摘 要：黃芪桂枝五物湯噴干粉中黃芪甲苷的含量對(duì)藥性和藥效有重要意義，所以要找到一種行之有效的檢測(cè)法，文章結(jié)合TRIZ進(jìn)化理論，嘗試應(yīng)用液相色譜檢測(cè)法測(cè)定黃芪甲苷含量，通過(guò)實(shí)驗(yàn)檢驗(yàn)證明采用Hypersil ODS-C18（4.6mm×250mm，5μm）色譜柱，以乙腈-水（32：68）為流動(dòng)相的方法快速簡(jiǎn)便、高效。

關(guān)鍵詞：TRIZ；HPLC；黃芪甲苷；含量測(cè)定

黃芪桂枝五物湯噴干粉由黃芪、桂枝、芍藥、生姜、大棗五味藥組成。具有益氣溫經(jīng)、和血通痹；調(diào)養(yǎng)榮衛(wèi)，祛風(fēng)散邪的功效，臨床上可用于治療肩周炎、末梢神經(jīng)炎、坐骨神經(jīng)痛、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、中風(fēng)后遺癥等疾患。噴干粉在生產(chǎn)中常做顆粒劑，片劑或膠囊劑的中間產(chǎn)品，生產(chǎn)中具有一定現(xiàn)實(shí)意義。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用TRIZ理論對(duì)方中君藥黃芪的主要有效成分黃芪甲苷的含量測(cè)定方法進(jìn)行了摸索，以期為黃芪桂枝五物湯新劑型的改進(jìn)提供一定的質(zhì)量依據(jù)。

1 存在的問(wèn)題（矛盾或沖突）

黃芪桂枝五物湯噴干粉中黃芪甲苷的含量需要測(cè)定，但資金少儀器、藥物有限這是一種矛盾。如何解決是需要思考的問(wèn)題。

TRIZ理論中的理想解IFR指出技術(shù)系統(tǒng)是沿著提高其理想度，向最理想系統(tǒng)的方向進(jìn)化。理想度水平衡量公式為：I=ΣUF/ΣHF

式中：I-理想化水平（理想度）；ΣUF-有用功能之和；ΣHF-有害功能之和。

所以在測(cè)量黃芪甲苷的含量過(guò)程中我們應(yīng)遵循利用的資源最少，成本低，效率高的思路。TRIZ理論提供了發(fā)現(xiàn)，解決問(wèn)題的工具和技術(shù)，可以幫助科研人員避免解決問(wèn)題過(guò)程中繁瑣的試湊工作。TRIZ理論自始至終強(qiáng)調(diào)運(yùn)用積極的思維客服慣性思維的束縛，TRIZ理論中克服思維慣性的方式有很多，如最終理想解，用非專業(yè)術(shù)語(yǔ)描述問(wèn)題，STC算子，九屏法，小人法金魚法，物-場(chǎng)分析法等，通常情況下，工程技術(shù)人員解決技術(shù)問(wèn)題的步驟為：一是了解具體問(wèn)題、分析問(wèn)題； 二是查找有關(guān)資料，了解所有已有方法并比較各種方法的優(yōu)缺點(diǎn)；三是結(jié)合具體問(wèn)題的種種限制條件，設(shè)計(jì)出技術(shù)方案。TRIZ理論中常用的科學(xué)效應(yīng)大約有100多個(gè)，作者在分析了該技術(shù)問(wèn)題是測(cè)量問(wèn)題后，直接查找TRIZ的科學(xué)效應(yīng)庫(kù)，從科學(xué)效應(yīng)的功能代碼表中查找到代碼 F22（檢查物體容量的狀態(tài)和特性）。F22中推薦的科學(xué)效應(yīng)和現(xiàn)象有E1（X射線）、E6（標(biāo)記物）、E43（放射現(xiàn)象）、E45（感光材料）、E50（光譜）、E3（巴克豪森效應(yīng)）、E60（熱磁效應(yīng)）等。經(jīng)綜合分析上述幾個(gè)方法，光譜是可以采納的方案[1]，所以我們選擇了液相色譜檢測(cè)法。

2 儀器與試藥

儀器：Agilent Technologies 1200Series型高效液相色譜儀；Agilent數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)（美國(guó)產(chǎn)）；SEDEX-85蒸發(fā)光散射檢測(cè)器；色譜柱：Thermo Electron corporation；Hypersil ODS（C18），（4.6mm×250mm，

5um），填充為十八烷基硅烷鍵合硅膠。流動(dòng)相：乙腈-水（32：68）；流速：1ml/min；柱溫：30℃；黃芪甲苷對(duì)照品：中國(guó)藥品生物檢定所，批號(hào)：110781-200613。

樣品來(lái)源：實(shí)驗(yàn)室自制。

3 溶液制備

3.1 對(duì)照品溶液的制備

按含量測(cè)定項(xiàng)下方法制備對(duì)照品溶液，精密稱定黃芪甲苷對(duì)照品適量，加甲醇制成每lml含黃芪甲苷0.53mg的對(duì)照品溶液。

3.2 供試品溶液的制備

取本品適量，加去離子水15ml攪拌溶解，加水飽和正丁醇振搖提取4次 （25ml、25ml、20ml、20ml），合并正丁醇液，用氨試液充分洗滌2次（20ml、20ml），棄去氨試液，加正丁醇飽和的水振搖提取2次 （20ml、20ml），棄去水層，正丁醇液水浴蒸干，甲醇溶解定容至5ml，為供試品溶液。

4 方法學(xué)考察

4.1 線形范圍及標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

精密吸取對(duì)照品溶液適量，分別稀釋成0.106、0.212、0.318、0.424、0.53mg/ml溶液，分別精密吸取10？滋l按上述條件進(jìn)行測(cè)定，可得到相關(guān)數(shù)據(jù)。

將含量及峰面積取自然對(duì)數(shù)，進(jìn)行線形回歸，以峰面積自然對(duì)數(shù)值為縱坐標(biāo)，以進(jìn)樣量（黃芪甲苷含量）自然對(duì)數(shù)值為橫坐標(biāo)，僅得回歸方程為：Y=5.8352+1.4938X線性關(guān)系（r=0.9994），表明相關(guān)性顯著，具有良好的線性關(guān)系。結(jié)果表明，黃芪甲苷在1.06？滋g～5.3？滋g之間有良好的線性關(guān)系。

4.2 陰性對(duì)照試驗(yàn)

取陰性樣品7g，按供試品溶液的制備方法，制成陰性樣品溶液，精密進(jìn)樣20？滋l.結(jié)果表明，黃芪桂枝五物湯固體湯劑中其他成分對(duì)黃芪甲苷的測(cè)定無(wú)干擾。供試品溶液、對(duì)照品溶液、陰性溶液的色譜圖見圖1。

4.3 精密度試驗(yàn)

分別精密量取同一批黃芪甲苷對(duì)照品溶液10？滋l（0.53mg/ml），重復(fù)進(jìn)樣5次，按含量測(cè)定項(xiàng)下色譜條件測(cè)定峰面積，結(jié)果黃芪甲苷RSD=0.86%（n=5），表明進(jìn)樣精密度良好。

4.4 穩(wěn)定性試驗(yàn)

精密稱取供試品（批號(hào)：20090705）7.0217g，按含量測(cè)定項(xiàng)下制備供試品溶液。精密進(jìn)樣20？滋l，按設(shè)定時(shí)間連續(xù)進(jìn)樣5次，結(jié)果黃芪甲苷RSD=1.81%，表明樣品溶液在12h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

4.5 重復(fù)性試驗(yàn)

稱取同一批號(hào)（批號(hào)：20090705）供試品5份，每份約7g，精密稱定重量，按含量測(cè)定項(xiàng)下制備供試品溶液和測(cè)定，結(jié)果黃芪甲苷RSD=1.91%，表明方法重復(fù)性好。

4.6 加樣回收率試驗(yàn)

取本品（批號(hào)：20090705），稱取5份，每份約3.5g，精密稱定，分別加入濃度為0.23mg/ml的黃芪甲苷對(duì)照品1ml，分別按含量測(cè)定項(xiàng)下制備供試品溶液方法制備并測(cè)定，結(jié)果見表1。

黃芪甲苷平均回收率為98.24%，RSD為1.05%；表明回收率較高，方法可靠。

5 樣品測(cè)定

按上述方法測(cè)定3批樣品中黃芪甲苷含量的平均值為0.0551mg/g，考慮到藥材來(lái)源、以及制劑生產(chǎn)，貯存等因素，按降幅20%計(jì)為本品含量限定值，則其含量應(yīng)不低于0.044mg/g。

6 結(jié)束語(yǔ)

通過(guò)以上方法學(xué)的驗(yàn)證，結(jié)果表明，用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器高效液相色譜法測(cè)定黃芪桂枝五物湯噴干粉中黃芪甲苷的含量，該方法操作簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，適用于該劑型的質(zhì)量控制。

參考文獻(xiàn)

[1]朱險(xiǎn)峰，沙洪，謝小波，等.TRIZ在生物醫(yī)學(xué)工程中的實(shí)證分析[J].天津大學(xué)學(xué)報(bào)（社會(huì)科學(xué)版），2010，12（9）：433-437.

[2]趙敏.TRIZ入門及實(shí)踐[M].北京：科學(xué)出版社，2009（1）.

作者簡(jiǎn)介：李連闖（1980-），男，黑龍江省哈爾濱市人，講師，碩士，從事藥劑學(xué)及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究。