王小杰 于宏亮

兩種定量D-二聚體檢測(cè)方法的比較分析

王小杰 于宏亮

目的對(duì)本院實(shí)驗(yàn)室采用的兩種定量D-二聚體測(cè)定方法進(jìn)行比較分析。方法隨機(jī)抽取100例患者標(biāo)本， 分別采用干式免疫散射色譜法和免疫比濁法對(duì)其D-二聚體含量時(shí)行測(cè)定， 即每天抽取20例， 連續(xù)測(cè)定5 d， 然后對(duì)兩種方法的測(cè)定結(jié)果進(jìn)行比較分析。結(jié)果兩種檢測(cè)方法測(cè)定的結(jié)果經(jīng)比較分析， 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。結(jié)論兩種檢測(cè)方法相關(guān)性良好， 但兩種方法各有優(yōu)缺， 應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)室實(shí)際情況選擇合適的方法。

D-二聚體；檢測(cè)；比較分析

D-二聚體是膠聯(lián)纖維蛋白降解產(chǎn)物中的一個(gè)特征性產(chǎn)物， 是繼發(fā)性纖溶的有效指標(biāo)。它能有效地確定有無穩(wěn)定的纖維蛋白存在， 其生成或升高反映了凝血和纖溶系統(tǒng)的激活， 因此， D-二聚體血漿水平含量的檢測(cè)對(duì)各種深靜脈血栓、彌散性血管內(nèi)凝血（DIC）、心肌梗死、術(shù)后肝、腎疾病及女性妊娠等疾病狀態(tài)下體內(nèi)纖溶功能的評(píng)價(jià)具有重要的臨床意義［1］。本院實(shí)驗(yàn)室采用兩種檢測(cè)方法對(duì)D-二聚體進(jìn)行測(cè)定，一種是干式免疫散射色譜法， 另一種是免疫比濁法。本文現(xiàn)對(duì)兩種方法檢測(cè)同一標(biāo)本的D-二聚體含量是否具有可比性進(jìn)行對(duì)比探討， 結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

1.1.1 標(biāo)本來源 隨機(jī)抽取的100例標(biāo)本均來自本院就診的門診及住院患者， 其中男50例， 女50例， 年齡18～90歲。

1.1.2 標(biāo)本處理 抽取待檢者靜脈血1.8 ml于含有109 mmol/L枸櫞酸鈉0.2 ml（抗凝比例為1:9）的真空采血管內(nèi)， 充分顛倒混勻后用離心機(jī)3500 r/min離心15 min， 分離血漿進(jìn)行測(cè)定，2 h內(nèi)檢測(cè)完畢。

1.2 試劑與儀器 干式免疫散射色譜法采用Axis-shield pol AS公司提供的金標(biāo)定量檢測(cè)試劑盒及配套的測(cè)讀儀挪威Nycocard Reader；免疫比濁法采用Sysmex CA7000全自動(dòng)血凝儀及配套試劑。兩種檢測(cè)方法的質(zhì)控品均由以上公司提供。

1.3 原理與方法

1.3.1 原理 干式免疫散射色譜法原理：將血漿加入反應(yīng)板孔內(nèi)， 樣品中的D-二聚體分子被包被的D-二聚體單克隆抗體膜捕獲， 然后加入D-二聚體單克隆抗體與膠體金的綴合物溶液， 膜中的D-二聚體與金標(biāo)抗體發(fā)生結(jié)合反應(yīng)， 并產(chǎn)生紅色顏色反應(yīng)， 顏色深淺與D-二聚體含量呈正比。免疫比濁法原理：樣品中的D-二聚體與包被有高特異性的D-二聚體單克隆抗體的乳膠顆粒結(jié)合后， 乳膠顆粒發(fā)生凝聚，在405 nm檢測(cè)透光強(qiáng)度的變化， 凝聚程度與樣本中的D-二聚體含量呈正比。

1.3.2 方法 每天隨機(jī)抽取20例標(biāo)本（門診、住院患者均有）， 同時(shí)用兩種方法進(jìn)行檢測(cè)， 連續(xù)測(cè)定5 d。每次測(cè)試前都嚴(yán)格檢查機(jī)器是否在正常工作狀態(tài)下；每種檢測(cè)方法都嚴(yán)格按照試劑說明書操作。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS18.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（ x-±s）表示， 采用t檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

兩種檢測(cè)方法測(cè)定的結(jié)果經(jīng)比較分析， 差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 兩種檢測(cè)方法測(cè)定D-二聚體結(jié)果比較（ x-±s， mg/L）

3 討論

D-二聚體檢測(cè)最早用于臨床排除各種深靜脈栓塞、肺栓塞風(fēng)險(xiǎn)的評(píng)估中， 并且被證實(shí)有臨床價(jià)值。近年來， 臨床和實(shí)驗(yàn)室嘗試通過動(dòng)態(tài)觀察D-二聚體水平含量來進(jìn)行手術(shù)后血栓風(fēng)險(xiǎn)的評(píng)估。月前， D-二聚體檢測(cè)在術(shù)后心血管疾病、妊娠、惡性腫瘤、肝腎疾病等領(lǐng)域中得到了廣泛應(yīng)用。正因如此， D-二聚體的檢測(cè)在臨床上廣受重視， 它在疾病的診斷、發(fā)生發(fā)展、監(jiān)測(cè)臨床患者用藥、術(shù)前術(shù)后凝血機(jī)制評(píng)估及疾病預(yù)后觀察等方面具有越來越重要的臨床價(jià)值。但是其檢測(cè)也受到很多因素影響， 即只要機(jī)體血管內(nèi)有血栓形成及纖維溶解活動(dòng)發(fā)生， D-二聚體含量就會(huì)升高。

D-二聚體檢測(cè)方法很多， 但近年來， 隨著技術(shù)的日新月異， D-二聚體的檢測(cè)方法被不斷地更新改進(jìn)， 原來的乳膠凝集玻片法和酶聯(lián)免疫法已很少用， 主要原因：乳膠凝集玻片法是一種半定量、靠肉眼觀察凝集顆粒的測(cè)定方法， 它敏感性差， 準(zhǔn)確度低， 只能作篩查用。酶聯(lián)免疫法雖然敏感度高，但其操作過程繁雜費(fèi)時(shí)， 且每次實(shí)驗(yàn)都必須做定標(biāo)， 不利于單個(gè)急診標(biāo)本檢測(cè)。

根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果， 本文研究的這兩種檢測(cè)方法均具有快速、操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確的特點(diǎn)， 尤其干式免疫散射色譜法具有更高的檢測(cè)靈敏度和精密度， 且不受高膽紅素及血紅蛋白的干擾， 特異性強(qiáng)［2］， 但是干式免疫散射色譜法測(cè)定一個(gè)批次的標(biāo)本量少， 每個(gè)標(biāo)本測(cè)定都需要一個(gè)單獨(dú)的反應(yīng)板， 且實(shí)驗(yàn)過程中容易受外界因素干擾， 如加樣量或反應(yīng)時(shí)間掌握不準(zhǔn)、外界光線的影響等［3］， 雖然如此， 但其配套的測(cè)讀儀具有易于攜帶、操作簡(jiǎn)便、檢測(cè)準(zhǔn)確等特點(diǎn)， 特別適合急診檢測(cè)， 更適合在基層醫(yī)院使用。

免疫比濁法不僅快速準(zhǔn)確， 受干擾因素少， 而且一個(gè)批次檢測(cè)樣本量比較大， 更適合在樣本量大的醫(yī)院使用。兩種方法各有優(yōu)缺， 但實(shí)驗(yàn)結(jié)果對(duì)比表明， 兩種方法差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）， 因此選擇哪一種試驗(yàn)方法都應(yīng)根據(jù)實(shí)驗(yàn)室實(shí)際情況而確定。

［1］ 丁振若， 于文彬.現(xiàn)代檢驗(yàn)醫(yī)學(xué).北京：人民軍醫(yī)出版社，2007:163.

［2］ 彭黎明， 鄧承祺.現(xiàn)代血栓與止血的實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)及應(yīng)用.北京:人民衛(wèi)生出版社， 2004:637.

［3］ 王金良.實(shí)用檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)技巧.天津:天津技術(shù)出版社，2006:150.

Comparative analysis of two quantitative D-dimer detection methods

WANG Xiao-jie, YU Hong-liang.
Department of Inspection, Henan Zhumadian City Central Hospital, Zhumadian 463000, China

ObjectiveTo compare the two quantitative D-dimer detection methods in laboratory of our hospital.MethodsRandom selection was made on 100 patient samples， and dry scattering immune chromatography and immunoturbidimetry were applied for detection of D-dimer， by process of 20 samples per day for 5 d.The results of the two methods were compared and analyzed.ResultsThere was no statistically significant difference of detection results between the two methods （P＞0.05）.ConclusionTwo methods have good correlation， while they have their own advantages and disadvantages.Suitable method should be determined by practical condition of laboratory.

D-dimer; Detectoin; Comparative analysis

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.07.018

2014-11-12］

463000 河南省駐馬店市中醫(yī)院檢驗(yàn)科