孫晶波，姜國志

(1.石藥集團(tuán)恩必普藥業(yè)有限公司，河北 石家莊 052160；2.中藥注射劑研發(fā)國家地方聯(lián)合工程實驗室，河北 石家莊 051430)

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HPLC測定白鮮皮配方顆粒中梣酮含量

孫晶波1，姜國志2*

(1.石藥集團(tuán)恩必普藥業(yè)有限公司，河北 石家莊 052160；2.中藥注射劑研發(fā)國家地方聯(lián)合工程實驗室，河北 石家莊 051430)

目的：考察HPLC測定白鮮皮配方顆粒中梣酮含量的分析方法。方法：DIONEX Acclaim?120 C18(4.6mm×250mm，5μm)色譜柱，以甲醇-水(55∶45)為流動相；檢測波長為236nm。結(jié)果：梣酮的線性范圍為0.06056～2.4224μg，含量為42mg/g，回收率為98.5%，RSD為0.86%。結(jié)論：該法簡便準(zhǔn)確，適用于白鮮皮配方顆粒的質(zhì)量控制。

HPLC；白鮮皮；配方顆粒；梣酮；含量測定

中藥配方顆粒是根據(jù)處方中藥物的不同性質(zhì)選用不同制劑工藝制備而成的顆粒狀劑型，具有快捷、簡單、方便、衛(wèi)生的特點[1]。白鮮皮配方顆粒由蕓香科植物白鮮DictamnusdasycarpusTurcz.的干燥根皮制成配方顆粒，有清熱燥濕、祛風(fēng)解毒的作用，用于治療濕熱瘡毒、黃水淋漓、濕疹、風(fēng)疹、疥癬瘡癩、風(fēng)濕熱痹、黃疸尿赤等癥[2]。梣酮是白鮮皮的主要化學(xué)成分之一，具有良好的保肝降酶和抑制肝纖維化、抑菌、殺蟲等活性[3]，其含量測定主要采用HPLC法[4]，本研究重點考察白鮮皮配方顆粒中梣酮含量HPLC法檢測的可行性。

1 實驗材料

高效液相色譜儀：戴安U3000(帶二極管陣列檢測器)；DIONEX Acclaim?120 C18(4.6mm×250mm，5μm)色譜柱；賽多利斯股份公司CPA225D電子分析天平(德國)；甲醇為色譜純試劑(Fisher Scientific)，水為純化水；梣酮對照品購自中國食品藥品檢定研究院(批號：1117000-200501)，白鮮皮配方顆粒樣品(3批，批號：100209,100210,100211)由神威藥業(yè)集團(tuán)有限公司提供。

2 方法與結(jié)果

2.1 對照品溶液配制

稱取梣酮對照品30.28mg置于100mL量瓶中，用甲醇溶解、定容、搖勻，即得對照品儲備液；再精密量取此儲備液5mL置25mL量瓶中，用甲醇定容、搖勻，即得對照品溶液。

2.2 供試品溶液制備

取白鮮皮配方顆粒適量，研細(xì)，精密稱定3g，置具塞錐形瓶中，精密加入甲醇25mL，稱定重量，加熱回流1h，放冷，再稱定重量，用甲醇補足減失的重量，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.3 色譜試驗

以甲醇-水(55∶45)為流動相；檢測波長為236nm。分別取上述對照品溶液和供試品溶液各10μL，注入色譜儀，結(jié)果見圖1、圖2。

圖2 供試品溶液HPLC圖譜

2.4 線性關(guān)系考察

精密吸取梣酮對照品溶液1.0、5.0、10μL，梣酮對照品

儲備液4.0、6.0、8.0μL，注入液相色譜儀，按上述色譜條件測定，以峰面積積分值為縱坐標(biāo)，梣酮進(jìn)樣量(μg)為橫坐標(biāo)，得回歸方程為Y=43.363X+1.005，R=0.999 95，結(jié)果梣酮在0.060 56～2.422 4μg范圍內(nèi)呈良好的線性關(guān)系。

2.5 精密度實驗

精密吸取對照品溶液(60.4μg/mL)10μL，連續(xù)進(jìn)樣6次，按上述色譜條件測定峰面積，結(jié)果梣酮峰面積RSD=0.26%，表明儀器精密度良好。

2.6 穩(wěn)定性試驗

分別精密吸取同一供試品溶液10μL，每隔2h進(jìn)樣1次，測得梣酮的峰面積RSD為0.86%(n=5)，表明梣酮在8h內(nèi)穩(wěn)定性良好。

2.7 重復(fù)性實驗

取同一批白鮮皮樣品，按上述方法制備供試品溶液6份，在上述色譜條件下吸取10μL進(jìn)樣，測定梣酮含量，結(jié)果其峰面積RSD為0.98%(n=6)，表明重復(fù)性良好。

2.8 加樣回收試驗

分別向6個具塞錐形瓶中加入上述梣酮對照品儲備液5、5、10、10、20、20mL，揮干溶劑，再精密稱取白鮮皮配方顆粒細(xì)粉約1.5g，加入錐形瓶中，按“2.2”制備回收率試驗供試品溶液，在上述色譜條件下進(jìn)樣分析，梣酮的平均回收率為98.5%，RSD為0.86%，結(jié)果見表1。

表1 回收率試驗結(jié)果

2.9 樣品測定

取3批樣品，按“2.2”制備供試品溶液，在上述色譜條件下進(jìn)樣分析，計算白鮮皮配方顆粒中梣酮含量，見表2。

表2 樣品含量測定結(jié)果

3 討論

本研究旨在尋找白鮮皮配方顆粒中梣酮含量的質(zhì)量控制方法，經(jīng)過查找文獻(xiàn)、初步試驗，確定藥典方法可用于此配方顆粒的含量測定。梣酮在190～400nm做全波長掃描，其最大吸收波長在236nm處；流動相甲醇-水(55∶45)經(jīng)過比例調(diào)節(jié)，確定此比例評價最佳；經(jīng)過多品牌C18色譜柱的試驗，確定DIONEX Acclaim?120 C18(4.6 mm×250mm，5μm)色譜柱效果最佳。研究表明，DIONEX Acclaim?120 C18(4.6 mm×250mm，5μm)色譜柱，以甲醇-水(55∶45)為流動相；檢測波長為236nm的色譜條件適用于白鮮皮配方顆粒梣酮含量的測定。

[1] 符穎.淺談中藥配方顆粒的優(yōu)勢和存在的問題[J].中國熱帶醫(yī)學(xué)，2006，6(4)：682-683.

[2] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[M].一部.北京：中國醫(yī)藥科技出版社,2010：102-103.

[3] 李翔，張新中，鄧赟，等.從白鮮皮中同時制備梣酮、白蘚堿、黃柏酮單體的方法[J].四川大學(xué)學(xué)報，2007,39(4)：68-72.

[4] 原春蘭，楊得鎖.RP-HPLC測定白鮮皮中梣酮含量[J].中國中藥雜志，2006,31(12)：992-994.

(責(zé)任編輯：魏 曉)

Determination of Fraxinellone in Dittany Bark Dispensing Granules by HPLC

Sun Jingbo1，Jiang Guozhi2*

(1.CSPC NBP Pharmaceutical Co.,Ltd,Shijiazhuang 052160,China；2. State-Local Joint Engineering Laboratory of New Drugs Development Technology for TCM Injection，Shijiazhuang 051430，China)

Objective:To determine the content of Fraxinellone in Dittany bark dispensing granules by HPLC.Methods:DIONEX Acclaim?120 C18(4.6mm×250mm，5μm) column was used，Mobile phase consisted of methanol-Water(55∶45)；UV detector wavelength was set at 236nm. Results:The linearity was from 0.06056 to 2.4224μg for fraxinellone，The content is more than 42mg/g，the average recovery was 99.8%，RSD 1.39%.Conclusion:The method is handy and accurate, and can be used for the quality control of Dittany bark dispensing granules

HPLC，Dictamnus Dasycarpus Turcz，Dispensing granules，F(xiàn)raxinellone，Content Determinlation

2014-11-14

河北省科技計劃項目(中藥配方顆粒制備工藝及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究項目)[14272504D]

孫晶波(1982-)，女，石藥集團(tuán)恩必普藥業(yè)有限公司工程師，研究方向為藥品研發(fā)。

姜國志(1981-)，男，中藥注射劑研發(fā)國家地方聯(lián)合工程實驗室工程師，研究方向為藥品工藝、質(zhì)量研究及產(chǎn)業(yè)化。E-mail：15931199089@163.com

R284.2

A

1673-2197(2015)07-0016-02

10.11954/ytctyy.201507008