【摘 要】尼群地平為二氫吡啶類鈣通道阻滯劑，具有顯著而持久的降壓及血管擴(kuò)張作用。固定相為：依利特hypersilBDSC18色譜柱（4.6*250*5u），乙腈-甲醇-四氫呋喃-水（10：15：25∶50）為流動(dòng)相，檢測(cè)波長(zhǎng)為237nm；尼群地平在40～320μg·mL-1范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。尼群地平的平均回收率為99.3%。本法簡(jiǎn)便、重現(xiàn)性好、回收率高，可用于尼群地平片中尼群地平的含量測(cè)定。

【關(guān)鍵詞】尼群地平片；尼群地平；測(cè)定

尼群地平化學(xué)名為2，6-二甲基-4-（3-硝基苯基）-1，4-二氫-3，5-吡啶二甲酸甲乙酯。尼群地平為二氫吡啶類鈣通道阻滯劑。尼群地平化具有顯著而持久的降壓及血管擴(kuò)張作用[1-3]。尼群地平化用于治療高血壓。目前生產(chǎn)尼群地平片的廠家主要有哈藥集團(tuán)制藥總廠、上海信誼天平藥業(yè)有限公司、陜西春暉藥業(yè)有限公司、成都第一藥業(yè)有限公司、云南白藥集團(tuán)大理藥業(yè)有限責(zé)任公司、廣東華南藥業(yè)集團(tuán)有限公司、合肥久聯(lián)制藥有限公司、安徽省潤(rùn)康藥業(yè)有限公司、浙江萬(wàn)邦藥業(yè)股份有限公司、唐山吉祥藥業(yè)有限責(zé)任公司、遼寧康泰藥業(yè)有限公司、大連泛谷制藥有限公司、山西蘭花藥業(yè)有限公司等。本文用高效液相法對(duì)尼群地平片中的尼群地平的進(jìn)行了含量測(cè)定。

1.儀器與試藥

1.1儀器

EX1600四元低壓梯度液相色譜儀（南京科捷分析儀器有限公司）；CO-1000型色譜柱溫箱（武漢恒信世紀(jì)科技有限公司）；UV-1800紫外/可見(jiàn)分光光度計(jì)（上海美譜達(dá)儀器有限公司）；XYJ-H帕恩特實(shí)驗(yàn)室中央超純水系統(tǒng)（北京湘順源科技有限公司）；瑞士梅特勒-托利多MS精密天平（梅特勒-托利多中國(guó)公司）；QTSXR10260數(shù)控型超聲波清洗器（天津市瑞普電子儀器公司）；TΜ-1901 雙光束紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)（北京普析通用儀器有限責(zé)任公司）。

1.2試藥

乙腈（淄博市淄川區(qū)鑫川化工廠）、磷酸（湖北巨勝科技有限公司）、鹽酸（襄樊金譯成精細(xì)化工有限公司）、甲醇（商丘市瑞普化工有限公司）、冰乙酸（淄博市淄川區(qū)鑫川化工廠）、磷酸氫二銨（淄博市淄川區(qū)鑫川化工廠）、四氫呋喃（襄樊金譯成精細(xì)化工有限公司）。

2.含量測(cè)定

2.1色譜條件

依據(jù)查閱文獻(xiàn)及考查的結(jié)果，確定色譜條件如下[4-13]。色譜柱為依利特hypersil BDSC18 色譜柱（4.6*250*5u）；乙腈-甲醇-四氫呋喃-水（10：15：25∶50）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為237nm；流速1.0mL·min-1；柱溫：30℃。理論板數(shù)按尼群地平峰計(jì)算應(yīng)不得低于2000。

2.2供試品溶液的制備

取尼群地平片適量，研細(xì)，精密稱定至容量瓶?jī)?nèi)，加流動(dòng)相適量超聲溶解，放涼，流動(dòng)相定容，過(guò)0.45μm的濾膜，即得。

2.3對(duì)照品溶液的制備

精密稱取尼群地平對(duì)照品約50mg，置50毫升棕色容量瓶中，用甲醇超聲波振蕩溶解并稀釋至刻度，搖勻，精密吸取10毫升，置100毫升棕色容量瓶中，用甲醇超聲波振蕩溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得（每1mL溶液中含尼群地平100μg）。

2.4陰性干擾試驗(yàn)

按方中比例取尼群地平片輔料，按照制備工藝方法制成陰性制劑，按2.3項(xiàng)下方法制成供試品溶液，按色譜條件測(cè)定。結(jié)果表明：在選定條件下測(cè)得的陰性液吸收曲線在與尼群地平相同保留時(shí)間處不存在吸收峰，說(shuō)明此方法具有較強(qiáng)的專屬性。

2.5標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備

制備濃度為40μg·mL-1、80μg·mL-1、160μg·mL-1、200μg·mL-1、240μg·mL-1、280μg·mL-1、320μg·mL-1的對(duì)照品溶液，分別精密吸取10μL注入HPLC，記錄色譜圖。以峰面積積分值A(chǔ)（μg）為橫坐標(biāo)，進(jìn)樣量為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，計(jì)算回歸方程。試驗(yàn)表明，尼群地平對(duì)照品在40～320μg·mL-1范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

2.6精密度試驗(yàn)

精密吸取尼群地平對(duì)照品溶液10μL重復(fù)進(jìn)樣6次，測(cè)定峰面積積分值，對(duì)照品峰面積積分值的RSD為0.63%。結(jié)果表明，本實(shí)驗(yàn)精密度良好。

2.7重現(xiàn)性試驗(yàn)

分別稱取同批尼群地平片樣品6份，分別制備成供試品，按色譜條件測(cè)定含量，并計(jì)算樣品的RSD值為0.55%，結(jié)果表明，此含量測(cè)定方法的重現(xiàn)性良好。

2.8穩(wěn)定性試驗(yàn)

取供試品溶液，分別在0，1，2，3，4h精密吸取供試品溶液注入液相色譜儀，進(jìn)樣測(cè)定，供試品尼群地平峰面積積分值的RSD為0.63%。結(jié)果表明尼群地平至少在4h內(nèi)穩(wěn)定。

2.9回收率試驗(yàn)

采用加樣回收試驗(yàn)，取已知含量的同一批供試品各6份，精密稱定，分精密添加一定量的尼群地平對(duì)照品，按供試品制備所述方法制備供試品溶液，測(cè)定含量（同時(shí)測(cè)定樣品含量），計(jì)算回收率。6次測(cè)定的平均回收率為99.3%，RSD為0.83%。

2.10樣品含量測(cè)定

依照上述含量測(cè)定方法，測(cè)定尼群地平片三批樣品中尼群地平的含量，結(jié)果三批樣品的含量分別為標(biāo)示量的99.3%、100.1%、100.5%。

3.討論

分別考察乙腈-甲醇-四氫呋喃-水（10：15：25∶50），乙腈-甲醇-水 （20∶10：70），乙腈-甲醇-冰乙酸-水（15：15∶3∶67），乙腈-甲醇-四氫呋喃-水（10：15：35∶40），乙腈-甲醇-水（20∶20：60），乙腈-甲醇-四氫呋喃-水（10：25：25∶40），磷酸鹽緩沖液（0.01mol/L磷酸氫二銨溶液， 用磷酸調(diào)節(jié)pH 值6.0）-乙腈（50：50）不同比例的流動(dòng)相，結(jié)果以乙腈-甲醇-四氫呋喃-水（10：15：25∶50）為流動(dòng)相，供試品各峰分離效果最好，故選用乙腈-甲醇-四氫呋喃-水（10：15：25∶50）為流動(dòng)相。本實(shí)驗(yàn)采用高效液相法對(duì)尼群地平片中尼群地平的含量進(jìn)行測(cè)定，為今后對(duì)尼群地平片的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)修訂提供依據(jù)。本實(shí)驗(yàn)方法是一種簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、安全的測(cè)定尼群地平片含量的方法。尼群地平片中尼群地平的含量為標(biāo)示量的95-105%。

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