摘要：心肌梗死是心血管疾病導(dǎo)致死亡的最主要原因之一。miRNA是一類非編碼小分子RNA。研究證實，發(fā)生急性心肌梗死后miRNA表達異常，通過轉(zhuǎn)錄后水平參與MI及其并發(fā)癥的病理生理過程，有望成為急性心肌梗死新的生化標(biāo)志物和治療靶點。在下文中，我們首先對急性心肌梗死的發(fā)病機制進行了簡要闡述，然后對miRNA和急性心肌梗死的相關(guān)性進行全面論述。

關(guān)鍵詞：miRNA；急性心肌梗死；研究

在心內(nèi)科的臨床診療中，急性心肌梗死是一種發(fā)病迅速的急癥，而且病死率極高，所以是重點研究的課題之一。miRNA是一類非編碼小分子RNA，穩(wěn)定存在于人體各種體液中。近年研究發(fā)現(xiàn)，miRNA通過調(diào)控轉(zhuǎn)錄后水平參與急性心肌梗死及其并發(fā)癥的各種病理生理過程。

1急性心肌梗死概述

臨床醫(yī)學(xué)研究已經(jīng)表明，急性心肌梗死的發(fā)病機制是因為冠脈的血液供應(yīng)急劇下降，甚至中斷而引起的缺血性的心肌疾病。一旦發(fā)病，患者就有可能表現(xiàn)為胸骨后心前區(qū)出現(xiàn)劇痛感，焦躁不安，甚至有瀕臨死亡的感覺。如果病情較重，還會發(fā)生心力衰竭或者休克。

目前，急性心肌梗死在臨床診斷中使用最多的方法就是根據(jù)患者的臨床表現(xiàn)和體征、心電圖顯示規(guī)律、血清酶指標(biāo)異常等作為確診的根據(jù)[1]。但是這些方法因為缺乏時效性，所以在近幾年來的臨床診斷中受到一定的限制，更多的是利用血清因子的檢測指標(biāo)作為確診的依據(jù)，所以出現(xiàn)了很多血液檢測指標(biāo)與急性心肌梗死相關(guān)性的研究報道，其中miRNA就是其中重點的研究內(nèi)容之一。

有研究認為，肌鈣蛋白T和CK-MB是目前使用最廣泛的，且用于反映心肌損傷的標(biāo)志物，它們的濃度高低和急性心肌梗死的損傷面積具有密切關(guān)聯(lián)，可作為判斷心肌梗死范圍的初步根據(jù)。但是CK-MB對比較輕微的心肌損傷缺乏足夠的敏感性，所以可以利用miRNA的實時定量PCR檢測來對這些比較微小的損傷進行診斷，因為它在心肌損傷后的miRNA表達能夠?qū)⒆钗⑿〉男募p傷都表達出來，具有極高的敏感性。

2 miRNA在急性心肌梗死患者中的表達規(guī)律

通過分析小鼠及人類不同組織中miRNA的種類及含量發(fā)現(xiàn)，miRNA-1、miRNA-133主要表達于骨骼肌和心肌組織，其中骨骼肌中的含量明顯高于心肌組織3～4倍；miRNA-499主要表達于心肌組織，骨骼肌中僅極少量表達，其位于MYH7基因上，調(diào)控肌球蛋白重鏈的表達；miRAN-208高度且僅表達于心肌組織，共同調(diào)控肌球蛋白重鏈基因的表達。通過比較心肌梗死小鼠模型與心肌梗死合并骨骼肌損傷小鼠模型發(fā)現(xiàn)，miRNA-1、miRNA-133、miRNA-499在心肌梗死合并骨骼肌損傷組中的含量較僅有心肌梗死組明顯升高[13]，而miRNA-208在上述兩組中無明顯差異，提示miRNA-208對于心肌梗死診斷的特異性更強。

這是因為，miRNA在循環(huán)血中的含量與心肌受損的情況具有密切聯(lián)系，當(dāng)急性心肌梗死發(fā)作時，患者的心肌就會在很短的時間內(nèi)受到明顯的損傷[3]。心肌細胞因為遭到破壞，會大量釋放入血物質(zhì)，而miRNA就是已壞死心肌釋放入血物質(zhì)的重要指標(biāo)，所以miRNA-499、miRNA-208和miRNA-214都可以作為診斷心肌梗死的重要指標(biāo)。與此同時，miRNA-21則對預(yù)防心肌的損傷具有重要作用，因為它可以對程序性的細胞死亡因子進行有效調(diào)整。另外，微球蛋白中的α1-MG和β2-MG都是表述人體血管狀態(tài)的重要指標(biāo)。當(dāng)急性心肌梗死發(fā)作時，不僅心肌會有比較突出的異常反應(yīng)，血管也會因為受到損傷而呈現(xiàn)出異常狀態(tài)，所以具有較高的臨床診斷價值。

Corsten等人[4]收集了32例發(fā)病12h內(nèi)的STEMI及36例有典型胸痛但冠脈造影正常的血標(biāo)本，通過RT-PCR技術(shù)測定miRNA濃度發(fā)現(xiàn)，急性心肌梗死組miR-1較冠脈正常胸痛組升高3倍，P<0.12，miR-133a升高4倍，P<0.05，miR-499升高100倍，P<0.0005，而208b升高最明顯，可達1600，P<0.005。Olof等[14]通過觀察424例臨床上高度懷疑ACS患者發(fā)現(xiàn)，最后確診急性心肌梗死的患者中，心臟高度、特異性表達的miRNAs血漿濃度均普遍升高，其中以miRNA-208最為明顯，發(fā)病12h內(nèi)可升高3000倍，P<0.001，且與LVEF、30d內(nèi)死亡率及心衰發(fā)生率相關(guān)[14]，而miRNA-208a在STE急性心肌梗死組中較正常對照組也明顯升高至少215倍，P<0.05[15]。

D'Alessandra等[2]也做了相關(guān)的動物研究，他們通過結(jié)扎C57BL/6雌鼠的冠狀動脈構(gòu)建心肌梗死模型，并于結(jié)扎冠脈導(dǎo)致心肌梗死后的15 min至第5d內(nèi)采集不同時間窗血標(biāo)本，測定血漿中miRNA及肌鈣蛋白的濃度，發(fā)現(xiàn)心肌梗死后miRNA-1、miRNA-133、miRNA-499、miR-208不同程度升高，其中以miR-208升高最為明顯，且于心梗發(fā)生后30min即開始明顯升高。同時Wang[13]也做了類似研究，于小鼠冠脈結(jié)扎后1，3，6，12和24 h采集血標(biāo)本，發(fā)現(xiàn)miR-1、miR-133a、miR-499在冠脈結(jié)扎后1～3 h開始升高，3～12 h基本達到高峰，12～24 h開始逐漸下降。而miR-208a于冠脈結(jié)扎后1 h即開始升高，3 h達高峰，6～12 h開始下降，24 h后基本無法檢測。同時通過觀察臨床上66例急性心肌梗死患者發(fā)現(xiàn)，miR-208b用于急性心肌梗死早期診斷的敏感性達90.9%，4h內(nèi)診斷急性心肌梗死特異性幾乎達100%。

然而，也有少數(shù)小樣本研究得出相反的結(jié)論，miRNA-208b即使在急性心肌梗死組中表達水平也是極低的[2，17]，D'Alessandra等[2]發(fā)現(xiàn)9個STEMI患者中有3個患者，其miR-208a的表達水平很低，甚至Callis等[16]發(fā)現(xiàn)，miRNA-208a在急性心肌梗死小鼠中表達明顯升高，但在急性心肌梗死患者中無法檢出，這可能是人類和鼠類心肌中miRNA-208a表達模式不同所致。此外，Li等[7]還發(fā)現(xiàn)，穩(wěn)定型心絞痛組miRNA-208較急性心肌梗死組升高。

同時，雖然心臟高度和/或特異性表達的這些miRNA不同程度的與CK-MB、cTnI、cTnT、梗死面積大小及微血管阻塞程度呈正相關(guān)，miR-133a在心功能不全的患者中NT-proBNP濃度相關(guān)，P<0.001，miR-208b和miR-499在病毒性心肌炎的患者中也可以不同程度升高，P<0.01[4]。

3 miRNA與急性心肌梗死后并發(fā)癥的關(guān)系

3.1 miRNA與心律失常的關(guān)系 心肌細胞跨膜離子通道電流紊亂是心律失常發(fā)生的基礎(chǔ)，心肌梗死可引起細胞膜離子功能異常，心律失常發(fā)生率幾乎達100%，是心肌梗死主要的并發(fā)癥。

3.1.1 miRNA-1促進心律失常 研究發(fā)現(xiàn)，心肌缺血的患者及大鼠miRNA-1較正常心肌高2倍以上，利用反義寡核苷酸下調(diào)miRNA-1，可減少心律失常的發(fā)生；反之，外源性增加miRNA-1，可促進心律失常[5]。當(dāng)miRNA-1表達上調(diào)時，可靶向負性調(diào)節(jié)編碼connexin43蛋白的相關(guān)基因GJA1和編碼Kir2.1通道的相關(guān)基因KCNJ2，使connexin43蛋白和Kir2.1蛋白表達下降，從而減慢心臟傳導(dǎo)、改變細胞膜電位，促進心律失常發(fā)生。此外，miRNA-1上調(diào)還可增加鈣電流，促進肌漿網(wǎng)鈣離子釋放，細胞內(nèi)鈣穩(wěn)態(tài)環(huán)境破壞，引起細胞膜電位震蕩，促進心律失常發(fā)生[6]。

3.1.2 miRNA-21、miRNA-133a抑制心肌IRI miRNA-21心肌發(fā)生IRI時，miRNA-21表達上調(diào)，體外培養(yǎng)的心肌纖維細胞抑制miRNA-21表達可促進PTEN的表達，反之亦然[7]。進一步研究發(fā)現(xiàn)，miRNA-21可直接與PTEN的3`UTR結(jié)合，抑制該磷酸酶的活性[8]，導(dǎo)致MMP-2（在心肌IRI時可促進心肌細胞功能的失調(diào)）表達上調(diào)，進而導(dǎo)致心肌IRI的發(fā)生。而miRNA-21在心肌梗死區(qū)下調(diào)，在梗死邊緣區(qū)上調(diào)，故認為心肌IRI時，miRNA-21表達上調(diào)是再灌注的結(jié)果而不是缺血所導(dǎo)致。

3.1.3 miRNA-1、miRNA-29、miRNA-320促進心肌IRI miRNA-1 STEMI組在心肌發(fā)生缺血預(yù)處理和缺血后處理時miRNA-1表達上調(diào)[9]；心肌IRI的小鼠模型，miRNA-1表達也上調(diào)。在IRI小鼠模型中，利用反義寡核苷酸抑制miRNA-1的表達可減少心肌細胞的凋亡數(shù)；而過度表達miRNA-1可不同程度地降低心肌細胞在H2O2中的存活能力，進一步研究發(fā)現(xiàn)，miRNA-1通過靶向負性調(diào)節(jié)抗凋亡因子Bcl-2而發(fā)揮作用[10～14]。

miRNA-29心肌發(fā)生IRI的小鼠模型，當(dāng)抑制miRNA-29a和miRNA-29c表達時，心肌梗死面積和細胞凋亡數(shù)可下降，同時促凋亡基因Bax表達減少，而抗凋亡基因Mcl-1表達增加。其機制是miRNA-29a和miRNA-29c通過抑制抗凋亡基因及促進促凋亡基因的表達，最終促進心肌細胞凋亡[15]。

4結(jié)論

通過miRNA與急性心肌梗死的相關(guān)性研究分析，其結(jié)果顯示，急性心肌梗死和健康人員比較會呈現(xiàn)出異常的狀態(tài)，而且對其相關(guān)性的研究進一步顯示出上述指標(biāo)與疾病的密切相關(guān)性。為此，我們可以借助miRNA摹擬和拮抗技術(shù)，深入研究miRNA在急性心肌梗死及其并發(fā)癥中的作用機制，將為miRNA作為急性心肌梗死新的治療靶點提供依據(jù)，指導(dǎo)臨床早期干預(yù)，控制病情惡化。

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編輯/王海靜