摘要：目的 探討單純的膽紅素溶液在日立7180全自動(dòng)生化分析儀上對(duì)果糖胺測(cè)定的影響。方法 用實(shí)驗(yàn)制品膽紅素溶液，取健康體檢者200例采血作為標(biāo)本，按黃疸診斷標(biāo)準(zhǔn)加入膽紅素溶液，反復(fù)比對(duì)使膽紅素溶液濃度分別達(dá)到或接近預(yù)先設(shè)定好的濃度，分為隱性黃疸組、輕度黃疸組、中度黃疸組、重度黃疸組四組；用礬酸鹽反應(yīng)法和果糖胺法分別測(cè)定膽紅素和果糖胺。結(jié)果 中度黃疸組和重度黃疸組加入膽紅素溶液的標(biāo)本果糖胺檢測(cè)數(shù)據(jù)較未加入膽紅素溶液的檢測(cè)數(shù)據(jù)在中有顯著差異。結(jié)論 膽紅素溶液可對(duì)果糖胺的測(cè)定造成一定影響，膽紅素濃度越高影響越顯著，中高濃度膽紅素可致果糖胺水平誤差；在篩查、診斷、鑒別與果糖胺有關(guān)疾病時(shí)，應(yīng)考慮患者是否合并有可致高濃度膽紅素疾病如黃疸、高膽紅素血癥。

關(guān)鍵詞：膽紅素；果糖胺；測(cè)定；影響

果糖胺（FRUC）又稱(chēng)糖化血清蛋白（GSP）它是葡萄糖在血液中與白蛋白發(fā)生緩慢且不可逆的非酶促反應(yīng)形成的糖基化蛋白。這種蛋白的組成是由白蛋白肽鏈189位賴(lài)氨酸與葡萄糖結(jié)合形成相對(duì)穩(wěn)定的高分子酮胺結(jié)構(gòu)，這種結(jié)構(gòu)中的葡萄糖只有在白蛋白降解后才得以釋放，且糖基化蛋白的合成速率與血糖的濃度成正比。故可通過(guò)檢測(cè)血清的糖基化蛋白的水平來(lái)反映患者前2～3w的血糖水平。果糖胺檢測(cè)已在國(guó)內(nèi)外醫(yī)院廣泛用于對(duì)患者血糖的監(jiān)控，但由于目前的生化檢測(cè)方法和儀器的技術(shù)層面上的問(wèn)題仍存在一定的局限性，致使生化的大部分項(xiàng)目在遇到溶血、脂血、黃疸等異常標(biāo)本時(shí)，儀器不能自動(dòng)排除干擾而導(dǎo)致生化大部分的項(xiàng)目失準(zhǔn)[1]。本文主要探討單純性的膽紅素溶液能否對(duì)果糖胺測(cè)定造成影響。意在明確在黃疸血清條件下測(cè)定的果糖胺結(jié)果是否會(huì)受到膽紅素的干擾而失準(zhǔn)。

1資料與方法

1.1一般材料 選擇2013年5月～6月在我院體檢的健康成年人200例，其中男132例、女68例，年齡18～55歲，平均（43.2±4.9）歲。納入標(biāo)準(zhǔn)：①所選體檢者均要求各項(xiàng)指標(biāo)基本正常，無(wú)服用藥物史、無(wú)肝、腎及胰腺功能異常，無(wú)糖尿病、高血脂及其他內(nèi)分泌疾病病史；②采用統(tǒng)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)，相同質(zhì)控管理采樣。

1.2方法

1.2.1檢測(cè)指標(biāo) 依照人民衛(wèi)生部出版的第七版《診斷學(xué)》制定內(nèi)容?？偰懠t素（TBIL）在17.1～34.2umol/L為隱性或生理性黃疸，TBIL在34.2～171umol/L為輕度黃疸。TBIL在171～342umol/L為中度黃疸，TBIL在大于342umol/L為重度黃疸。

1.2.2檢測(cè)方法

1.2.2.1所選體檢者均在清晨空腹抽取靜脈血3～4ml。不加抗凝劑，離心分離血清；-20℃冰箱保存，待標(biāo)本收集完畢后。使用儀器為日立7180全自動(dòng)生化分析儀對(duì)這200例血清標(biāo)本進(jìn)行果糖胺測(cè)定。果糖胺試劑盒選擇北京九強(qiáng)公司產(chǎn)品，檢驗(yàn)操作嚴(yán)格按照廠家提供的說(shuō)明書(shū)及檢驗(yàn)科生化室制定的SOP文件執(zhí)行。

1.2.2.2將200份血清以50份為一組，分別加入一定比例的膽紅素溶液，使這四組標(biāo)本分別按照衛(wèi)生部對(duì)黃疸程度制定的標(biāo)準(zhǔn)來(lái)配制成隱性黃疸組、輕度黃疸組、中度黃疸組、重度黃疸組。測(cè)定并驗(yàn)證各組膽紅素濃度是否在標(biāo)準(zhǔn)中的范圍，按要求加入不同濃度的膽紅素溶液后再次測(cè)定各組中所有血清果糖胺的數(shù)據(jù)，收集并統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理 對(duì)每組的每一份標(biāo)本在加入膽紅素溶液前后各測(cè)定一次果糖胺數(shù)據(jù)，對(duì)比隱性黃疸、輕度黃疸組、中度黃疸組、重度黃疸組各組在加入膽紅素前后數(shù)據(jù)的差異。相關(guān)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)均以x±s表述。各組間前后兩組數(shù)據(jù)比較均用t檢驗(yàn)。

2結(jié)果

各組血清標(biāo)本在加入膽紅素溶液前后分別測(cè)定的果糖胺結(jié)果比較顯示。隱性黃疸和輕度黃疸組FRUC，P>0.05無(wú)顯著性的差異，其余的中度黃疸和重度黃疸組的FRUC前后結(jié)果對(duì)比顯示，均為P<0.05結(jié)果有顯著性差異。見(jiàn)表1。

3討論

果糖胺是血漿蛋白質(zhì)在葡萄糖非酶糖化過(guò)程中的產(chǎn)物，可較好的反應(yīng)1～3w內(nèi)人體血糖水平，一定程度上彌補(bǔ)了糖化血紅蛋白不能反映較短期內(nèi)血糖濃度，是評(píng)價(jià)糖尿病短期控制效果的可靠指標(biāo)，適用于血糖波動(dòng)較大的脆性糖尿病、妊娠糖尿病診斷 [3]。近年來(lái)，果糖胺測(cè)定由化學(xué)法逐漸轉(zhuǎn)為全自動(dòng)生化分析儀分析，受限于儀器測(cè)量原理，果糖胺測(cè)定結(jié)果易受溶血、脂血、黃疸影響，測(cè)量精準(zhǔn)度顯著下降，影響疾病的診斷與療效評(píng)估。

本次實(shí)驗(yàn)是利用添加單純性的膽紅素溶液來(lái)干擾正常血清的果糖胺的測(cè)定，其目的是觀察模擬血標(biāo)本在不同程度的黃疸影響條件下，其果糖胺的測(cè)定是否會(huì)受到膽紅素的干擾[4]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明低濃度的膽紅素對(duì)果糖胺測(cè)定的結(jié)果影響不大，但隨著膽紅素濃度的不斷加大，膽紅素濃度達(dá)到一定程度時(shí)，便可干擾到果糖胺的測(cè)定結(jié)果，導(dǎo)致果糖胺的測(cè)定結(jié)果失準(zhǔn)。其原因在于目前我們所使用的日立7180全自動(dòng)生化分析儀在對(duì)物質(zhì)反應(yīng)結(jié)果的識(shí)讀時(shí)均需要通過(guò)比色來(lái)分辨。對(duì)于低濃度膽紅素的干擾而言，儀器可通過(guò)樣本空白或兩點(diǎn)的比色法連續(xù)監(jiān)測(cè)在一定程度上消除了膽紅素對(duì)測(cè)定結(jié)果的干擾。而高濃度的膽紅素（即黃疸）血清較大程度的改變了反應(yīng)杯中反應(yīng)混合物的色度，影響了儀器光電部分的敏感性。膽紅素濃度越大，色素越深，則儀器的光電部分的敏感性就越低。也正因如此，許多生化項(xiàng)目的測(cè)定會(huì)在光度的非反應(yīng)性變化的干擾下而失準(zhǔn)[1，2]。由此可見(jiàn)，隨著濃度的增大，其干擾果糖胺測(cè)定的程度也越大。

綜上所述：醫(yī)院若有測(cè)定果糖胺需要，需綜合考慮干擾因素，特別是針對(duì)伴有黃疸等臨床表現(xiàn)，膽紅素水平較高者，應(yīng)提高警惕，必要時(shí)轉(zhuǎn)人工化學(xué)法測(cè)量，以提高測(cè)量精度[5]。

參考文獻(xiàn)：

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[5]朱筠，許慧，熊祝嘉，等.四氮唑藍(lán)法檢測(cè)果糖胺的分析性能評(píng)價(jià)[J].現(xiàn)代醫(yī)學(xué)，2014，42（5）：522-524.

編輯/王海靜