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摘要：探討喜鹽鳶尾（Iris halophila）的化學(xué)成分，并建立起各萃取部分指紋圖譜。采用植物化學(xué)成分系統(tǒng)預(yù)試法、薄層色譜分析技術(shù)及平面色譜圖像定量法對(duì)喜鹽鳶尾化學(xué)成分進(jìn)行分析。結(jié)果顯示，喜鹽鳶尾含有生物堿、有機(jī)酸、酚類、鞣質(zhì)、黃酮、蒽醌、皂甙、香豆素、揮發(fā)油及三萜類化合物，不含有強(qiáng)心甙、氰甙和脂肪族硝基化合物。其石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取相中至少含有9、7、9和6種化合物，經(jīng)與標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照，乙酸乙酯相中含有鳶尾苷；各萃取相中相對(duì)含量最高的斑點(diǎn)依次為2、5、6和4。喜鹽鳶尾化學(xué)成分主要集中在石油醚和乙酸乙酯萃取部分。喜鹽鳶尾含有豐富的活性成分，具有一定的藥用價(jià)值。

關(guān)鍵詞：喜鹽鳶尾（Iris halophila）；化學(xué)成分；薄層色譜

中圖分類號(hào)：S816 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A 文章編號(hào)：0439-8114（2015）07-1702-05

喜鹽鳶尾（Iris halophila）是鳶尾科（Iridaceae）鳶尾屬（Iris）多年生草本植物，主要分布于我國(guó)新疆、寧夏、甘肅等地，在新疆地區(qū)主要分布于天山北麓[1]。喜鹽鳶尾具有清熱、解毒、利尿、通淋、止血等功效，種子、根、莖均可入藥，而且具有抗旱、抗寒和抗蟲害特性強(qiáng)的特點(diǎn)[2]，其藥用價(jià)值已受到中醫(yī)藥行業(yè)的關(guān)注。國(guó)內(nèi)外學(xué)者已對(duì)鳶尾屬植物化學(xué)成分進(jìn)行了大量的研究，發(fā)現(xiàn)鳶尾中含有豐富的次生代謝產(chǎn)物，包括黃酮類、苯醌類、三萜類及二苯乙烯類化合物[3]。目前研究認(rèn)為鳶尾甙和鳶尾苷元等異黃酮類化合物是其主要活性成分，具有抗炎、鎮(zhèn)痛、抗過敏等作用[4]；近期研究發(fā)現(xiàn)其三萜類和苯醌類化合物具有良好的抗癌活性，二苯乙烯類化合物具有較好的自由基清除作用[5]。鳶尾屬植物種類多，分布廣，目前僅對(duì)其中少數(shù)植物進(jìn)行了深入研究，喜鹽鳶尾的研究報(bào)道較少，尚處于未開發(fā)狀態(tài)，目前缺乏對(duì)其化學(xué)成分的系統(tǒng)研究。新疆喜鹽鳶尾的資源豐富，深入研究喜鹽鳶尾化學(xué)成分及其藥理活性，對(duì)喜鹽鳶尾的綜合利用具有重要的理論價(jià)值。本試驗(yàn)通過植物化學(xué)成分系統(tǒng)預(yù)試、薄層色譜分析、平面色譜圖像定量等技術(shù)，對(duì)喜鹽鳶尾化學(xué)成分進(jìn)行初步分析，為喜鹽鳶尾活性成分的篩選和薄層指紋圖譜的建立奠定基礎(chǔ)。

1 材料與方法

1.1 材料、試劑及設(shè)備

喜鹽鳶尾于2013年6月采集于阿克蘇市拜城縣，由塔里木大學(xué)動(dòng)物科學(xué)學(xué)院草業(yè)科學(xué)學(xué)科組鑒定。樣品經(jīng)陰干、粉碎后保存?zhèn)溆?。鳶尾甙標(biāo)準(zhǔn)品購(gòu)自中國(guó)藥品生物制品檢定所（批號(hào)：111632-201201）；薄層層析硅膠GF254（天津光復(fù)精細(xì)化工研究所）；試驗(yàn)用水為去離子水。

KQ-400DB型醫(yī)用數(shù)控超聲清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）；4001型旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀（德國(guó)海道爾夫公司）；SHB-Ⅲ型循環(huán)水式多用真空泵（河南鄭州長(zhǎng)城科工貿(mào)公司）；WD-9403B型紫外儀（北京六一儀器廠）；SCANNER3型薄層掃描儀，定量毛細(xì)管（瑞士CAMAG公司）；Direct-Q3型超純水系統(tǒng)（美國(guó)Millipore公司）。

1.2 喜鹽鳶尾化學(xué)成分預(yù)試驗(yàn)

參考文獻(xiàn)[6]的方法，制備喜鹽鳶尾石油醚提取液、乙醇提取液和水提取液，進(jìn)行生物堿、黃酮、氨基酸、多酚、皂甙、香豆素、蒽醌、三萜類化合物、甾體、強(qiáng)心甙等化學(xué)成分的檢測(cè)。參考文獻(xiàn)[7]的方法，對(duì)喜鹽鳶尾氰甙和脂肪族硝基化合物進(jìn)行專項(xiàng)檢測(cè)。

1.3 喜鹽鳶尾化學(xué)成分薄層色譜分析

稱取喜鹽鳶尾干草粉1 kg，加入5 L乙醇，超聲波輔助提取2 h，過濾，收集提取液。如此重復(fù)3次，合并濾液，減壓濃縮得到總浸膏。將總浸膏分散于2倍體積的超純水中，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，即得喜鹽鳶尾各極性段萃取部分。將各萃取部分用毛細(xì)管取樣，點(diǎn)樣于自制硅膠板，上行法展開，在距薄層板上緣1 cm處取出，揮干展開劑，先在紫外燈下觀察，然后分別用碘蒸汽和體積分?jǐn)?shù)為5%硫酸乙醇顯色，記錄各斑點(diǎn)顏色并計(jì)算Rf值。

1.4 喜鹽鳶尾化學(xué)成分相對(duì)含量測(cè)定

利用薄層掃描儀對(duì)各萃取相展開、顯色效果最好的薄層板進(jìn)行分析。采用連續(xù)掃描方式對(duì)顯色斑點(diǎn)進(jìn)行掃描，每個(gè)斑點(diǎn)掃描3次，取平均數(shù)作為峰面積進(jìn)行計(jì)算。

Xn=■×100%

Xn表示編號(hào)為n的斑點(diǎn)的相對(duì)百分含量，%；Sn表示編號(hào)為n的斑點(diǎn)的峰面積；m表示薄層色譜圖中有m個(gè)斑點(diǎn)。

2 結(jié)果與分析

2.1 喜鹽鳶尾化學(xué)成分預(yù)試驗(yàn)結(jié)果

根據(jù)喜鹽鳶尾化學(xué)成分系統(tǒng)預(yù)試驗(yàn)與單項(xiàng)預(yù)試驗(yàn)的檢測(cè)結(jié)果可知，喜鹽鳶尾含有生物堿、氨基酸及多肽、皂甙、酚類、鞣質(zhì)、糖及多糖、黃酮及其苷類、有機(jī)酸、蒽醌類、三萜類化合物及甾體、香豆素、揮發(fā)油，不含有強(qiáng)心甙、氰甙和脂肪族硝基化合物。

2.2 喜鹽鳶尾總浸膏的制備及各極性溶劑萃取結(jié)果

1 kg喜鹽鳶尾樣品經(jīng)超聲提取后得總浸膏104.55 g，出膏率為10.5%?？偨嘁来问褂檬兔?、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取，分別得到4個(gè)萃取相浸膏19.22、10.06、20.44和6.37 g，萃取率分別為18.4%、9.6%、19.6%和6.1%。

2.3 喜鹽鳶尾各萃取相薄層色譜分析結(jié)果

喜鹽鳶尾石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取相各使用5種展開劑展開。由表1可知，石油醚/乙酸乙酯（6∶4，V/V）對(duì)石油醚相展開效果最佳，硫酸乙醇顯色呈現(xiàn)9個(gè)斑點(diǎn)；由表2可知，氯仿/乙酸乙酯（6∶4，V/V）對(duì)氯仿相展開效果最佳，硫酸乙醇和碘蒸汽顯色均呈現(xiàn)7個(gè)斑點(diǎn)；由表3可知，乙酸乙酯/乙醇（8∶2，V/V）對(duì)乙酸乙酯相展開效果最佳，365 nm波長(zhǎng)紫外燈下顯色呈現(xiàn)9個(gè)斑點(diǎn)，經(jīng)與標(biāo)準(zhǔn)品比較，其中Rf值為0.54的黃色斑點(diǎn)為鳶尾苷；由表4可知，氯仿/甲醇（2∶8，V/V）對(duì)正丁醇相展開效果最佳，硫酸乙醇顯色呈現(xiàn)6個(gè)斑點(diǎn)。

2.4 喜鹽鳶尾各萃取相化學(xué)成分相對(duì)含量測(cè)定結(jié)果

選取喜鹽鳶尾各萃取相展開效果最好的硅膠板，顯色后應(yīng)用薄層掃描儀進(jìn)行掃描，通過峰面積計(jì)算各萃取相斑點(diǎn)的相對(duì)含量，測(cè)定結(jié)果見表5。其石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取相中相對(duì)含量最高的斑點(diǎn)依次為2、5、6和4。

3 小結(jié)與討論

目前，從鳶尾屬植物中分離得到的化合物主要包括黃酮類及其糖苷、苯醌類、三萜類和二苯乙烯類化合物，其中黃酮類和三萜類化合物具有顯著的生物活性。但關(guān)于新疆喜鹽鳶尾化學(xué)成分的報(bào)道較少[8]，本試驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)喜鹽鳶尾含有黃酮及其苷類、三萜類化合物及甾體，但未見其相關(guān)分離鑒定的報(bào)道，需進(jìn)一步研究證實(shí)。

薄層色譜技術(shù)是一種簡(jiǎn)便、快速、微量、結(jié)果直觀的分離方法，已廣泛應(yīng)用于植物化學(xué)成分定性分析和快速分離，兼?zhèn)溆屑埳V和柱色譜的優(yōu)點(diǎn)。薄層色譜分析可以初步判定植物中化學(xué)成分的種類，也可應(yīng)用于中藥材及其制劑的真?zhèn)舞b別、質(zhì)量控制和資源調(diào)查等，是目前建立中藥指紋圖譜的常用分析手段。同時(shí)，薄層色譜可提供直觀的可見光或熒光圖像，借助于薄層掃描儀可以得到不同層次的圖譜和相應(yīng)的積分?jǐn)?shù)據(jù)，從而對(duì)化合物進(jìn)行相對(duì)含量測(cè)定。本試驗(yàn)通過對(duì)喜鹽鳶尾各萃取部分薄層色譜分析，其石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取部分各至少含9、7、9、6種化合物；其中黃酮類化合物主要集中在乙酸乙酯部位，與其他鳶尾屬植物的報(bào)道結(jié)果相吻合[9-11]。與鳶尾苷標(biāo)準(zhǔn)品對(duì)照，發(fā)現(xiàn)其中第5個(gè)斑點(diǎn)與標(biāo)準(zhǔn)品顯色的顏色和Rf完全一致，初步證明此萃取部分含有鳶尾苷，其他黃酮類成分有待進(jìn)一步深入研究。通過薄層掃描儀測(cè)定，乙酸乙酯萃取相中鳶尾苷相對(duì)含量最高，表明喜鹽鳶尾具有較高的藥用價(jià)值。

喜鹽鳶尾化學(xué)成分主要集中在石油醚和乙酸乙酯萃取相，其中石油醚萃取相中弱極性化合物種類較多、但相對(duì)含量較低；氯仿和正丁醇萃取相中強(qiáng)極性化合物的種類較多，而且相對(duì)含量也較高；乙酸乙酯萃取部分強(qiáng)極性化合物相對(duì)含量較高，所占比重最大。本試驗(yàn)對(duì)喜鹽鳶尾化學(xué)成分進(jìn)行了初步分析，為喜鹽鳶尾化學(xué)成分的進(jìn)一步研究及其各萃取相指紋圖譜的建立提供依據(jù)。同時(shí)，還從乙酸乙酯萃取相中發(fā)現(xiàn)了鳶尾苷，為喜鹽鳶尾的藥用研究提供理論基礎(chǔ)。

通過植物化學(xué)成分系統(tǒng)預(yù)試、薄層色譜分析及平面色譜圖像定量，發(fā)現(xiàn)喜鹽鳶尾含有生物堿、氨基酸及多肽、皂甙、酚類、鞣質(zhì)、糖及多糖、黃酮及其苷類、有機(jī)酸、蒽醌類、三萜類化合物及甾體、香豆素、揮發(fā)油，不含有強(qiáng)心甙、氰甙和脂肪族硝基化合物。其石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇萃取相中至少含有9、7、9和6種化合物，乙酸乙酯萃取相中含有鳶尾苷，其化學(xué)成分主要集中在石油醚和乙酸乙酯萃取部分。

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