李永娟 王衛(wèi)民 黃燕華 曹俊明* 王國(guó)霞

趙紅霞1,3,4 劉少昱1,3,4 馬永萍1,3,4

(1.廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動(dòng)物科學(xué)研究所，廣州510640；2.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院，武漢430070；3.廣東省動(dòng)物育種與營(yíng)養(yǎng)公共實(shí)驗(yàn)室，廣州510640；4.廣東省畜禽育種與營(yíng)養(yǎng)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣州510640)

?

飼料中添加β-葡聚糖對(duì)黃顙魚(yú)幼魚(yú)生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)及抗嗜水氣單胞菌感染能力的影響

李永娟1,2,3,4王衛(wèi)民2黃燕華1,3,4曹俊明1,3,4*王國(guó)霞1,3,4

趙紅霞1,3,4劉少昱1,3,4馬永萍1,3,4

(1.廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動(dòng)物科學(xué)研究所，廣州510640；2.華中農(nóng)業(yè)大學(xué)水產(chǎn)學(xué)院，武漢430070；3.廣東省動(dòng)物育種與營(yíng)養(yǎng)公共實(shí)驗(yàn)室，廣州510640；4.廣東省畜禽育種與營(yíng)養(yǎng)研究重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室，廣州510640)

為研究飼料中添加β-葡聚糖對(duì)黃顙魚(yú)幼魚(yú)生長(zhǎng)性能、血清生化指標(biāo)及抗嗜水氣單胞菌感染能力的影響，在基礎(chǔ)飼料中分別添加200、600和1 000 mg/kg β-葡聚糖配制3種試驗(yàn)飼料。選取初始體重為(1.53±0.04) g的健康黃顙魚(yú)幼魚(yú)720尾，隨機(jī)分為7組，包括1個(gè)投喂基礎(chǔ)飼料的對(duì)照組(G0組)、3個(gè)連續(xù)投喂添加β-葡聚糖飼料的連續(xù)投喂組(SG200、SG600、SG1000組)及3個(gè)間隔投喂添加β-葡聚糖飼料和基礎(chǔ)飼料各7 d的間隔投喂組(IG200、IG600、IG1000組)。連續(xù)投喂組每組4個(gè)重復(fù)，對(duì)照組和間隔投喂組每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)均為30尾魚(yú)。試驗(yàn)期為42 d。養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后，注射嗜水氣單胞菌進(jìn)行感染試驗(yàn)，計(jì)算96 h內(nèi)的累計(jì)死亡率。結(jié)果顯示：1)7組黃顙魚(yú)幼魚(yú)的增重率、飼料系數(shù)、蛋白質(zhì)效率和存活率均沒(méi)有顯著差異(P>0.05)，但I(xiàn)G1000組的肝體比較對(duì)照組顯著降低(P<0.05)。各β-葡聚糖添加組的增重率和蛋白質(zhì)效率與對(duì)照組相比均有所升高，且連續(xù)投喂組的增重率高于對(duì)應(yīng)的間隔投喂組，并在SG600組達(dá)到最高。2)各β-葡聚糖添加組全魚(yú)粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和粗灰分含量均高于對(duì)照組，同時(shí)水分含量均低于對(duì)照組，但組間差異不顯著(P>0.05)。3)飼料中添加β-葡聚糖對(duì)黃顙魚(yú)幼魚(yú)各血清生化指標(biāo)均無(wú)顯著影響(P>0.05)；與對(duì)照組相比，SG1000和IG600組血清球蛋白和總蛋白含量有所升高，各β-葡聚糖添加組血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性均有所降低。4)嗜水氣單胞菌感染96 h后，各組的累計(jì)死亡率在35%～46%之間，組間差異不顯著(P>0.05)。由此得出，除間隔投喂1 000 mg/kg β-葡聚糖顯著降低肝體比外，不論采取連續(xù)投喂還是間隔投喂方式，飼料中添加200、600和1 000 mg/kg β-葡聚糖對(duì)黃顙魚(yú)幼魚(yú)的生長(zhǎng)性能、體成分、血清生化指標(biāo)及抗嗜水氣單胞菌感染能力均沒(méi)有顯著影響。

β-葡聚糖；黃顙魚(yú)；生長(zhǎng)性能；血清生化指標(biāo)；嗜水氣單胞菌

黃顙魚(yú)(Pelteobagrusfulvidraco)又名黃臘丁，屬鯰形目,鲿科,黃顙魚(yú)屬，是淡水水體中分布較廣的底層經(jīng)濟(jì)雜食性魚(yú)類(lèi)，也是我國(guó)經(jīng)濟(jì)結(jié)構(gòu)調(diào)整的優(yōu)良品種。近年來(lái)，隨著黃顙魚(yú)集約化和規(guī)?；B(yǎng)殖的發(fā)展，病害防控越來(lái)越成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)。應(yīng)用β-葡聚糖等免疫增強(qiáng)劑提高黃顙魚(yú)的非特異性免疫能力和對(duì)病害的抵抗力，是解決此類(lèi)問(wèn)題的有效途徑之一。目前，關(guān)于β-葡聚糖對(duì)黃顙魚(yú)生長(zhǎng)性能和抗病力等的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。因此，本試驗(yàn)通過(guò)在飼料中添加不同水平的β-葡聚糖，并采用連續(xù)和間隔2種投喂方式，研究β-葡聚糖對(duì)黃顙魚(yú)幼魚(yú)生長(zhǎng)性能、體成分、血清生化指標(biāo)及抗嗜水氣單胞菌感染能力的影響，以便為β-葡聚糖在黃顙魚(yú)飼料中的應(yīng)用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)飼料

以魚(yú)粉、豆粕為主要蛋白質(zhì)源，高筋面粉為主要糖源，魚(yú)油為主要脂肪源配制基礎(chǔ)飼料，其組成及營(yíng)養(yǎng)水平見(jiàn)表1。在基礎(chǔ)飼料中分別添加200、600和1 000 mg/kg酵母β-葡聚糖配制3種試驗(yàn)飼料。酵母β-葡聚糖主鏈為β-1,3結(jié)構(gòu)，純度>90%，來(lái)自安琪酵母有限公司。飼料原料經(jīng)粉碎后過(guò)40目篩，按配方準(zhǔn)確稱取。β-葡聚糖以高筋面粉作為載體，再逐級(jí)放大。各種飼料成分充分混勻，用SLX-80型雙螺桿擠壓機(jī)制成粒徑為1.5 mm的顆粒飼料，55 ℃烘干，自然冷卻后放入密封袋中，置于-20 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

1.2 試驗(yàn)魚(yú)與飼養(yǎng)管理

試驗(yàn)用黃顙魚(yú)幼魚(yú)購(gòu)自廣東省清遠(yuǎn)市黃沙漁業(yè)基地，養(yǎng)殖試驗(yàn)在廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院動(dòng)物科學(xué)研究所水產(chǎn)研究室室內(nèi)循環(huán)水養(yǎng)殖系統(tǒng)中進(jìn)行。養(yǎng)殖系統(tǒng)包括24個(gè)350 L圓柱形纖維玻璃缸(直徑80 cm，高70 cm，水體體積約為300 L)，進(jìn)水速率為1.5 L/min。養(yǎng)殖用水為曝氣的自來(lái)水，經(jīng)珊瑚石、活性炭過(guò)濾。將購(gòu)買(mǎi)的魚(yú)苗先放在室外水泥池中暫養(yǎng)2周，期間投喂不含β-葡聚糖的商品飼料，每天2次。試驗(yàn)開(kāi)始時(shí)，選取初始體重(1.53±0.04) g的黃顙魚(yú)幼魚(yú)720尾，隨機(jī)分為7組，分別為投喂基礎(chǔ)飼料組(G0組，作為對(duì)照組)、連續(xù)投喂添加200、600和1 000 mg/kg β-葡聚糖飼料的3個(gè)連續(xù)投喂組(SG200、SG600和SG1000組)和先投喂添加200、600、1 000 mg/kg β-葡聚糖飼料7 d、再投喂基礎(chǔ)飼料7 d的3個(gè)間隔投喂組(IG200、IG600和IG1000組)。其中，連續(xù)投喂組每組4個(gè)重復(fù)，對(duì)照組和間隔投喂組每組3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)均為30尾魚(yú)。每天08:30和18:30各投喂1次，初次投喂量約為初始體重的5%，按攝食情況調(diào)整投喂量。試驗(yàn)過(guò)程中自然光照，每天測(cè)定溶氧濃度、水溫、pH等，記錄死亡魚(yú)尾數(shù)和重量。養(yǎng)殖期間氨氮濃度<0.2 mg/L，亞硝酸鹽濃度<0.02 mg/L，溶氧濃度>6.0 mg/L，水溫28～32 ℃，pH 7.5～8.0。每周換水2次，每次換水量為總體積的1/3。養(yǎng)殖試驗(yàn)為期42 d。

表1 基礎(chǔ)飼料組成及營(yíng)養(yǎng)水平(風(fēng)干基礎(chǔ))

1)每千克維生素預(yù)混料含有One kilogram of vitamin premix contained the following：VA 3 200 000 IU，VB14 g，VB28 g，VB64.8 g，VB1216 mg，VD 31 600 000 IU，VE 16 g，VK 4 g，泛酸鈣 calcium pantothenate 16 g，葉酸 folic acid 1.28 g，煙酸 nicotinic acid 28 g，肌醇 inositol 40 g，生物素 biotin 64 mg，水分 moisture≤10%。

2)每千克礦物質(zhì)預(yù)混料含One kilogram of mineral premix contained the following：MgSO4·H2O 12 g，Ca(IO3)29 g，KCl 36 g，Met-Cu 1.5 g，ZnSO4·H2O 10 g，F(xiàn)eSO4·H2O 1 g，Met-Co 250 mg，NaSeO30.003 6 g。

3)營(yíng)養(yǎng)水平為實(shí)測(cè)值Nutrient levels were measured values。

1.3 樣品采集

養(yǎng)殖試驗(yàn)結(jié)束后停食24 h，記錄每個(gè)重復(fù)魚(yú)的尾數(shù)，稱量魚(yú)體總重。每個(gè)重復(fù)隨機(jī)取5尾魚(yú)，用于全魚(yú)體成分的測(cè)定。每個(gè)重復(fù)隨機(jī)取15尾魚(yú)，經(jīng)MS-222麻醉后用1 mL無(wú)菌注射器于尾靜脈取血，靜置4 h，4 000 r/min離心10 min制備血清，取上清液分裝，保存于-80 ℃冰箱中備用。

1.4 指標(biāo)分析

1.4.1 生長(zhǎng)性能計(jì)算公式

增重率(weight gain rate,WGR,%)=

100×(Wt-W0)/W0；

存活率(survival rate,SR,%)=100×Nf/Ni；

飼料系數(shù)(feed conversion ratio,FCR)=

F/(Wt-W0)；

蛋白質(zhì)效率(protein efficiency rate,PER,%)=

100×(Wt-W0)/(F×P)；

肝體比(hepatosomatic index,HSI,%)=

100×Wh/Wt；

肥滿度(condition factor,CF,g/cm3)=

100×Wt/L3。

式中：W0為初始體重(g)；Wt為終末體重(g)；Nf為終末尾數(shù)(尾)；Ni為初始尾數(shù)(尾)；F為飼料攝入量(g)；P為飼料粗蛋白質(zhì)含量(%)；Wh為肝臟重量(g)；L為體長(zhǎng)(cm)。

1.4.2 體成分測(cè)定

粗蛋白質(zhì)含量采用凱氏定氮法(GB/T 6432—1994)、粗脂肪含量采用乙醚抽提法(GB/T 6433—1994)、粗灰分含量采用550 ℃灼燒法(GB/T 6438—1992)、水分含量采用105 ℃烘箱干燥法(GB/T 6435—1986)進(jìn)行測(cè)定。

1.4.3 血清生化指標(biāo)分析

血清球蛋白(gobulin,GLO)、總蛋白(total protein,TP)、甘油三酯(triglyceride,TG)、膽固醇(cholesterol,CHO)、尿素(urea,UR)、葡萄糖(glucose，GLU)含量及谷丙轉(zhuǎn)氨酶(glutamic pyruvic transaminase,GPT)和谷草轉(zhuǎn)氨酶(glutamic oxalacetic transaminase,GOT)活性委托廣州金域醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)中心測(cè)定。

1.5 嗜水氣單胞菌感染試驗(yàn)

試驗(yàn)用嗜水氣單胞菌菌種來(lái)自中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)院南海水產(chǎn)研究所。菌種用營(yíng)養(yǎng)肉湯瓊脂培養(yǎng)基在37 ℃培養(yǎng)箱中搖床培養(yǎng)24 h，復(fù)壯2次。選取對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期的菌體，4 000 r/min離心1 min，收集沉淀菌體，用滅菌生理鹽水清洗。集菌后進(jìn)行梯度稀釋，預(yù)試驗(yàn)確定半數(shù)致死濃度。在600 nm下，制備吸光度(OD)值為0.2的菌體懸液(約107CFU/mL)，置于4 ℃冰箱中保存?zhèn)溆谩?/p>

養(yǎng)殖試驗(yàn)采樣結(jié)束后，每組選取大小一致的魚(yú)40尾，隨機(jī)分為4個(gè)桶，其中3個(gè)桶每尾魚(yú)腹腔注射40 μL的嗜水氣單胞菌懸液，另外1個(gè)桶腹腔注射等量的生理鹽水。觀察感染魚(yú)體出現(xiàn)癥狀，并及時(shí)撈出死亡個(gè)體，記錄死亡尾數(shù)。感染期間投喂基礎(chǔ)飼料，不間斷充氣，水體不循環(huán)。感染試驗(yàn)時(shí)間為96 h，計(jì)算累積死亡率(accumulative mortality rate,AMR)。

累積死亡率(%)=(感染結(jié)束時(shí)死亡魚(yú)尾數(shù)/

感染魚(yú)尾數(shù))×100。

1.6 統(tǒng)計(jì)分析

試驗(yàn)結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(mean±SD)表示，采用SPSS 17.0軟件進(jìn)行單因素方差分析(one-way ANOVA)，利用Duncan氏法多重比較進(jìn)行組間顯著差異分析，差異顯著性水平為P<0.05。

2 結(jié)果與分析

2.1 黃顙魚(yú)幼魚(yú)的生長(zhǎng)性能

由表2可見(jiàn)，除IG600組魚(yú)的增重率低于對(duì)照組外，其他β-葡聚糖添加組魚(yú)的增重率均高于對(duì)照組，而且連續(xù)投喂組的增重率高于對(duì)應(yīng)的間隔投喂組，但是各組之間均無(wú)顯著差異(P>0.05)。在3個(gè)連續(xù)投喂組中，增重率以SG600最高，但組間差異不顯著(P>0.05)。各組之間的存活率、飼料系數(shù)和蛋白質(zhì)效率無(wú)顯著差異(P>0.05)。飼料中添加β-葡聚糖有降低肝體比的趨勢(shì)，IG1000組的肝體比顯著低于對(duì)照組(P<0.05)。除SG1000組魚(yú)的肥滿度低于對(duì)照組外，β-葡聚糖添加組魚(yú)的肥滿度均高于對(duì)照組，而且連續(xù)投喂組的肥滿度低于對(duì)應(yīng)的間隔投喂組，但是各組之間均無(wú)顯著差異(P>0.05)。

2.2 黃顙魚(yú)幼魚(yú)的體成分

由表3可見(jiàn)，β-葡聚糖添加組魚(yú)體的粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和粗灰分含量均高于對(duì)照組，但未出現(xiàn)顯著差異(P>0.05)。除SG200組的粗蛋白質(zhì)含量低于IG200組外，另外2個(gè)連續(xù)投喂組均高于對(duì)應(yīng)的間隔投喂組，但組間差異不顯著(P>0.05)。β-葡聚糖添加組魚(yú)體的水分含量均低于對(duì)照組，但差異不顯著(P>0.05)。

表2 飼料中添加β-葡聚糖對(duì)黃顙魚(yú)幼魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響

同行數(shù)據(jù)肩標(biāo)無(wú)字母或相同字母表示差異不顯著(P>0.05)，不同小寫(xiě)字母表示差異顯著(P<0.05)。下表同。

In the same row, values with no letter or the same letter superscripts mean no significant difference (P>0.05), while with different small letter superscripts mean significant difference (P<0.05). The same as below.

表3 飼料中β-葡聚糖對(duì)黃顙魚(yú)幼魚(yú)體成分的影響(濕重基礎(chǔ))

2.3 黃顙魚(yú)幼魚(yú)的血清生化指標(biāo)

由表4可見(jiàn)，飼料中添加β-葡聚糖對(duì)黃顙魚(yú)幼魚(yú)各血清生化指標(biāo)均沒(méi)有顯著影響(P>0.05)。其中，對(duì)照組血清球蛋白和總蛋白含量低于SG1000和IG600組，各β-葡聚糖添加組血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性均低于對(duì)照組。

表4 飼料中添加β-葡聚糖對(duì)黃顙魚(yú)幼魚(yú)血清生化指標(biāo)的影響

2.4 黃顙魚(yú)幼魚(yú)感染嗜水氣單胞菌后的累計(jì)死亡率

注射生理鹽水的各桶試驗(yàn)魚(yú)直到試驗(yàn)結(jié)束都沒(méi)有出現(xiàn)魚(yú)體死亡現(xiàn)象。注射嗜水氣單胞菌后20 h，各組試驗(yàn)魚(yú)開(kāi)始出現(xiàn)死亡，病魚(yú)離群，活動(dòng)量減少，游動(dòng)異常，體表及腹腔內(nèi)出現(xiàn)不同程度的充血。感染96 h后各組試驗(yàn)魚(yú)的累計(jì)死亡率見(jiàn)表5。7組黃顙魚(yú)的累計(jì)死亡率在35%～46%之間，組間未出現(xiàn)顯著差異(P>0.05)。

表5 感染嗜水氣單胞菌96 h后黃顙魚(yú)幼魚(yú)的累計(jì)死亡率

3 討 論

3.1 飼料中添加β-葡聚糖對(duì)黃顙魚(yú)幼魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響

β-葡聚糖對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)性能的作用已有大量研究，但是作用效果卻因飼料配方[12]、添加劑量[15]或生長(zhǎng)階段[16]等不同而表現(xiàn)出差異性。吳春玉等[8]對(duì)花鱸的研究表明，飼料中添加β-1,3-葡聚糖可以顯著提高生長(zhǎng)性能，但周艷萍[17]的研究結(jié)果顯示，β-葡聚糖對(duì)異育銀鯽(Carassiusauratusgibelio)的生長(zhǎng)性能無(wú)顯著影響。另外有報(bào)道指出，長(zhǎng)期連續(xù)投喂β-葡聚糖會(huì)抑制齊口裂腹魚(yú)(SchizothoraxprenantiTchang)的生長(zhǎng)[18]。作為一種免疫增強(qiáng)劑，β-葡聚糖對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)性能的作用機(jī)制尚不清楚，有學(xué)者指出，β-葡聚糖可以作為營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被消化吸收提供能量[19]，但譚北平等[20]認(rèn)為β-葡聚糖提供的能量有限，應(yīng)該是通過(guò)提高抗氧化能力來(lái)促進(jìn)生長(zhǎng)。本試驗(yàn)中，在飼料中添加不同水平的β-葡聚糖，并采用連續(xù)和間隔2種投喂方式，養(yǎng)殖42 d后，可以一定程度提高黃顙魚(yú)幼魚(yú)的增重率，而且連續(xù)投喂的效果優(yōu)于間隔投喂，但是并沒(méi)有因?yàn)樘砑铀交蛲段狗绞降牟煌霈F(xiàn)顯著性差異。這與β-葡聚糖對(duì)暗紋東方鲀[8]的作用效果一致。在對(duì)鯉魚(yú)(Cyprinuscarpio)的研究中也發(fā)現(xiàn)，投喂葡聚糖60 d對(duì)其生長(zhǎng)性能沒(méi)有顯著影響[21]。在本試驗(yàn)中，連續(xù)投喂組的增重率隨β-葡聚糖添加量的增加出現(xiàn)先升高后降低的趨勢(shì)，這與吳春玉等[8]對(duì)花鱸的研究結(jié)果相似，表明β-葡聚糖對(duì)黃顙魚(yú)生長(zhǎng)性能的影響亦與添加量相關(guān)。有研究發(fā)現(xiàn)，采用間隔投喂β-葡聚糖的方式可以緩解長(zhǎng)期投喂對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物生長(zhǎng)的抑制作用[22]，但是本試驗(yàn)中，3個(gè)間隔投喂組的增重率均低于相應(yīng)的連續(xù)投喂組，而且隨添加量的增加出現(xiàn)先下降后上升的趨勢(shì)，與連續(xù)投喂組的趨勢(shì)相反，出現(xiàn)這種結(jié)果可能與魚(yú)的種類(lèi)、生長(zhǎng)時(shí)期、養(yǎng)殖周期或者β-葡聚糖的添加量等有關(guān)。因此，關(guān)于β-葡聚糖對(duì)黃顙魚(yú)幼魚(yú)生長(zhǎng)性能影響的作用效果和機(jī)制的研究還有待繼續(xù)深入，包括生長(zhǎng)階段、飼料營(yíng)養(yǎng)水平、投喂頻率以及投喂方式等多方面的因素，以便進(jìn)一步明確β-葡聚糖在黃顙魚(yú)健康養(yǎng)殖中的應(yīng)用效果。

本試驗(yàn)中，β-葡聚糖沒(méi)有對(duì)黃顙魚(yú)幼魚(yú)的蛋白質(zhì)效率產(chǎn)生顯著影響，但是出現(xiàn)升高趨勢(shì)，這與其對(duì)增重率的作用效果一致。肝體比和肥滿度是反映魚(yú)體形體的指標(biāo)。本研究結(jié)果顯示，飼料中添加β-葡聚糖可以降低肝體比，提高肥滿度，這與β-1,3-葡聚糖對(duì)花鱸[8]、幾丁聚糖對(duì)吉富羅非魚(yú)[23](Oreochromisniloticus)的研究結(jié)果一致，其中間隔投喂1 000 mg/kg組肝體比顯著低于對(duì)照組，推測(cè)β-葡聚糖可能通過(guò)提高黃顙魚(yú)幼魚(yú)的消化酶活性來(lái)提高飼料利用效率，進(jìn)而增加營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)在機(jī)體的沉積，引起肝體比降低。覃志彪[24]曾報(bào)道，飼料中添加β-葡聚糖能顯著提高奧尼羅非魚(yú)蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶和纖維素酶活性，肌肉粗蛋白質(zhì)含量隨β-葡聚糖添加量的增加而增加。

本試驗(yàn)結(jié)果表明，β-葡聚糖對(duì)黃顙魚(yú)魚(yú)體粗蛋白質(zhì)、粗脂肪和粗灰分含量的影響差異不顯著，這與趙紅霞等[25]及譚崇桂等[26]對(duì)凡納濱對(duì)蝦的研究結(jié)果一致。周艷萍等[17]的試驗(yàn)中，飼料中添加β-葡聚糖對(duì)異育銀鯽的肌肉成分也無(wú)顯著影響。本試驗(yàn)的結(jié)果可能是因?yàn)樵囼?yàn)中各組飼料的營(yíng)養(yǎng)水平基本一致，在此養(yǎng)殖階段內(nèi)黃顙魚(yú)機(jī)體組成保持相對(duì)穩(wěn)定沒(méi)有達(dá)到差異顯著水平。

3.2 飼料中添加β-葡聚糖對(duì)黃顙魚(yú)幼魚(yú)血清生化指標(biāo)的影響

血清生化指標(biāo)可以反映機(jī)體物質(zhì)代謝和某些組織器官的變化，常用來(lái)評(píng)價(jià)魚(yú)體健康和營(yíng)養(yǎng)狀況等。血清中的蛋白質(zhì)主要維持滲透壓，其含量變化與機(jī)體的生理密切相關(guān)，可反映動(dòng)物的健康狀況，具有免疫功能。本試驗(yàn)中，各組血清總蛋白和球蛋白含量未出現(xiàn)顯著差異，兩者的變化趨勢(shì)基本一致。胡毅等[27]在飼料中添加復(fù)合芽孢桿菌制劑養(yǎng)殖凡納濱對(duì)蝦10周后發(fā)現(xiàn)血清總蛋白含量顯著提高。血清中甘油三酯和膽固醇含量的變化可反映機(jī)體脂質(zhì)代謝功能，尿素為衡量機(jī)體蛋白質(zhì)分解代謝的指標(biāo)，葡萄糖是機(jī)體主要的能量物質(zhì)。本試驗(yàn)中，β-葡聚糖對(duì)上述指標(biāo)表現(xiàn)出不同程度的影響，但差異均未達(dá)顯著水平，原因有待進(jìn)一步研究。轉(zhuǎn)氨酶是反映肝功能的重要指標(biāo)，其活性升高是肝細(xì)胞損傷的標(biāo)志。本研究結(jié)果顯示，飼料中添加β-葡聚糖有降低血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶和谷草轉(zhuǎn)氨酶活性的趨勢(shì)，但并未達(dá)到顯著水平，表明β-葡聚糖可在一定程度內(nèi)保護(hù)肝臟，此結(jié)果與β-1,3-葡聚糖在鱸魚(yú)[8]、酵母細(xì)胞壁免疫多糖在草魚(yú)(Ctenopharyngodonidellus)[28]上的研究結(jié)果一致。Dawood等[29]對(duì)海鯛(Pagelluserythrinus)的研究結(jié)果顯示，飼料中添加β-葡聚糖對(duì)血清中谷草轉(zhuǎn)氨酶、谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性及尿素含量無(wú)顯著影響。周傳朋等[30]的研究表明，寡糖-中草藥復(fù)合物可降低異育銀鯽血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶的活性。賀國(guó)龍等[28]發(fā)現(xiàn)，在飼料中添加0.5%的酵母細(xì)胞壁免疫多糖可顯著降低草魚(yú)血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性。

3.3 飼料中添加β-葡聚糖對(duì)黃顙魚(yú)幼魚(yú)抗嗜水氣單胞菌感染能力的影響

在本試驗(yàn)中，飼料中添加β-葡聚糖，無(wú)論是連續(xù)投喂還是間隔投喂，均沒(méi)有顯著降低黃顙魚(yú)幼魚(yú)感染嗜水氣單胞菌后的累計(jì)死亡率。這說(shuō)明，在本試驗(yàn)條件下，β-葡聚糖沒(méi)有提高黃顙魚(yú)抵抗嗜水氣單胞菌感染的能力，這與其對(duì)生長(zhǎng)性能的影響相一致，其原因和機(jī)理有待結(jié)合免疫指標(biāo)分析等進(jìn)一步深入探討。同樣，對(duì)羅非魚(yú)進(jìn)行海豚鏈球菌感染，結(jié)果顯示各組的存活率沒(méi)有受到顯著影響，葡聚糖對(duì)羅非魚(yú)抗海豚鏈球菌感染能力沒(méi)有顯著影響[36]。這提示，β-葡聚糖對(duì)水產(chǎn)動(dòng)物的抗菌活性及對(duì)外源病菌和病毒抵抗力的研究范圍和深度尚需要進(jìn)一步加強(qiáng)，不同處理方式的作用效果、對(duì)不同病原菌的抵抗反應(yīng)機(jī)制等均有待深入研究。

4 結(jié) 論

飼料中添加200、600和1 000 mg/kg β-葡聚糖，不論采取連續(xù)投喂還是間隔投喂方式，除間隔投喂1 000 mg/kg組肝體比顯著低于對(duì)照組外，對(duì)黃顙魚(yú)幼魚(yú)的生長(zhǎng)性能、體成分、血清生化指標(biāo)及抗嗜水氣單胞菌感染能力均沒(méi)有顯著影響。

[1] 吳振,劉嘉,鄭剛,等.β-葡聚糖調(diào)節(jié)血糖作用及其機(jī)理的研究進(jìn)展[J].中國(guó)糧油學(xué)報(bào),2010,25(12):44-48.

[2] DALMO R A,B?OGWALD J.β-glucans as conductors of immune symphonies[J].Fish & Shellfish Immunology,2008,25(4):384-396.

[3] 曹俊明,趙紅霞,黃燕華,等.β-葡聚糖及其在水生動(dòng)物中的應(yīng)用研究[J].飼料工業(yè),2013,34(18):1-6.

[4] TSONI S V,BROWN G D.β-Glucans and dectin-1[J].Annals of the New York Academy of Sciences,2008,1143(1):45-60.

[5] VARGAS-ALBORES F,YEPIZ-PLASCENCIA G.Beta glucan binding protein and its role in shrimp immune response[J].Aquaculture,2000,191(1/2/3):13-21.

[6] BRIDLE A R,CARTER C G,MORRISON R N,et al.The effect of β-glucan administration on macrophage respiratory burst activity and Atlantic salmon,SalmosalarL.,challenged with amoebic gill disease-evidence of inherent resistance[J].Journal of Fish Diseases,2005,28(6):347-356.

[7] 遲淑艷,周歧存,周健斌,等.β-葡聚糖對(duì)奧尼羅非魚(yú)生長(zhǎng)性能及抗嗜水氣單胞菌感染的影響[J].中國(guó)水產(chǎn)科學(xué),2006,13(5):767-774.

[8] 吳春玉,曹俊明,黃燕華,等.飼料中添加β-葡聚糖對(duì)花鱸生長(zhǎng)性能、體成分、血清生化指標(biāo)和抗氨氮應(yīng)激能力的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2013,25(12):3033-3040.

[9] AI Q H,MAI K S,ZHANG L,et al.Effects of dietary β-1,3 glucan on innate immune response of large yellow croaker,Pseudosciaenacrocea[J].Fish & Shellfish Immunology,2007,22(4):394-402.

[10] 王永宏.β-葡聚糖對(duì)暗紋東方鲀非特異性免疫及生長(zhǎng)性能的影響[D].碩士學(xué)位論文.上海:華東師范大學(xué),2013.

[11] 劉棟輝,陽(yáng)會(huì)軍,劉永堅(jiān).β-葡聚糖和維生素C對(duì)斑節(jié)對(duì)蝦生長(zhǎng)和抗病力的效果[J].中山大學(xué)學(xué)報(bào):自然科學(xué)版,2002,41(4):59-62.

[12] 劉立鶴,鄭石軒,譚斌,等.不同飼料配方下β-葡聚糖對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)性能、非特異性免疫力的影響及成本分析[J].飼料工業(yè),2005,26(8):26-30.

[13] 余水法,蔡春芳,宋學(xué)宏,等.β-葡聚糖對(duì)河蟹免疫功能的影響[J].中國(guó)飼料,2006(5):20-22.

[14] 季高華,劉至治,冷向軍.飼料中添加β-葡聚糖和低聚果糖對(duì)中華鱉幼鱉生長(zhǎng)和血清SOD、溶菌酶活力的影響[J].上海水產(chǎn)大學(xué)學(xué)報(bào),2004,13(1):36-40.

[15] SANG H M,FOTEDAR R.Effects of dietary β-1,3-glucan on the growth,survival,physiological and immune response of marron,Cheraxtenuimanus(Smith,1912)[J].Fish & Shellfish Immunology,2010,28(5/6):957-960.

[16] 李富東,葉繼丹,王琨,等.β-葡聚糖對(duì)鯉魚(yú)生長(zhǎng)性能及非特異性免疫功能的影響[C]. 2008年中國(guó)水產(chǎn)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集. 北京：中國(guó)水產(chǎn)學(xué)會(huì)，2008.

[17] 周艷萍.β-葡聚糖對(duì)異育銀鯽非特異性免疫和生長(zhǎng)性能的影響[D].碩士學(xué)位論文.武漢:武漢工業(yè)學(xué)院,2008.

[18] 張遼.β-葡聚糖對(duì)齊口裂腹魚(yú)生長(zhǎng)及非特異性免疫功能的影響[D].碩士學(xué)位論.雅安：四川農(nóng)業(yè)大學(xué).

[19] 王銀東,張欣欣,吳世林.β-葡聚糖在水產(chǎn)動(dòng)物中的應(yīng)用[J].飼料博覽:技術(shù)版,2008(5):33-35.

[20] 譚北平,周歧存,鄭石軒,等.β-1,3/1,6-葡聚糖制劑對(duì)凡納對(duì)蝦生長(zhǎng)及免疫力的影響[J].高技術(shù)通訊,2004,14(5):73-77.

[21] YE J D,WANG K,LI F D,et al.Effects of long-term dietary administration of β-glucan on tissue enzyme activity and disease resistance in common carp,Cyprinuscarpio[J].The Israeli Journal of Aquaculture,2011,63:1-6.

[22] BAI N,ZHANG W B,MAI K S,et al.Effects of discontinuous administration of β-glucan and glycyrrhizin on the growth and immunity of white shrimp,Litopenaeusvannamei[J].Aquaculture,2010,306(1/2/3/4):218-224.

[23] 強(qiáng)俊,孫意嵐,黃永,等.飼料中添加幾丁聚糖對(duì)吉富羅非魚(yú)幼魚(yú)生長(zhǎng)性能、免疫調(diào)控與抗海豚鏈球菌感染的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2015,27(6):1769-1778.

[24] 覃志彪.β-葡聚糖對(duì)奧尼羅非魚(yú)生長(zhǎng)性能、機(jī)體營(yíng)養(yǎng)成分及消化酶活性的影響[D].碩士學(xué)位論文.南寧:廣西大學(xué),2012.

[25] 趙紅霞,曹俊明,黃燕華,等.飼料中長(zhǎng)期添加β-1,3-葡聚糖對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)、生化指標(biāo)和免疫功能的影響[C]. 2009年中國(guó)水產(chǎn)學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)年會(huì)論文摘要集.北京：中國(guó)水產(chǎn)學(xué)會(huì)，2009.

[26] 譚崇桂,冷向軍,李小勤,等.多糖、寡糖、蛋白酶對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)、消化酶活性及血清非特異性免疫的影響[J].上海海洋大學(xué)學(xué)報(bào),2013,22(1):93-99.

[27] 胡毅,譚北平,麥康森,等.飼料中益生菌對(duì)凡納濱對(duì)蝦生長(zhǎng)、腸道菌群及部分免疫指標(biāo)的影響[J].中國(guó)水產(chǎn)科學(xué),2008,15(2):244-251.

[28] 賀國(guó)龍,劉立鶴,樂(lè)義詳,等.酵母細(xì)胞壁免疫多糖對(duì)草魚(yú)免疫功能的影響[J].糧食與飼料工業(yè),2010(7):43-45.

[29] DAWOOD M A O,KOSHIO S,ISHIKAWA M,et al.Interaction effects of dietary supplementation of heat-killedLactobacillusplantarumand β-glucan on growth performance,digestibility and immune response of juvenile red sea bream,Pagrusmajor[J].Fish & Shellfish Immunology,2015,45(1):33-42.

[30] 周傳朋,劉波,王廣宇,等.寡糖-中草藥復(fù)合物和黃霉素對(duì)異育銀鯽生長(zhǎng)、免疫及抗病力的影響[J].淡水漁業(yè),2009(3):46-51.

[31] MISRA C K,DAS B K,MUKHERJEE S C,et al.Effect of long term administration of dietary β-glucan on immunity,growth and survival ofLabeorohitafingerlings[J].Aquaculture,2006,255(1/2/3/4):82-94.

[32] CHEN D,ANISWORTH A J.Glucan administration potentiates immune defense mechanisms of channel catfish,IctaluruspunctatusRafineque[J].Journal of Fish Diseases,1992,15(4):295-304.

[33] COUSO N,CASTRO R,MAGARINOS B,et al.Effect of oral administration of glucans on the resistance of gilthead seabream to pasteurellosis[J].Aquaculture,2003,219(1/2/3/4):99-109.

[34] 劉群芳,曹俊明,黃燕華,等.β-葡聚糖與硒、維生素E聯(lián)合添加對(duì)凡納濱對(duì)蝦組織生化指標(biāo)及免疫、抗氧化相關(guān)酶mRNA表達(dá)的影響[J].動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)學(xué)報(bào),2013,25(5):1045-1053.

[35] 陳超然,陳萱,陳昌福,等.酵母β-葡聚糖對(duì)受免異育銀鯽免疫應(yīng)答的增強(qiáng)作用[J].華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào),2003,22(4):380-384.

[36] WELLKER T L,LIM C,YILDIRIM-AKSOY M,et al.Use of diet crossover to determine the effects of β-glucan supplementation on immunity and growth of Nile Tilapia,Oreochromisniloticus[J].Journal of the World Aquaculture Society,2012,43(3):335-348.

*Corresponding author, professor, E-mail: junmcao@163.com

(責(zé)任編輯 菅景穎)

Effects of Dietary β-Glucan on Growth Performance, Serum Biochemical Indices and Resistance AgainstAeromonashydrophilaof Juvenile Yellow Catfish (Pseudobagrusfulvidraco)

LI Yongjuan1,2,3,4WANG Weimin2HUANG Yanhua1,3,4CAO Junming1,3,4*WANG Guoxia1,3,4ZHAO Hongxia1,3,4LIU Shaoyu1,3,4MA Yongping1,3,4

(1.InstituteofAnimalScience,GuangdongAcademyofAgriculturalSciences,Guangzhou510640,China;2.CollegeofFisheries,HuazhongAgriculturalUniversity,Wuhan430070,China; 3.GuangdongPublicLaboratoryofAnimalBreedingandNutrition,Guangzhou510640,China; 4.GuangdongKeyLaboratoryofAnimalBreedingandNutrition,Guangzhou510640,China)

A 42 days feeding trial was conducted to study the effects of dietary β-glucan on growth performance, serum biochemical indices and resistance againstAeromonashydrophilaof juvenile yellow catfish (Pseudobagrusfulvidraco). A basal diet was supplemented with 200, 600 and 1 000 mg/kg β-glucan to prepare three test diets. Seven hundred and twenty fish with an initial body weight of (1.53±0.04) g were selected and randomly divided into 7 groups, including feeding with basal diet as control group (G0 group), continuous feeding with diets of different levels of β-glucan (SG200, SG600 and SG1000 groups), and interval feeding with diets of different levels of β-glucan for 7 days followed by the basal diet for 7 days (IG200, IG600 and IG1000 groups). The continuous feeding groups had 4 replicates, and control group and interval feeding groups all had 3 replicates, and each replicate had 30 fish. After the feeding trail, the fish were challenged withAeromonashydrophilafor 96 h to calculate the accumulative mortality rate (AMR). The results showed as follows: 1) there were no significant differences in weight gain rate (WGR), feed conversion ratio (FCR), protein efficiency ratio (PER) and survival rate (SR) among 7 groups (P>0.05), but hepatosomatic index (HSI) in IG1000 group was significantly lower than that in control group (P<0.05). Furthermore, the fish fed diets supplemented with β-glucan showed higher WGR and PER than the control group, and continuous fed diet supplemented with β-glucan showed higher WGR than interval fed diet supplemented with the same level of β-glucan, the highest values appeared in SG600 group. 2)Compared with the control group, the contents of crude protein, ether extract and ash of whole body in the other six groups were increased to some extent and the moisture content was decreased to some extend, but no significant differences were observed (P>0.05). 3) There were no significant differences in serum biochemical indices among all groups (P>0.05). However, compared with the control group, the contents of serum globulin (GLB) and total protein (TP) in SG1000 and IG600 group were higher, but the activities of serum glutamic oxalacetic transaminase (GOT) and glutamic pyruvic transaminase (GPT) in β-glucan supplementation groups were lower. 4) AfterAeromonashydrophilainfection for 96 h, the AMR was 35% to 46% among all groups and there was no significant difference (P>0.05). In conclusion, except for HSI of interval feeding 1 000 mg/kg β-glucan is significantly decreased, supplementation of 200, 600 and 1 000 mg/kg β-glucan to diets, using either continuous or interval feeding strategies, has no significant effects on growth performance, body composition, serum biochemical indices and resistance againstAeromonashydrophilaof juvenile yellow catfish.[ChineseJournalofAnimalNutrition, 2015, 27(12)：3754-3762]

β-glucan; yellow catfish; growth performance; serum biochemical indices;Aeromonashydrophila

10.3969/j.issn.1006-267x.2015.12.014

2015-06-24

廣東省海洋漁業(yè)科技推廣專項(xiàng)(A201301F01)；廣東省自然科學(xué)基金團(tuán)隊(duì)項(xiàng)目(10351064001000000)

李永娟(1989—)，女，河北石家莊人，碩士研究生，從事水產(chǎn)動(dòng)物營(yíng)養(yǎng)與飼料的研究。E-mail: 715877473@qq.com

*通信作者：曹俊明，研究員，博士生導(dǎo)師，E-mail: junmcao@163.com

S963

A

1006-267X(2015)12-3754-09