陳嬌婷,李林福

(贛南醫(yī)學(xué)院,江西 贛州 341000)

?

蛇床子素-TPGS固體分散體制備研究

陳嬌婷,李林福

(贛南醫(yī)學(xué)院,江西 贛州 341000)

目的：以TPGS為載體，研究其對(duì)蛇床子素固體分散體的理化性質(zhì)的影響,為蛇床子素劑型的選擇提供新思路。方法：采用溶劑-熔融法制備蛇床子素固體分散體。應(yīng)用差示掃描量熱分析(DSC)、X射線衍射法(XRD)對(duì)固體分散體進(jìn)行物相鑒定,HPLC法測(cè)定固體分散體的體外溶出度。結(jié)果：固體分散體的 DSC、XRD 圖譜與原料藥及其物理混合物均不同；蛇床子素-TPGS固體分散體的體外溶出度均高于原藥，30min的累積溶出度:原料藥為26%,固體分散體為94%，固體分散體的溶出率高于其物理混合物。 結(jié)論：以TPGS作為蛇床子素的載體,可加速其體外溶出。

蛇床子素-TPGS;固體分散體；制備

蛇床子素(Ost)是從傘形科蛇床子屬植物蛇床的果實(shí)中提取的一種香豆素類化合物，其化學(xué)名稱為7-甲氧基-8-異戊烯基香豆素[1]。現(xiàn)代藥理實(shí)驗(yàn)研究表明，蛇床子素不僅對(duì)心血管系統(tǒng)、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、免疫系統(tǒng)等有重要影響，而且在抗腫瘤、抗骨質(zhì)疏松癥及抗變態(tài)反應(yīng)等方面也均有較強(qiáng)作用[2]。但蛇床子素在水中難溶，口服吸收差，生物利用度低，個(gè)體差異大，限制了其在臨床上的廣泛應(yīng)用。

固體分散技術(shù)是通過(guò)增加藥物分散度、溶解度、溶出速率以提高藥物生物利用度的一種有效方法。本實(shí)驗(yàn)選擇水溶性高分子材料聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯(簡(jiǎn)稱TPGS)[3-5]為載體。TPGS是維生素E的水溶性衍生物，現(xiàn)已廣泛應(yīng)用于制劑研究中，可作為增溶劑、吸收促進(jìn)劑、乳化劑以及作為藥物釋放系統(tǒng)、抗癌藥的載體等[6-7]。

本實(shí)驗(yàn)通過(guò)制備蛇床子素-TPGS固體分散體，考察以TPGS為載體固體分散體中蛇床子素的理化性質(zhì)、體外溶出度變化，以期為蛇床子素口服制劑的制備提供新思路。

1 儀器與試藥

1.1 儀器

X射線衍射儀(D8 Advance型，德國(guó)Bruker公司)；差示掃描熱量?jī)x(Q100，美國(guó)TA公司)；電子天平(Sartorius ALC4100，廣州市上博電子科技有限公司)；高效液相色譜儀(LC-10ATVP型，日本島津)；智能溶出試驗(yàn)儀(ZRS-8G型，天津市盛鑫通達(dá)科技有限公司)；球磨機(jī)(NQM-0.4型，深圳市諾亞制藥設(shè)備有限公司)。

1.2 藥品與試劑

蛇床子素(中國(guó)食品藥品檢定研究院, 批號(hào):110822-200305)；聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯(武漢市海德昌化學(xué)有限公司)；甲醇(色譜純，上海化學(xué)試劑有限公司)；其余試劑均為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 蛇床子素-TPGS固體分散體的制備

采用溶劑-熔融法，先將蛇床子素細(xì)粉溶于少量的甲醇中，然后將蛇床子素甲醇溶液直接加入已熔融的TPGS載體材料(蛇床子素∶TPGS質(zhì)量比為1∶2)中均勻混合，在不斷攪拌下蒸去甲醇，將熔融物傾倒于不銹鋼板上成薄層，移至真空干燥箱內(nèi)干燥，成品研細(xì)，過(guò) 5 號(hào)篩，即得蛇床子素-TPGS固體分散體。

2.2 蛇床子素-TPGS物理混合物的制備

將蛇床子素細(xì)粉與TPGS按質(zhì)量比為1∶2混合均勻，即得。

2.3 固體分散體的物相鑒定

2.3.1 差示掃描量熱法(DSC法) 分別將TPGS、蛇床子素、蛇床子素與蛇床子素的物理混合物、蛇床子素TPGS固體分散體進(jìn)行差示掃描量熱分析。以空鋁鉗鍋為參比池，另一空鋁鉗鍋為樣品池放入樣品, 升溫速度為10℃·min-1,氮?dú)饬魉?0mL·min-1,升溫范圍為20～200℃,DSC 圖譜見(jiàn)圖1。

對(duì)比圖1中a、b、c和d可知：a圖中TPGS 在55℃左右有明顯的熔融峰，b圖中蛇床子素在85℃處出現(xiàn)尖銳的熱峰，為其熔融峰，c圖中，既有TPGS又有蛇床子素的熔融峰。d圖中，熔融的 TPGS成為了蛇床子素的溶劑，蛇床子素只有少量的特征吸熱峰,提示生成了新的物相。

圖1 a-TPGS；b-蛇床子素；c-蛇床子素與蛇床子素 的物理混合物；d-蛇床子素 TPGS固體分散體

2.3.2 X射線衍射法(XRD) 分別將蛇床子素、TPGS、蛇床子素-TPGS物理混合物、蛇床子素-TPGS固體分散體約0.05g放XRD池中進(jìn)行X衍射，測(cè)定條件：Cu靶/石墨單色器；電壓30kV；電流20mA；接受裂縫寬度0.3mm；步長(zhǎng)0.1°·s-1；采樣時(shí)間1s,掃描范圍4.8°～50°。X射線衍射圖譜見(jiàn)圖2。

對(duì)比圖2中a、b、c和d可知:c圖蛇床子素-TPGS物理混合物中，蛇床子素、TPGS的結(jié)晶形態(tài)均未發(fā)生變化。而d圖蛇床子素-TPGS固體分散體中，蛇床子素、TPGS的特征峰均發(fā)生變化，結(jié)晶度顯著降低，表明兩者之間發(fā)生了較強(qiáng)的相互作用，結(jié)晶形態(tài)發(fā)生改變，形成了固體分散體。另外在圖a和圖b中，TPGS載藥中蛇床子素峰有變化但并未完全消失，說(shuō)明可能有部分藥物是以吸附的形態(tài)存在于TPGS載體內(nèi)。

圖2 a-蛇床子素；b-TPGS；c-蛇床子素-TPGS物理混合物； d-蛇床子素-TPGS固體分散體

2.3.3 蛇床子素HPLC法測(cè)定條件 ①色譜條件：色譜柱:C18柱；檢測(cè)波長(zhǎng):322nm；流動(dòng)相：甲醇-水(75∶25)；柱溫:室溫；流速:1mL·min-1。②對(duì)照品溶液的制備：精密稱取蛇床子素對(duì)照品10.0mg于100mL棕色量瓶中，用甲醇稀釋至刻度，配成100μg·mL-1的對(duì)照品溶液。③供試品溶液的制備：精密稱取蛇床子素-TPGS物理混合物、固體分散體各1mg，分別置于2個(gè)10mL量瓶中，用甲醇定容后，超聲，靜置，經(jīng)0.45μm微孔濾膜濾過(guò)，即得供試品溶液。④標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備：精密吸取蛇床子素對(duì)照品溶液1.0、2.0、3.0、5.0、7.0、9.0mL于100mL量瓶中，用甲醇定容，配制成不同濃度的系列標(biāo)準(zhǔn)液，取20μL進(jìn)樣，記錄峰面積。以峰面積(Y)對(duì)濃度(X)作回歸，得到線性方程為：Y=68 988X-11 763，R=0.999 7。線性范圍：1.0～9.0μg·mL-1，蛇床子素量與峰面積呈良好的線性關(guān)系。⑤精密度試驗(yàn)：取對(duì)照品溶液，按上述色譜條件于1天內(nèi)進(jìn)樣3次及連續(xù)3天重復(fù)測(cè)定，計(jì)算得日內(nèi)、日間日內(nèi)RSD為1.67%，日間RSD為1.38%。⑥回收率試驗(yàn)：在線性范圍內(nèi)配制蛇床子素低、中、高質(zhì)量濃度的標(biāo)準(zhǔn)液，按上述色譜條件測(cè)定3次，由線性方程計(jì)算其測(cè)定值，測(cè)定值與真實(shí)值的比值為回收率，計(jì)算得蛇床子素的平均回收率為100.12%,RSD為1.11%。詳見(jiàn)表1。

表1 回收率試驗(yàn)結(jié)果

2.3.4 體外溶出度測(cè)定 按中國(guó)藥典( 2010年版二部) 附錄中規(guī)定的漿法測(cè)定。稱取相當(dāng)于100mg蛇床子素、蛇床子素-TPGS物理混合物、蛇床子素-TPGS固體分散體各6份，分別投入溶出杯中，轉(zhuǎn)速為100r·min-1，溫度恒溫在 (37±0.5)℃，溶出介質(zhì)為40%乙醇磷酸鹽緩沖溶液(PH6.0)，分別于5、10、20、30、40、60min取樣1mL同時(shí)立即補(bǔ)加1mL新鮮溶出介質(zhì)，取出的樣品經(jīng)0.45μm微孔濾膜濾過(guò)，取續(xù)濾液20μL進(jìn)樣，HPLC測(cè)定濃度，HPLC色譜條件同上，計(jì)算累積溶出度，累積溶出度曲線見(jiàn)圖3。

圖3 蛇床子素-TPGS固體分散體、物理混合物、 蛇床子素累積溶出度曲線

蛇床子素-TPGS固體分散體溶出度比蛇床子素、蛇床子素-TPGS物理混合物高，不到5min即達(dá)到80%左右，溶出結(jié)果說(shuō)明以TPGS為載體制備的蛇床子素-TPGS固體分散體能顯著提高蛇床子素的溶出度。

3 討論

TPGS可作為較多難溶性藥物的增溶劑及吸收促進(jìn)劑，在胃腸道內(nèi)易于吸收,化學(xué)性質(zhì)較穩(wěn)定,能顯著增加難溶性藥物的溶出速率,從而提高藥物的生物利用度。TPGS在體內(nèi)可生物降解，比一般的非離子表面活性劑更安全。

本實(shí)驗(yàn)以TPGS為載體采用溶劑-熔融法制備蛇床子素固體分散體，DSC 分析、X射線衍射分析表明：蛇床子素以結(jié)晶狀態(tài)存在于TPGS中，形成了固體分散體；體外溶出度分析顯示：在選用的溶出介質(zhì)條件下，以TPGS為載體的蛇床子素固體分散體的累計(jì)溶出度明顯比原料藥、物理混合物高。

[1] 林愛(ài)花，李勇.蛇床子素藥理作用及相關(guān)研究進(jìn)展[J].醫(yī)學(xué)信息：中旬刊，2010(12)：3868.

[2] LI X X,HARAI,MATSUMIYAT.Effects of osthole on postmenopausal osteoporosis using ovariectomized rats;comparison to the effects of estradio1[J].Biol Pharm Bull， 2002(25):738-742.

[3] 于永新，俞紅凱，王中彥. 聚乙二醇1000維生素E琥珀酸酯應(yīng)用進(jìn)展[J].沈陽(yáng)藥科大學(xué)學(xué)報(bào),2006(6):407-412.

[4] SHIN S C,JIN K.Physicochemical characterization of solid disperdion of furosemide with TPGS[J].Inter J Pharm,2003,251(1-2):79-84.

[5] AMSELEM S.Solid coprecipitates for enhanced bioavailability of lipophilic substances[P].US:5891469,1999-04-06.

[6] LIYAN ZHAO, YIKANG SHI,SHAOHUA ZOU, et al. Formulation and In Vitro Evaluation of Quercetin Loaded Polymeric Micelles Composed of Pluronic P123 and D-a-Tocopheryl Polyethylene Glycol Succinate[J]. Journal of Biomedical Nanotechnology, 2011, 7(3):358-365.

[7] YU L, BRIDGERS A, POLLI J, et al. Vitamin E-TPGS increases absorption flux of an HIV protease inhibitor by enhancing its solubility and permeability[J]. Pharm Res, 1999, 16(12):1812-1817.

(責(zé)任編輯：宋勇剛)

Preparation of Ost-TPGS Solid Dispersions

Chen Jiaoting,Li Lingfu

(Gannan Medical University,Jiangxi 341000,China)

Objective:To investigate the physical and chemical properties of Ost-TPGS,which could provide guidance for chosing formulations of Ost. Methods:Solid dispersions of Ost were prepared by solvent-melting method with TPGS.DSC and XRD spectroscopy were applied to identify the solid dispersions.The in vitro dissolution were detected by HPLC. Results:The DSC and XRD map were different from the crude drug and their physical mixtures.The dissolution rates were faster(94%) than that of the crude drug(26%),and the dissolution rates of the solid dispersions in ratio were higher than the physical mixtures. Conclusion:The in vitro dissolution of Ost can be increased,in which TPGS acts as a carrier.

Ost-TPGS;Solid Dispersions;Preparation

2015-04-06

陳嬌婷(1980-),贛南醫(yī)學(xué)院講師,研究方向?yàn)樗幬镄聞┬团c新技術(shù)。E-mail:chenjiaoting80119@126.com

R284

A

1673-2197(2015)17-0021-03

10.11954/ytctyy.201517011