免疫雞的蛋黃是豐富的低成本多克隆抗體的來源之一。相對于少量保守的哺乳動物蛋白，卵黃抗體更易引發(fā)持續(xù)的免疫反應(yīng)，一個雞蛋可以收獲超過100 mg的特異抗體?？诜u卵黃抗體可以用來和動物的傳染性腹瀉病原產(chǎn)生免疫反應(yīng)。因此，這些抗體在實際生產(chǎn)中可以用來控制某些由病原微生物引起的腸道疾病，尤其是對于早期斷奶仔豬。在我們實驗室，我們用本地采集的ETEC K88+毒株的纖毛抗原免疫雞群以獲得抗體，同時用該毒株分別給3日齡和14日齡的仔豬進(jìn)行攻毒。飼喂含ETEC抗體卵黃粉的豬產(chǎn)生短暫的腹瀉，幾乎全部存活，且存活豬的增重良好。而只飼喂不含特異抗體普通蛋黃粉的對照組豬群產(chǎn)生了嚴(yán)重的腹瀉、脫水、失重，部分豬在48 h內(nèi)死亡。抗體處理過的豬沒有ETEC K88+的病原排出，而沒經(jīng)處理的攻毒豬有病原排出。用從豬的黏液中分離的特異性的ETEC K88+的受體做的粘附實驗顯示卵黃抗體可以阻止ETEC結(jié)合到受體上，這也支持了卵黃抗體可以阻止大腸桿菌的影響。這些結(jié)果說明少量的卵黃抗體就可以高效保護(hù)仔豬對抗ETEC病原的影響。同樣的處理方案可以用于控制各種家畜的其他疾病，也可能用于人類疾病的防治。

中圖分類號：S816.79 文獻(xiàn)標(biāo)識碼：C 文章編號：1001-0769（2015）10-0075-02

眾所周知，產(chǎn)腸毒素性大腸桿菌（Enterotoxigenic Escherichia coli，ETEC）引起的腹瀉是迄今為止新生仔豬中最常見的腸道大腸桿菌病。粘附于上皮的ETEC在豬小腸中定植還是新生仔豬和斷奶后仔豬的大多數(shù)胃腸道紊亂的誘因。一項對斷奶前疾病的最新調(diào)查發(fā)現(xiàn)，腹瀉是斷奶前仔豬發(fā)病率最高的疾病，占斷奶前死亡率的11 %，其中ETEC是主要病因和唯一的傳染原。仔豬斷奶后大腸桿菌性腹瀉（Post-weaning E. coli Diarrhoea，PWD）位居第二，發(fā)生于斷奶后3 d～10 d。這種疾病會增加仔豬死亡率，降低生長速度，是導(dǎo)致養(yǎng)豬業(yè)經(jīng)濟(jì)損失的主要因素，也是多數(shù)豬場仔豬斷奶后死亡的最常見誘因，造成1.5 %～2 %的仔豬在斷奶后死亡。

與腸道定植有關(guān)的ETEC菌株可表達(dá)K88、K99和987 P纖毛粘附素。這些粘附素位于大腸桿菌延伸出的棒狀纖毛中，并與腸壁上的特異性受體結(jié)合。因此，它們?yōu)榇竽c桿菌固定于宿主動物提供了高度特異性的方法，也是病原感染的先決條件。在全球養(yǎng)豬數(shù)量較多的地區(qū)發(fā)現(xiàn)，含有K88+纖毛抗原的ETEC是最主要的大腸桿菌。據(jù)估計，K88+ETEC引起的死亡占每年1 000萬頭死亡仔豬中的50 %。

對于新生仔豬和斷奶后仔豬而言，與腹瀉有關(guān)的問題在未來將變得更為嚴(yán)重。集約化高密度養(yǎng)殖趨勢是一個重要誘因。早期斷奶趨勢（14～21日齡而不是21～28日齡）是另一種誘因。此外，微生物對抗生素耐藥性的增強(qiáng)以及監(jiān)管機(jī)構(gòu)禁止或大幅度減少飼料抗生素使用的壓力也是問題產(chǎn)生的原因。本文概述了使用治療性抗體控制仔豬腸道疾病的方法，重點為ETEC菌株K88。

1 早期斷奶與腹瀉病

養(yǎng)豬業(yè)特別重視提高年斷奶仔豬數(shù)，因而導(dǎo)致斷奶日齡下降。多年來這已經(jīng)成為養(yǎng)豬業(yè)的趨勢。但早期斷奶仔豬一般特征是生長性能較差（斷奶后“遲滯”圖1）。仔豬在斷奶前攝入的是非常適口、易于消化的母乳，其初乳中含有高水平的免疫球蛋白。但在斷奶時，通常給仔豬飼喂干燥的植物性日糧，其中含有不易利用的高含量復(fù)雜碳水化合物。較低消化率的大豆蛋白、對豆粕短暫的過敏反應(yīng)以及無法抵抗的腸道疾病均可能導(dǎo)致早期斷奶仔豬的生長較差。在多年前就成功使用配合日糧進(jìn)行3周齡的早期斷奶，此類日糧可減輕但不能阻止3周齡斷奶后生長停滯。一個令人興奮的新進(jìn)展是在早期斷奶仔豬中添加從屠宰場獲得的豬血副產(chǎn)品噴霧干燥血漿蛋白。近年來對血漿蛋白進(jìn)行了多項試驗（表1）。這些研究表明，血漿蛋白可持續(xù)顯著地改善仔豬的采食量和增重，在斷奶一周內(nèi)效果最為明顯。此外，腹瀉評分下降，表明血漿蛋白因帶有腸道病原體的抗體，可能具有治療效果。如上所述，在日糧中添加噴干豬血漿粉，其生產(chǎn)性能與對照處理相比顯著改善。使用噴霧干燥血漿的缺點是相對成本較高，抗體水平未知、含量不定。這種產(chǎn)品的添加比例為總?cè)占Z的3 %～10 %。

2 治療性抗體的需要及可能來源

因為近年來許多微生物已對抗生素產(chǎn)生了耐藥性，對替代抗生素控制腸道疾病產(chǎn)生了需求。這不僅對動物產(chǎn)業(yè)也對人類具有潛在的嚴(yán)重后果。在一個講座中，來自洛克菲勒大學(xué)的Alexander Tomasz博士警告說：“我們已經(jīng)瀕臨一場醫(yī)學(xué)災(zāi)難，這會讓我們的醫(yī)生回到前抗生素時代，由于缺乏有效的抗生素，很輕微的感染就會導(dǎo)致死亡”。這可怕的預(yù)警，10年前會作為笑談，現(xiàn)在，耐藥菌株產(chǎn)生的耐藥性幾乎針對所有的科學(xué)研究的抗生素。尤其令人擔(dān)心的是，不僅僅是耐藥菌株的產(chǎn)生，而且它們還會產(chǎn)生新的毒素。最近暴發(fā)的人的大腸桿菌0157：H7的感染，對細(xì)菌的耐藥性快速轉(zhuǎn)移至新宿主的能力的新情況及反措施是一個可怕的預(yù)警。大腸桿菌是一種能夠迅速變異的病原體，已經(jīng)出現(xiàn)了多種對抗生素具有抵抗力的菌株。因此，有必要在人類醫(yī)學(xué)和獸醫(yī)學(xué)中開發(fā)控制這種微生物的替代策略，特別是在養(yǎng)豬業(yè)中。此外，在畜牧業(yè)中使用多種抗生素已經(jīng)導(dǎo)致禁用抗菌素的壓力越來越大，因為有強(qiáng)大的證據(jù)表明一種病原體的抵抗力（如一種動物病原體）可以容易地傳遞給另外一種病原體，如一種人類病原體。

母豬接種特定的大腸桿菌菌株可為仔豬提供對接種病原體的被動免疫。不過這種保護(hù)是短暫的，在斷奶后不久就會失去所有保護(hù)力。由于大腸桿菌病的發(fā)生會早于其獲得免疫力的時間，因而免疫也不能保護(hù)這些仔豬免于感染ETEC?？刂聘腥灸c道病原體的一個極具吸引力且有效的替代方法是使用治療性抗體。這些抗體可以由任何一個動物生產(chǎn)并通過口服給另外一頭動物以控制特定疾病。

使用抗體的優(yōu)點是它們可提供一種長期可持續(xù)控制病原體的方法。這樣一種治療非常有效，不會導(dǎo)致抗性菌株產(chǎn)生，因此可節(jié)約抗菌素的使用，且相對廉價?？贵w可以從多個來源獲得，包括牛奶初乳、動物血液、轉(zhuǎn)基因植物或微生物以及卵黃。從初乳獲取抗體不太實際，因為初乳只分泌很短一段時間。噴霧干燥血漿蛋白中的抗體可能非常有效（表1），但迄今為止還沒有公開信息表明這種產(chǎn)品能夠抵抗包括大腸桿菌在內(nèi)的多種腸道致病菌。

毫無疑問，不同來源的血漿蛋白抵抗特定病原體的能力存在很大差別，因為血漿蛋白中和特定病原體的能力取決于采集血液豬的免疫和患病史。目前單克隆抗體生產(chǎn)技術(shù)價格高昂，但它們在控制某些疾病方面是非常有效的。最終的目標(biāo)是形成一個幾乎擁有無盡特異性的抗體庫，且其合成不依賴于動物或其細(xì)胞。而且后續(xù)過程將涉及微生物或植物中抗體生成，目前不能用于大規(guī)?？贵w生產(chǎn)。

3 以雞作為治療性抗體的來源

蛋黃被認(rèn)為是特異性抗體的豐富來源。與哺乳動物相比，由于禽類與哺乳動物之間的系統(tǒng)發(fā)育距離、生產(chǎn)的低成本、便利性以及考慮到合規(guī)性，雞可提供更為特異性的抗體。雞蛋沒有交叉感染，佐劑不會發(fā)生哺乳動物那樣的嚴(yán)重反應(yīng)。研究還表明蛋雞長時間產(chǎn)生和維持高水平的特異性抗體是可能的。一羽母雞每年產(chǎn)蛋200～300枚，每枚蛋黃含有大約150 mg的抗體，能中和大量的微生物。卵黃或純化抗體（IgY）可以進(jìn)行凍干或噴霧干燥，不會損失活性，并可以直接飼喂給仔豬，以提供針對特定病原體的保護(hù)。此外，卵黃是非常容易消化的營養(yǎng)素來源。因此卵黃是抗體的一個良好來源，可控制豬的腸道病原體。

未完待續(xù)