★ 張小紅 錢星文 楊世林 (1.廣東省食品藥品職業(yè)技術學校 廣州51066;.東方藥林藥業(yè)有限公司 廣州51066;.中藥固體制劑制造技術國家工程研究中心 南昌0006)

藿香正氣雙相膠囊是由部頒標準第十一冊中的藿香正氣膠囊改進而來，由廣藿香、紫蘇葉、半夏、厚樸(姜制)等組成。本方具有散風寒、暢氣機、和脾胃之功效，臨床用于胃腸型感冒，急性胃腸炎、中暑、嘔吐、急慢性腎炎、霍亂吐瀉，水土不服，小兒食傷等。本工藝將富含揮發(fā)油成分的廣藿香、紫蘇葉等藥材，提取揮發(fā)油制成軟膠囊，其他提取部分制成微丸，同裝于硬膠囊中。因制劑中含有液態(tài)和固態(tài)二部分，所以制劑名稱定為藿香正氣雙相膠囊。它可以有效地保存處方中的揮發(fā)性成分，使制劑穩(wěn)定、安全、有效。本文對藿香正氣雙相膠囊進行質量標準進行研究，為保證藿香正氣雙相膠囊的質量進行控制，保障藥品的安全穩(wěn)定。

1 材料

METTLERAE 2400電子天平(瑞士);超聲波清洗器(上海必能信超聲有限公司);GMAG型薄層掃描儀(導津);Agilent 1100高效液相色譜儀(美國安捷倫)。

藿香正氣雙相膠囊及陰性對照膠囊(批號:20040301、20040302、20040303，江西本草天工科技有限責任公司);廣藿香油對照品(鑒別用，批號:0832-9902)、紫蘇對照藥材(批號:120914-200307)、和厚樸酚對照品(含測用，批號:0730-9204)、厚樸酚對照品(含測用，批號:110729-200309)，均由中國藥品生物制品檢定所提供;硅膠G板、GF254板(層析用，青島海洋化工廠);乙腈、甲醇為色譜純，其余試劑為分析純。

2 方法與結果

2.1 薄層鑒別

2.1.1 廣藿香 取本品軟膠囊25粒，置250mL圓底燒瓶中，加水50mL，連接揮發(fā)油測定器，自測定器上端加水至刻度，再加石油醚(60℃～90℃)0.5mL，連接回流冷凝管，加熱至沸，并保持微沸45min，放冷，分取石油醚層，定容至0.5mL，作為供試品溶液。取缺廣藿香藥材處方制備的陰性樣品25粒，按供試品溶液的制備方法制備陰性對照溶液。取廣藿香油對照品適量，加石油醚(60℃～90℃)溶解制成每1mL含20μL的對照品溶液。

吸取上述制備的供試品溶液、陰性溶液及對照品溶液各3μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚-醋酸乙酯-冰醋酸(98∶5∶0.2)為展開劑，展開，而后取出，晾干，噴以5%三氯化鐵乙醇溶液，105℃加熱至斑點顯色清晰。結果在薄層色譜圖中，供試品在與對照品色譜相應的位置上，具有相同顏色的斑點，而陰性無干擾。

2.1.2 紫蘇葉 取本品中軟膠囊50粒，置250mL圓底燒瓶中，加水50mL，連接揮發(fā)油測定器，自測定器上端加水至刻度，再加石油醚(60℃～90℃)0.5 mL，連接回流冷凝管，加熱至沸，并保持微沸45min，放冷，分取石油醚層，定容至0.5mL，作為供試品溶液。取缺紫蘇葉處方制備的陰性對照樣品25粒，按上述樣品制備方法制備陰性對照溶液。另取紫蘇葉對照藥材0.7g，按紫蘇葉供試品溶液的制備方法進行制備，得紫蘇葉對照藥材溶液。

吸取上述供試品溶液、陰性對照溶液和紫蘇油對照藥材溶液各5μL，分別點于同一硅膠G薄層板上，以石油醚-醋酸乙酯(19∶1)為展開劑，展開，取出，晾干，展距15cm，噴以2，4-二硝基苯肼試液。結果顯示在供試品溶液色譜帶上，在與對照藥材圖譜相應位置上，具有相同顏色的斑點，而陰性無顯示。

2.2 厚樸酚與和厚樸酚的含量測定

2.2.1 色譜條件 高效液相色譜儀(Agilent 1100型，DAD檢測器)，色譜柱為Hypersil ODS-C18柱(250mm×4.6mm，5μm);流動相:甲醇:水(65:35);流速:1.0mL/min;柱溫:25℃;檢測波長:294nm。

2.2.2 供試品溶液的制備 取25粒藿香正氣雙相膠囊，取內容物微丸適量，研細，精密稱定1.0g，倒入錐形瓶中，精密吸取50mL甲醇加入，稱定重量，超聲處理30min，冷卻，再稱定重量，加甲醇補足減失的重量，搖勻，離心，用微孔濾膜(0.45μm)濾過，取續(xù)濾液，即得。

2.2.3 對照品溶液的制備 精密稱取厚樸酚、和厚樸酚對照品適量，置于容量瓶中，加甲醇制成每1mL含厚樸酚0.208mg、和厚樸酚0.112mg的對照品溶液，搖勻，即得。

2.2.4 陰性對照溶液的制備 取缺厚樸藥材的處方，按照制備工藝制備陰性成品，按供試品溶液的制備方法制得陰性對照溶液。按HPLC方法中確定的色譜條件進行測定，結果陰性對照未見干擾。供試品色譜與對照品色譜相應的保留時間位置上，有相應的色譜峰，表明厚樸酚、和厚樸酚的峰與其它峰能較好的分離，見圖1-3。

圖1 對照品溶液

圖2 樣品溶液

圖3 陰性溶液

2.2.5 線性關系考察 精密吸取上述制備的厚樸酚與和厚樸酚混合對照品溶液1，2，3，4，5，6，7μL進行進樣，厚樸酚與和厚樸酚的進樣量為橫坐標，以峰面積為縱坐標，進行線性回歸，制備標準曲線。結果厚樸酚對照品在0.208～1.456μg范圍內線性關系良好，回歸方程Y=1 619.2X+1.94(r=0.999 8);和厚樸酚對照品在0.112～0.784μg范圍內線性關系良好，回歸方程Y=1 555.3X+9.16(r=0.999 9)。

2.2.6 重復性試驗 取同一批號的藿香正氣雙相膠囊(批號:20040301)微丸適量，研細，取1.0g，精密稱定，共六份，按供試品溶液的制備方法進行操作，并按色譜條件進行含量測定，經計算厚樸酚與和厚樸酚峰面積的RSD分別為0.63%和1.51%，結果表明本方法的重復性良好。

2.2.7 精密度試驗 精密吸取混合對照品溶液，按色譜條件，連續(xù)進樣6次，每次進樣5μL，經計算厚樸酚與和厚樸酚的峰面積RSD分別為0.58%和0.85%。結果表明儀器精密度良好。

2.2.8 穩(wěn)定性試驗 取供試品溶液，分別于0、3、6、9、12、15、18h時取樣，每次進樣10μL，按液相色譜條件進行測定，結果厚樸酚與和厚樸酚的峰面積RSD分別為0.89%和1.28%，表明兩者在18h內穩(wěn)定。

表1 厚樸酚加樣回收試驗

表2 和厚樸酚加樣回收試驗

2.2.9 加樣回收率試驗 取中試樣品(批號20040301)內容物中的微丸適量，研細，精密稱定，共稱取6份，分別置50mL的容量瓶中，加入一定量的厚樸酚與和厚樸酚對照品，其它按照供試品溶液的制備項下進行操作，制備加樣回收樣品溶液，進樣，每次10μL，結果厚樸酚、和厚樸酚的平均回收率分別為99.76%，100.06%，RSD分別為0.73%，2.1%，表明該方法較為穩(wěn)定可靠，見表1～2。

2.2.10 樣品測定 取藿香正氣雙相膠囊中試產品三批，按“供試品溶液的制備”方法制備樣品，按色譜條件下的方法測定樣品中厚樸酚與和厚樸酚的含量，結果見表3。

表3 樣品中厚樸酚、和厚樸酚含量測定結果(n=3)mg/粒

3 討論

3.1 本文對廣藿香油薄層條件進行了研究 條件

①硅膠G薄層板，展開劑:石油醚(30℃～60℃)-醋酸乙酯-冰醋酸(98∶5∶0.2)，顯色劑:5%三氯化鐵乙醇溶液;條件②硅膠G薄層板，展開劑:石油醚(60℃～90℃)-乙酸乙酯-甲酸(85∶15∶2)，顯色劑:5%香草醛硫酸溶液。

結果發(fā)現①能較好地分離廣藿香油，且陰性無干擾。條件②分離效果不好，斑點發(fā)散。所以選擇條件①為光藿香的薄層鑒別條件。

3.2 本文對紫蘇油薄層條件進行了研究 條件①以對照藥材為參照，薄層板:硅膠G，展開劑:石油醚(60℃～90℃)-醋酸乙酯(19∶1)，顯色劑:2，4-二硝基苯肼試液。試驗結果發(fā)現此條件所得到的薄層圖斑點發(fā)散，且陰性略有干擾。

條件②以對照品為參照，薄層板:硅膠G，展開劑:石油醚(60℃～90℃)-醋酸乙酯(19∶1)，顯色劑:2，4-二硝基苯肼試液。試驗結果發(fā)現此條件所得到的薄層圖斑點清晰，且陰性無干擾。

3.3 液相條件 本文確定的HPLC方法同時測定藿香正氣雙相膠囊中厚樸酚與和厚樸酚的含量，該方法方便快捷、靈敏準確、重復性好，能有效的控制藿香正氣雙相膠囊的質量。