摘要:目的 探討乙肝兩對(duì)半模式與乙肝病毒DNA定量的相關(guān)性,為臨床治療乙肝提供參考和借鑒。方法 對(duì)我院2012年1月~2014年6月收治的320例乙肝患者的血清標(biāo)本進(jìn)行乙肝兩對(duì)半及乙肝病毒核酸擴(kuò)增酶聯(lián)定量檢測(cè),對(duì)乙肝兩對(duì)半不同模式及乙肝病毒DNA之間的關(guān)系進(jìn)行分析和探討。結(jié)果 265例患者血清HBV DNA呈陽性,陽性率為82.81%;小二陽72例,其中54例HBV DNA呈陽性,陽性率為75%;小三陽138例,其中120例HBV DNA呈陽性,占86.96%;大三陽110例,其中91例HBV DNA呈陽性,占82.72%。大三陽樣本含量超過107例數(shù)超過小二陽及小三陽病例。結(jié)論 乙肝兩對(duì)半是基層醫(yī)療檢驗(yàn)項(xiàng)目,其不足之處在于無法充分反映乙肝患者的病情狀況,HBeAg與HBV-DNA拷貝數(shù)呈正相關(guān)性,HBV-DNA檢測(cè)可判斷乙肝患者是否存在傳染性,為制定合理治療方案提供了依據(jù)。
關(guān)鍵詞:乙肝兩對(duì)半;乙肝病毒DNA;相關(guān)性
乙肝兩對(duì)半檢測(cè)是目前乙肝診斷最常用的指標(biāo),主要反映人體的乙肝病毒的免疫反應(yīng)能力及狀態(tài),其不足之處在于無法充分反映乙肝患者病毒傳染及復(fù)制情況[1]。兩對(duì)半在理論上有23=32種組合模式,多項(xiàng)臨床研究表明,HBV-DNA的檢測(cè)是衡量乙肝傳染性最精確的指標(biāo),同時(shí)是確定HBV感染不同復(fù)制狀態(tài)的檢測(cè)手段。臨床實(shí)踐表明,HBV-DNA陽性反應(yīng)具有完整的病毒顆粒復(fù)制,為臨床治療乙型病毒肝炎具有重要意義[2]。為探究乙肝兩對(duì)半模式與乙肝病毒DNA定量的相關(guān)性,我院對(duì)320例乙肝患者的血清標(biāo)本進(jìn)行乙肝兩對(duì)半及乙肝病毒核酸擴(kuò)增酶聯(lián)定量檢測(cè),現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。
1 資料與方法
1.1一般資料 選取我院2012年1月~2014年6月收治的320例乙肝患者的血清標(biāo)本作為研究對(duì)象,排除合并有嚴(yán)重心腦血管疾病患者、精神病遺傳史或家族史患者、溝通障礙患者等。其中男性190例,女性130例;年齡為28~68歲,平均年齡為(38.6±1.5)歲。患者均對(duì)本研究知情并簽署知情同意書。
1.2方法 清晨空腹采集兩管3ml靜脈血,采用上海榮盛生物技術(shù)有限公司提供的乙肝兩對(duì)半試劑盒及雷杜6100酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀及洗機(jī)板,所有操作均按照說明說逐步進(jìn)行。采用德國凱捷公司提供的乙肝病毒核酸擴(kuò)增酶聯(lián)定量檢測(cè)試劑盒及達(dá)安7600型PCR儀檢測(cè)儀。實(shí)驗(yàn)室設(shè)備及操作均嚴(yán)格按照衛(wèi)生部頒發(fā)的實(shí)驗(yàn)室工作規(guī)范要求進(jìn)行,按照試劑盒操作方法提取HBV-DNA,將提取標(biāo)本放置在DA7600PCR儀中進(jìn)行擴(kuò)增,共做41個(gè)循環(huán)。用450nm酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀對(duì)樣品的OD值進(jìn)行檢測(cè),設(shè)定陰性O(shè)D值大于0.1,陽性O(shè)D值小于1.0,樣品OD值大于陰性O(shè)D值的2.5倍則可判定為HBV-DNA陽性[3]。
2 結(jié)果
2.1檢測(cè)結(jié)果顯示HBV血清學(xué)標(biāo)志物陽性模式中,均存在不同程度的病毒DNA復(fù)制,全部患者中265例HBV DNA呈陽性,陽性率為82.81%。小二陽72例,其中54例HBV DNA呈陽性,陽性率為75%;小三陽138例,其中120例HBV DNA呈陽性,占86.96%;大三陽110例,其中91例HBV DNA呈陽性,占82.72%。見表1。
2.2在265例HBV DNA陽性檢測(cè)結(jié)果中,小二陽模式一半樣本含量低于103,35%的樣本含量為103~105之間,15%的樣本含量超過107。小三陽模式中,43.3%的樣本含量低于103,50.2%的樣本含量為103~105之間,6.5%的樣本含量超過107。大三陽檢測(cè)結(jié)果為13.2%樣本含量低于103,61.1%的樣本含量為103~105之間,25.7%的樣本含量超過107。
3 討論
乙肝兩對(duì)半是國內(nèi)醫(yī)院常見的乙肝病毒感染檢測(cè)標(biāo)志物,乙型肝炎病毒免疫學(xué)標(biāo)記共有表面抗原和表面抗體、e抗原和e抗體、核心抗原和核心抗體三對(duì)[4]。表面抗原是已感染病毒的標(biāo)志,無法對(duì)病毒有無復(fù)制、傳染性強(qiáng)弱及復(fù)制程度等進(jìn)行反映;表面抗體是中和性抗體標(biāo)志,同時(shí)是是否有抵抗力及是否康復(fù)的主要標(biāo)志;e抗原為病毒復(fù)制標(biāo)志,持續(xù)陽性三個(gè)月則有慢性化傾向;e抗體是病毒復(fù)制停止的標(biāo)志,標(biāo)志著病毒復(fù)制減少,傳染性較弱;核心抗體是曾經(jīng)感染或正在感染都可出現(xiàn)的標(biāo)志。乙肝兩對(duì)半又被稱為乙肝五項(xiàng),其檢查意義在于探究乙肝感染的具體情況。
乙肝病毒DNA是判斷乙肝病毒有無復(fù)制的黃金指標(biāo),其主要用來判斷體內(nèi)乙肝病毒含量的多少及傳染程度,HBV-DAN含量越高則表示病毒復(fù)制能力越強(qiáng),傳染性越強(qiáng)。
本組研究中,大三陽模式HBV-DNA陽性率均高于小二陽及小三陽模式,與前人的文獻(xiàn)報(bào)道一致[5]。但是部分HBeAg陽性患者仍存在HBV-DNA為陰性的情況,可能與HBV-DNA的消失比HBeAg消失早或病毒發(fā)生變異。小三陽、小二陽HBV-DNA陽性率雖低于大三陽,但仍存在HBV-DNA陽性,提示病毒并未停止復(fù)制,只是再一定程度上減緩了復(fù)制速度。這種突變?cè)跇O大程度上造成了HBeAg的分泌,但不影響病毒本身的復(fù)制,引起HBeAg陰性的乙肝病毒感染。在HBeAg為陰性的模式中,部分樣本HBV-DNA的含量超過107,符合病毒基因組發(fā)生突變時(shí),可出現(xiàn)HBeAg陰性的情況,但是HBV-DNA濃度較高,可見,血液循環(huán)中HBV-DNA與HBeAg具有相關(guān)性。從本組研究數(shù)據(jù)可知,HBeAg陽性組HBV-DNA拷貝數(shù)值高于HBeAg陰性組,提示HBeAg陽性患者體內(nèi)乙肝病毒復(fù)制比較活躍,傳染性較強(qiáng),同時(shí)說明HBeAg是HBV病毒復(fù)制活躍的重要標(biāo)志。HBeAg陽性標(biāo)本通常存在較高濃度的HBV-DNA,HBeAg陰性組HBV-DNA濃度通常較低,可見HBeAg與HBV-DNA拷貝數(shù)呈正相關(guān)性。
綜上所述,乙肝兩對(duì)半是基層醫(yī)療機(jī)構(gòu)檢驗(yàn)項(xiàng)目,但是無法充分反映乙肝患者的病情狀況,HBV-DNA檢測(cè)可判斷乙肝患者是否存在傳染性,HBeAg與HBV-DNA拷貝數(shù)呈正相關(guān)性,為制定合理治療方案提供了依據(jù)。公共場(chǎng)所服務(wù)的乙肝攜帶者可定期進(jìn)行HBV-DNA檢測(cè),以確定其是否存在感染性,從而抑制乙肝病毒的傳染。
參考文獻(xiàn):
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編輯/王海靜