卜曉紅

·臨床醫(yī)學(xué)·

胃腸間質(zhì)瘤基因突變與免疫組化表達(dá)的關(guān)系研究

卜曉紅

目的 研究胃腸間質(zhì)瘤(GISTs)基因突變與免疫組化表達(dá)的關(guān)系。方法 分別對(duì)102例GISTs患者(GISTs組)及50例非GISTs間葉源性腫瘤患者(非GISTs組)的DOG1及CD117表達(dá)進(jìn)行比較,檢測(cè)GISTs組IGFIR表達(dá)情況, 同時(shí)檢測(cè)90例GISTs患者c-KIT及PDGFRA基因突變情況。結(jié)果 102例GISTs患者中DOG1陽(yáng)性表達(dá)率為91.18%(93/102)、CD117為93.14%(95/102)、IGFIR為6.86%(7/102), 50例非GISTs間葉源性腫瘤中DOG1陽(yáng)性表達(dá)率為10.00%(5/50), CD117為18.00%(9/50), 兩組DOG1及CD117陽(yáng)性率比較差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。結(jié)論 檢測(cè)DOG1及CD117可實(shí)現(xiàn)對(duì)胃腸間質(zhì)瘤基因突變的有效診斷, 而IGFIR考慮為野生型GISTs特異性的免疫組化指標(biāo)以及潛在治療靶點(diǎn), 應(yīng)結(jié)合免疫組化表達(dá)情況對(duì)GISTs基因突變進(jìn)行分析。

胃腸間質(zhì)瘤；基因突變；免疫組化

GISTs為臨床常見(jiàn)胃腸道間葉組織來(lái)源腫瘤, 在胃、小腸等消化道部位均可發(fā)生, 晚期還可發(fā)生轉(zhuǎn)移, 主要分為上皮細(xì)胞型、梭形細(xì)胞型以及混合型, 目前其診斷主要通過(guò)組織形態(tài)學(xué)結(jié)合免疫組化檢測(cè)結(jié)果［1］。本次研究旨在初步分析GISTs基因突變與免疫組化表達(dá)的關(guān)系, 現(xiàn)將結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取本院2011年8月～2014年11月102例GISTs患者(GISTs組)為研究對(duì)象, 其中男61例, 女41例,年齡22～81歲, 平均年齡(48.26±4.85)歲, 腫瘤大小3.0 mm～28.5 cm, 平均大小(5.26±1.74)cm；病灶處于胃中51例, 小腸23例, 直腸13例, 結(jié)腸5例, 其他10例；梭形72例, 混合型25例, 上皮型5例；GISTs危險(xiǎn)度可分為極低危險(xiǎn)度6例、低危險(xiǎn)度38例、中危險(xiǎn)度25例、高危險(xiǎn)度33例。另選50例非GISTs間葉源性腫瘤患者(非GISTs組)。兩組患者一般資料比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05), 具有可比性。

1.2 方法

1.2.1 CD117、IGFIR及DOG1免疫組化檢測(cè) 50例非GISTs間葉源性腫瘤患者僅檢測(cè)DOG1及CD117。免疫組化CD117、IGFIR及DOG1試劑均購(gòu)自英國(guó)Abcam公司, 常規(guī)脫蠟、水化處理, 一、二抗孵育, DAB顯色后蘇木素復(fù)染, 脫水透明后封片, 借助光學(xué)顯微鏡對(duì)結(jié)果進(jìn)行觀察。將PBS作為陰性對(duì)照, DOG1、CD117主要定位于細(xì)胞質(zhì), 在細(xì)胞膜中表達(dá)較少, IGFIR則以胞膜表達(dá)為主, 于顯微鏡下觀察的切片染色情況,根據(jù)顏色計(jì)分, 1分：淡黃；2分：淺褐；3分：深褐；同時(shí)結(jié)合陽(yáng)性范圍, 即1分：0～25%；2分：26%～50%；3分：51%～75%；4分：76%～100%。上述分?jǐn)?shù)相加如為0分則為陰性, 2～3分為+, 4～5分為++, 6～7分為+++。

1.2.2 基因突變檢測(cè) 通過(guò)美國(guó)西格諾公司提供的MassARRAY DNA質(zhì)譜陣列基因分析系統(tǒng)對(duì)90例GISTs患者基因突變情況(C-KIT、PDGFRA)進(jìn)行檢測(cè)。

1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)研究數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。計(jì)量資料以均數(shù) ± 標(biāo)準(zhǔn)差( x-±s)表示, 采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05表示差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組DOG1、CD117陽(yáng)性表達(dá)率比較 GISTs組DOG1、CD117陽(yáng)性表達(dá)率顯著高于非GISTs組, 對(duì)比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見(jiàn)表1。

表1 兩組DOG1、CD117陽(yáng)性率比較(%)

2.2 c-KIT、PDGFRA基因突變分析 90例GISTs患者c-KIT基因突變率65.56%(59/90), PDGFRA基因突變率為24.44% (22/90), 另外有12例非c-KIT、PDGFRA基因突變, 即野生GISTs, 9例IGFIR免疫組化呈陽(yáng)性。

3 討論

GISTs是最常見(jiàn)的胃腸道間葉源性腫瘤, 多見(jiàn)于胃及小腸發(fā)病, 發(fā)病年齡多為55～65歲［2］。CD117為c-KIT基因蛋白表達(dá)產(chǎn)物, 是受體酪氨酸酶家族成員, 在83%～95%的GISTs中表達(dá), 是GISTs特異性診斷指標(biāo), 但仍有5%左右患者呈陰性表達(dá), 因此其診斷難度較大［3］。而DOG1在與CD117保持類(lèi)似敏感度的前提下特異性甚至更高, 本次研究中DOG1陽(yáng)性率為91.18%, 低于CD117的93.14%, 兩者診斷陽(yáng)性率均顯著高于非GISTs組(P＜0.05), 表示聯(lián)合CD117、DOG1診斷可提高陽(yáng)性率。同時(shí)本研究9例IGFIR陽(yáng)性均為野生型GISTs,表示IGFIR可作為野生型GISTs特異性篩查指標(biāo)。

本次研究c-KIT、PDGFRA基因突變率分別為65.56%、24.44%, 與相關(guān)研究比較偏低, 考慮可能受檢測(cè)方式及樣本量的影響。有研究顯示不同腫瘤發(fā)生部位對(duì)c-KIT、PDGFRA基因突變率有較大影響, 以胃部突變率最高［4,5］,對(duì)此考慮可將腫瘤原發(fā)部位與基因突變的檢測(cè)結(jié)果聯(lián)合, 從而實(shí)現(xiàn)對(duì)GISTs患者治療效果的綜合評(píng)判。

綜上所述, DOG1、CD117聯(lián)合檢測(cè)可提高GISTs準(zhǔn)確性,而IGFIR可作為野生型GISTs特異性篩查指標(biāo), 應(yīng)結(jié)合免疫組化表達(dá)情況對(duì)GISTs基因突變進(jìn)行分析。

［1］ 秦嶺, 李榮, 張軍一, 等.胃腸間質(zhì)瘤相關(guān)基因表達(dá)及突變的研究.臨床腫瘤學(xué)雜志, 2012, 17(10):874-879.

［2］ 劉泳冬, 趙薇薇, 陳慧娟, 等.重視標(biāo)本固定以提高胃腸間質(zhì)瘤的診斷質(zhì)量.中華胃腸外科雜志, 2012, 15(3):234-235.

［3］ 王原原, 溫冰.胃腸間質(zhì)瘤的治療進(jìn)展.臨床消化病雜志, 2012, 24(1):53-55.

［4］ 祁義軍, 孟翔凌, 趙文娣, 等.胃腸間質(zhì)瘤161例臨床病理特征和預(yù)后相關(guān)因素分析.安徽醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào), 2012, 47(8):963-965.

［5］ 潘獻(xiàn)柱, 吳強(qiáng).胃腸間質(zhì)瘤組織中MMP-14與CD147的表達(dá)及其意義.診斷病理學(xué)雜志, 2013, 20(7):401-403.

10.14163/j.cnki.11-5547/r.2015.31.015

2015-04-29］

466000 周口市中心醫(yī)院病理科