陳曉紅，朱學(xué)濤

(1、連云港市社會福利中心，江蘇 連云港222003；2、連云港市第一人民醫(yī)院檢驗科，江蘇 連云港222002)

糞便潛血試驗(fecal occult blood test,FOBT)是消化道出血的一個重要篩選指標(biāo)，當(dāng)消化道有少量出血時，因消化道的作用可使紅細(xì)胞溶解破壞，肉眼或顯微鏡檢測不到，采用化學(xué)法或免疫法等方法方能證實出血的試驗。糞便潛血試驗是測定消化道出血的一種方法，篩檢消化道腫瘤的有效手段[1]。血紅蛋白單克隆抗體測定的免疫法與傳統(tǒng)的化學(xué)法相比，靈敏度、特異性都有了很大的提高，且不受飲食或相關(guān)藥物(鐵劑)等影響，已被廣泛地應(yīng)用于臨床?；瘜W(xué)法對人血紅蛋白的特異性差，受其它動物血紅蛋白和其它因素的干擾，強調(diào)試驗前三天內(nèi)禁食動物血、肉、肝臟及富含葉綠素食物鐵劑、中藥以免假陽性的產(chǎn)生。但在實際工作中，有時臨床有消化道出血現(xiàn)象，而免疫法檢測結(jié)果出現(xiàn)陰性結(jié)果，文獻(xiàn)報道不同的檢測潛血試驗的方法在臨床上存在著差異[2,3]，為了探討免疫法和化學(xué)法檢測消化道出血的應(yīng)用價值，選擇了2014年9月-2015年4月本院108例經(jīng)內(nèi)窺鏡檢查診斷有消化道出血疾病的患者，112例健康體檢者。18例嘔吐伴胃出血患者?，F(xiàn)報告如下。

1 材料與方法

1.1 材料與檢測方法

1.1.1 免疫法 金標(biāo)層析法為免疫法中的代表方法，單克隆Hb免疫夾心法檢測人Hb金標(biāo)試紙條，杭州艾博生物醫(yī)藥有限公司生產(chǎn)，批號：2014050016。

1.1.2 化學(xué)法 匹拉米洞法為化學(xué)法中的代表方法，珠海貝索生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)，批號：215011。

1.1.3 免疫法和化學(xué)法同時檢測為雙聯(lián)法，也稱序貫法。

1.2 對象

1.2.1 112例健康體檢者，血常規(guī)檢查無貧血和血小板減少，癌胚抗原(CEA)正常，無痔瘡。

1.2.2 經(jīng)內(nèi)窺鏡檢查確診有消化道出血的139例患者(包括胃腸潰瘍、出血、腫瘤、息肉)。

1.2.3 121例嘔吐胃黏膜損傷出血患者的胃內(nèi)容物?；颊咧饕獮橹匕Y監(jiān)護(hù)患者、腦外傷、腦梗死、肺部嚴(yán)重感染，化療患者化療藥物副作用引起腸胃反應(yīng)。

2 結(jié)果

2.1 健康體檢者與消化道出血患者糞便免疫法和化學(xué)法潛血試驗檢測結(jié)果比較 上消化道出血樣本中62例陽性樣本，有8例患者的樣本呈現(xiàn)黑色柏油樣，用免疫法檢測為陰性，而化學(xué)法為強陽性。見表1。

表1 糞便免疫法和化學(xué)法潛血試驗檢測結(jié)果比較(%)

2.2 胃內(nèi)容物免疫法和化學(xué)法潛血試驗檢測結(jié)果比較 121例樣本中有75例為黏液包裹的咖啡色樣本。見表2。

表2 胃內(nèi)容物免疫法和化學(xué)法潛血試驗檢測結(jié)果比較(%)

3 討論

從表1可以看出健康人對照組在正常飲食情況下留取糞便樣本，免疫法和化學(xué)法的檢測結(jié)果一樣均檢測出2例陽性標(biāo)本，且2例陽性重疊，檢出率為1.8%。

經(jīng)隨訪得知，1例體檢者留取糞便前一天曾出現(xiàn)鼻出血現(xiàn)象，1例體檢者近幾日早刷牙有較為嚴(yán)重的牙齦出血現(xiàn)象，均是由于部分血液被吞咽，進(jìn)入消化道。

使用免疫法檢測Hb，上消化道出血患者糞便樣本中，免疫法Hb檢出率43.2%，化學(xué)法Hb檢出率53.2%；下消化道出血患者糞便樣本中，免疫法Hb檢出率50.0%，化學(xué)法Hb檢出率64.3%，免疫法和化學(xué)法同時測定，以其中一項陽性即診斷為陽性，上消化道出血患者陽性檢出率55.9%，下消化道出血患者陽性檢出率67.9%。上消化道出血患者免疫法的陽性檢出率低，是因為Hb在消化道中，受腸內(nèi)細(xì)菌和消化酶的作用而變性，導(dǎo)致其抗原性降低，由于體液中的蛋白成分阻礙抗原抗體反應(yīng)，而出現(xiàn)假陰性結(jié)果[4]。張錫蓮報道胃酸對胃液匹拉米洞法潛血試驗有一定的影響[5]，但紅細(xì)胞破裂釋放的Hb，經(jīng)胃酸作用的血基質(zhì)仍然可與匹拉米洞反應(yīng)，結(jié)果為陽性，本文上消化道出血患者化學(xué)法的陽性檢出率為53.2%，免疫法的陽性檢出率為43.2%，為了解決此差別，國內(nèi)外學(xué)者對Hb以外的血液成分也作出了深入研究，如轉(zhuǎn)鐵蛋白、結(jié)合膽紅素、纖維蛋白原、卟啉鐵、卟啉衍生物等。有研究報道，糖化血紅蛋白以及觸珠蛋白對膠體金單克隆抗體法檢測Hb也有一定的影響[6,7]。

免疫法和化學(xué)法同時檢測結(jié)果與內(nèi)窺鏡檢查確定有消化道出血者進(jìn)行比較可以看出，其符合率較低，分別為55.9%和67.9%。一方面可能受腸內(nèi)細(xì)菌作用的影響，有些Hb被分解或在上消化道被胃液消化。另一方面與糞便的采集方法關(guān)系密切相關(guān)，糞便中混有的血液與尿液中混有的血液不同，尿液中的血液是在溶液中的均勻體，而糞便中是不均勻地分布在固體糞便內(nèi)，檢測的樣本只是整個樣本的很少一部分。因此潛血試驗檢查應(yīng)嚴(yán)格按照操作規(guī)程執(zhí)行[8]，連續(xù)檢查3d，并挑取外表及內(nèi)層糞便，收集后應(yīng)迅速檢查，避免時間過長造成靈敏度降低。

另外與患者的疾病的特點也有重要關(guān)聯(lián)，如潰瘍病患者呈間斷性陽性，也是造成與臨床符合率降低的原因之一。

從表2還可以看出121例胃內(nèi)容物的檢測結(jié)果，121例樣本中有75例為黏液包裹的咖啡色樣本，免疫法和化學(xué)法同時測定95例(78.5%)陽性，92例(76.0%)化學(xué)法呈現(xiàn)陽性，而免疫法只有71例(58.7%)呈現(xiàn)陽性。出現(xiàn)此種現(xiàn)象主要是由于胃內(nèi)容物樣本本身的特點造成的，由于胃內(nèi)容物往往夾雜著許多胃黏液，樣本呈現(xiàn)黏稠狀，將紅細(xì)胞包裹在黏液中，使用免疫法很難挑取到黏液內(nèi)部樣本，操作者的不同挑取部位也有著很大的差別。化學(xué)法使用的試劑是液體的，可以和樣本很好地和樣本混合，使夾雜在黏液內(nèi)的標(biāo)本呈現(xiàn)陽性結(jié)果。

化學(xué)法在對上消化道出血樣本檢測時，62例陽性樣本中，有8例患者的樣本呈現(xiàn)黑色柏油樣，用免疫法檢測為陰性，而化學(xué)法為強陽性。這種現(xiàn)象可能是大量的出血由于抗原過高，反應(yīng)呈現(xiàn)帶現(xiàn)象，而出現(xiàn)假陰性結(jié)果，雖然可以稀釋樣本可以再次檢測，并且要求使用低滲緩沖液稀釋，操作過程繁瑣，且稀釋的比例難以控制。使用化學(xué)法作為消化道出血檢測的有效補充，特別是上消化道出血造成的顏色深的糞便有實用價值，與免疫法起到互補作用。

潛血試驗對于判別消化道是否有出血有重要意義，免疫法檢測Hb特異性好、靈敏度高、干擾因素少、操作簡便、污染小，但由于大量出血造成帶現(xiàn)象，而出現(xiàn)假陰性結(jié)果，黏稠的樣本檢出陽性率低?；瘜W(xué)法的靈敏度較高，但特異性較差，可以彌補免疫法中對特殊樣本的不足，特別是上消化道大量出血黑色柏油樣糞便，在胃內(nèi)容物黏稠樣本檢測也可得到較好結(jié)果，因此免疫法還不能夠完全取代化學(xué)法檢測?？傊?，化學(xué)法和免疫法檢測Hb均具有獨特的臨床意義，在臨床應(yīng)用中應(yīng)了解互補關(guān)系，正確選用，合理分析和科學(xué)選擇不同的檢測方法，對疾病診斷至關(guān)重要。

[1]姜佳麗,萬曉萍.糞便潛血試驗的臨床應(yīng)用[J].中華內(nèi)科雜志,2012,51(2):93-94.

[2]胡冬華,劉瓊,李琴.單克隆抗體法檢測糞便隱血的臨床應(yīng)用探討[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué),2008,26(4):453-454.

[3]黃勝,梁華英,何艷,等.三種糞便隱血試驗的臨床應(yīng)用評價[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué),2011,29(1):69-70.

[4]內(nèi)田夫,他.關(guān)于免疫學(xué)便潛血反應(yīng)的基礎(chǔ)研究[J].臨床檢查儀器.試劑,1998,11(2):167-172.

[5]張錫蓮.胃酸對胃液匹拉米洞法潛血試驗的影響[J].實驗與檢驗醫(yī)學(xué),2011,29(3):305.

[6]馬金霞,劉秀華,潘世揚.糖化血紅蛋白對金免疫隱血試驗的干擾分析[J].臨床檢驗雜志,2001,19(5):315-316.

[7]仇祝強,宮凌娟,劉雪芹.觸珠蛋白對便潛血單克隆抗體法檢測的影響[J].上海醫(yī)學(xué)檢驗雜志,2000,15(1):25.

[8]葉應(yīng)嫵,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗操作規(guī)程[M].第3版.南京:東南大學(xué)出版社,2006:302.