基因和鹽皮質(zhì)激素受體基因的表達(dá)，結(jié)論認(rèn)為在重度心力衰竭時，心肌組織CYP11B2基因被激活表達(dá)增高，CYP11B2基因的表達(dá)與心功能不全的程度相關(guān)，CHF時，心肌組織鹽皮質(zhì)激素受體基因表達(dá)下調(diào)。A-HeFT研究354例非裔美國人的心力衰竭患者，TT型218例（61.6%），TC型114例（32.2%），CC型22例（6.2%）[14]。本組62例CHF患者中，CYP11B2-344C/T基因多態(tài)性分型為：TT型42例（67.7%），TC型17例（27.4%），CC型3例（4.8%），與對照組比較，分型構(gòu)成比差異無統(tǒng)計學(xué)意義。對不同NYHA心功能分級的患者進(jìn)行分析，CYP11B2-344C/T基因多態(tài)性分型構(gòu)成比差異無統(tǒng)計學(xué)意義。TT型與TC/CC聯(lián)合者血清醛固酮水平比較，前者顯著高于后者（P＜0.01）。筆者認(rèn)為人類基因分型，主要取決于人種人群，但也存在著個體及地域分布的差異，不同疾患存在著不同基因組及變異，本文觀察的CHF組與對照組均屬于同一地域人群，CYP11B2-344C/T基因分型構(gòu)成比差異無統(tǒng)計學(xué)意義，符合上述情況。本組CHF患者中，TT型多于TC型，TC型多于CC型，構(gòu)成例數(shù)情況與AHeFT研究[15]中非裔美國人相似，似乎提示TT型與CHF有較大關(guān)聯(lián)，但本組仍無統(tǒng)計學(xué)意義，同樣其基因分型構(gòu)成在不同NYHA心功能分級患者也無統(tǒng)計學(xué)意義，其結(jié)果可能反映了CHF患者CYP11B2-344C/T基因基本變化，但也可能受限于樣本數(shù)及抽樣人群等因素。CHF患者中，TT型醛固酮水平顯著高于TC/CC型聯(lián)合者，符合其基本病理生理改變，可能是CYP11B2過度表達(dá)的一個佐證。

[1]童麗軍,季乃軍,藍(lán)翔,等.纈沙坦對原發(fā)性高血壓患者多種血管活性因子的干預(yù)影響[J].浙江醫(yī)學(xué),2007,37（7）∶257-258.

[2]季乃軍,藍(lán)翔,陳東海,等.慢性心力衰竭患者血清醛固酮變化及螺內(nèi)酯的干預(yù)影響[J].心電與循環(huán),2012,31（4）∶253-253.

[3]中華醫(yī)學(xué)會心血管病學(xué)分會,中華心血管病雜志編輯委員會.中國心力衰竭診斷和治療指南2014[J].中華心血管病雜志,2014,42（2）∶98-122.

[4]McMurrayJ J,AdamopoulpsS,Anker S D,et al.ESC guidelines for the diagnosis and treatment of acute and chronic heart failure 2012∶the Task Force for the Diagnosis and Treatment of Acute and Chronic Heart Failure 2012 of the European Society of Cardiology．Developed in collaboration with theHeart FailureAssociation(HFA)oftheESC[J]. EurJHeartFail,2012,14（8）∶803-869.

[5]Yancy C W,Jessup M,Bozkurt B,et al.2013 ACCF/AHA guideline for the management of heart failure：a report of the American College of Cardiology Foundation/American Heart Association Task Force on PracticeGuidelines[J].JAmCollCardiol,62（16）∶e147-e239．

[6]黨愛民,陳炳偉.腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓[J].中國循環(huán)雜志,2012,27（2）∶83-84.

[7]Miyama N,Hasegawa Y,Suzuki M,et al.Investigation of major genetic polymorphisms in the Renin-Angiotensin-aldosterone system in subjects with young-onset hypertension selected by a targeted-screeningsystematuniversity[J].Clin Exp Hypertens,2007,29（1）∶61-67.

[8]楊靜,張泉,李江津,等.中國漢族人群醛固酮合成酶CYP11B2基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓相關(guān)性的薈萃分析[J].中華高血壓雜志,2011,19（7）∶672-677.

[9]張復(fù)貴,閡新文,曾秋棠,等.醛固酮合成酶基因一344C/T的多態(tài)性與心房顫動的關(guān)聯(lián)研究[J].臨床心血管病雜志,2009,25（12）∶919-922.

[10]劉冬,來永強,李進(jìn)華,等.醛固酮合成酶（CYPl1B2）多態(tài)性與左心室肥厚——Meta分析[J].中華胸心血管外科雜志,2013,29（1）∶18-23.

[11]馬寶新,劉現(xiàn)亮,李花,等.中國人醛固酮合成酶CYP11B2基因多態(tài)性與原發(fā)性高血壓左室肥厚相關(guān)性的Meta分析[J].華西醫(yī)學(xué), 2014,29（2）∶239-242.

[12]Amir O,Amir R E,Paz H,et al.Aldosterone synthase gene polymorphism as a determinant of atrial fibrillation in patients with heartfailure[J].AmJCardiol,2008,102∶326-329.

[13]范煜東,劉銘,王恒大.醛固酮合成酶和鹽皮質(zhì)激素受體基因在充血性心力衰竭心肌的表達(dá)[J].中國心血管雜志,2004,9（3）∶186-190.

[14]McNamara D M,Tam S W,Sabolinski M L,et al.Aldosterone Synthase Promoter Polymorphism Predicts Outcome in African Americans With Heart Failure Results From the A-HeFT Trial[J].J AmCollCardiol,2006,48（6）∶1277-1282.

The association between aldosterone synthase gene polymorphism and serum aldosterone level in patients with chronic heart failure

JI Naijun,LAN Xiang,CHEN Donghai,et al.
The Heart Center of Lishui City Hospital,The Sixth Affiliated Hospital of Wenzhou Medical University,Lishui 323000，悅hina

LAN Xiang,E-mail address:cash259@hotmail.com

ObjectiveTo investigate the association between aldosterone synthase（CYP11B2）gene polymorphism and serum aldosterone（ALD）level in patients with chronic heart failure(CHF).MethodsThe-344C/T polymorphism of CYP11B2 was analyzed by polymerase chain reaction and restriction enzyme digestion and serum ALD level was measured by radioimmunoassay in 62 CHF patients and 30 patients without cardiovascular disease.ResultsAmong 62 CHF patients,42 cases had the TT genotype(67.7%),17 cases had the CT genotype(27.4%)and 3 cases had the CC genotype(4.8%).There was no significant difference of-344C/T polymorphism of CYP11B2 between CHF and control group and among NYHA class II,III and IV.The serum ALD level was significantly higher in the TT genotype group than in CT/CC genotype combination group（168.3±54.4 ng/L vs 119.9±38.1 ng/L,t=3.575，P＜0.01）.ConclusionSerum ALD level increases significantly in CHF patients with the TT genotype.

Chronic heart failure;Aldosterone synthase（CYP11B2）gene;Aldosterone

2014-10-09）

（本文編輯：馬雯娜）

323000溫州醫(yī)科大學(xué)附屬第六醫(yī)院、麗水市人民醫(yī)院心臟中心

藍(lán)翔，E-mail：cash259@hotmail.com